2021/11/26 10:38
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方案摘要:
产品配置单:
多管涡旋混匀仪
型号: SDC-3000
产地: 深圳
品牌: Biocomma
¥2.88万
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60mg/3mL 通用品牌HLB
型号:
产地:
品牌: 逗点
¥1014
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方案详情:
一、样品提取
取均质后的 5.0 g 猪肉样品,于 50 mL 离心管中,加入 20 mL 乙酸乙酯混合 2 min,4000 r/min 离心 15 min,取上清液于另 一离心管中,再用 20 mL 乙酸乙酯重复提取残渣 1 次,合并两 次提取液,并加入 500 µL 氨水,于 45℃旋转蒸发近干,加入 500 µL 甲醇混合 1 min,加入 10 mL 4% NaCl 涡旋混匀 10 s, 加入 10mL 正己烷摇匀 20 次,4000 r/min 离心 5 min,弃去上层, 再用 10 mL 正己烷脱脂一次,最后加入 500 µL 氨水混匀待净化。
二、SPE 柱净化(Copure® HLB,60 mg/3 mL)
活化:依次用 2 mL 甲醇、2 mL 水活化。
上样和洗脱:取上述备用液重力作用下过柱依次用 2 mL 水、 1 mL 甲醇 / 乙腈 / 水 / 氨水 (15:15:65:5, v/v) 淋洗小柱 并抽干,最后用 2 mL 5% 氨化甲醇溶液洗脱小柱,收集流 出液。
重新溶解:洗脱液于 45℃氮气吹至近干,准确加入 1.0 mL 甲醇 / 水溶液 (4:6, v/v) 溶解,涡旋混匀经 0.22 µm 滤膜过 滤,供高效液相色谱测定。
三、仪器条件 设备:Waters Alliance 2695 色谱柱:XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器:Waters 2487 紫外检测器 检测波长:268 nm 流动相:A:水 B:甲醇 洗脱方式:等度洗脱,A:B=60:40 流速:1.0 mL/min 柱温:30℃ 进样量:20 µL
四、实验结果
表 1 添加水平为 0.5 mg/kg 猪肉基质中氯霉素 (CAP) 的添加回收结果
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