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氯化锂沉淀法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸
2019/08/27 10:19
阅读：254
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方案摘要：
产品配置单：
546-68-9 钛酸四异丙酯
型号： 100毫升
产地：
品牌： 远慕
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异丙苯
型号： ml
产地：
品牌： 远慕
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二异丙胺
型号： ml
产地：
品牌： 远慕
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异丙醇
型号： ml
产地：
品牌： 远慕
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方案详情：
实验原理:
氯化锂沉淀法去除质粒制备物中小片段核酸（包括 DNA 和 RNA ) 的原理是基于两种核酸在氯化锂溶液中的溶解度有所不同。氯化锂是强脱水剂，可降低 RNA 的溶解性 ( Hearst and Vinograd 1961a, b），并剥离染色质上的蛋白质（Kondo 1979)。因此，质粒粗提物中的高分子质量 RNA 和蛋白质可在高浓度氯化锂溶液中形成沉淀，从而可通过低速离心加以分离（实例请见Kondo et al. 1991)。
实验材料:DNA 样品
试剂、试剂盒:乙醇 异丙醇 LiCl 乙酸钠 TE
仪器、耗材 :Sorvsll SS-34 转子或性能相同的替代转子
操作步骤:
一、材料
1. 缓冲液和溶剂
乙醇，异丙醇，LiCl ( 4 mol/L)，乙酸钠（3mol/L, pH 5.2)，TE ( pH 8.0)，含有浓度为 20 μg/ml RNase A 的 TE ( pH 8.0)。
2. 核酸和寡核苷酸
DNA 样品，CsCl 密度梯度离心纯化。
3. 离心机和转子
Sorvsll SS-34 转子或性能相同的替代转子
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