乳粉中三聚氰胺的液相色谱-紫外检测器检测方案

本方案参照《GB/T 22388-2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中第一法，以乳粉为基质进行了加标验证，高中低三水平下，样品的回收率均大于80%，RSD＜10%，满足标准要求，可供客户参考。

准确称取1 g样品于干净离心管中，加入7.5 mL 5%三氯乙酸溶液和2.5 mL乙腈，涡旋混匀后超声提取10 min，再振荡提取10 min，12000 r/min离心5 min。

取上清液于另一干净离心管中，重复上述操作一次，合并两次提取液，若提取液浑浊可多加一次低温离心，取上清液5 mL，加入5 mL水，混匀，作为待净化液，待过柱净化。

biocomma® 多管涡旋混匀仪

活化：5 mL甲醇、5 mL水

上样：上述待净化液

淋洗：5 mL水，5 mL甲醇

洗脱：6 mL 8%氨水甲醇

收集全部洗脱液，50℃下氮吹干，残留物用1 mL流动相定容，涡旋混匀1 min，过尼龙滤膜，上机测定。

biocomma®针式过滤器&样品瓶

取适宜浓度的标准品，用流动相配制成上机浓度分别为200 μg/L，500 μg/L，1000 μg/L，2000 μg/L，5000 μg/L，10000 μg/L的标点，得到标准曲线。

仪器：液相色谱仪，Thermo Fisher U3000

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18

(4.6 mm×250 mm，5 μm)

流动相：A：离子对缓冲试剂   B：乙腈

洗脱方式：A：B=85:15，12 min

流速：1 mL/min

柱温：40℃

检测波长：240 nm

进样量：20 μL

表1  牛初乳粉中三聚氰胺加标回收实验结果

图1 1000 μg/L三聚氰胺标准品液相色谱图

图2 添加水平为2 mg/kg时牛初乳粉中

三聚氰胺液相色谱图

图3 三聚氰胺校准曲线

图4 三聚氰胺光谱图