QuEChERS EN方法用于大米中农药多残留的检测

QuEChERS EN方法用于大米中农药多残留的检测
（Copure ^TM   QuEChERS）

一、实验目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，GC-ECD和LC-MS/MS法作为分析方法，检测大米中的农药多残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、应用范围
本方法适用于含脂类和蜡类物质较多的水果、蔬菜和谷物等中农药多残留检测及确证。

三、参考标准
《BS EN  15662:2008   Foods  of plant  origin—Determination     of  pesticide   residues  using  GC-MS and/or  LC-MS/MS  following   acetonitrile   extraction/partitioning      and clean-up  by  dispersive  SPE—QuEChERS-method》。

四、实验材料
Biocomma Copure TM QuEChERS提取管50 mL(Cat. No. COQ050010)。
Biocomma Copure TM QuEChERS净化管15 mL(Cat. No. COQ015032)。

五、实验步骤
1、样品提取
将大米在-18 ℃下冷冻，彻底粉碎。准确称取粉碎好的大米10.0  g于50 mL离心管中，加入10 mL乙腈，振摇 1
min;再加入QuEChERS萃取盐包（4 g无水硫酸镁、1  g氯化钠、1 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢二钠），用力振
摇1 min，4000 r/min离心5 min。上层乙腈层待净化。
2、样品净化
取待净化的上层乙腈层6  mL于15 mL  QuEChERS净化管(900 mg  MgSO4、150  mg PSA和150  mg  C18)
中，涡旋 1 min，4000 r/min离心5 min。取上清液1 mL，过0.22 μm滤膜，待上机测试。
3、仪器条件
1.GC-ECD条件
气相仪器：Agilent 7890A
色谱柱：Agilent J&W HP-5，30 m × 0.32 mm，0.25 μm或者相当者
进样口温度：220 ℃
检测器温度：300 ℃
升温程序：
180 ℃(保持2 min)
以10 ℃/min升温到230 ℃(保持2 min)
以2 ℃/min升温到260 ℃(保持2 min)
以25 ℃/min升温到270 ℃(保持1.6 min)
载气：氦气
流速：1.6 mL/min
进样方式：分流进样，分流比10:1
2.LC-MS/MS条件
色谱柱：Venusil ASB C18(2.1 mm×150 mm, 5 μm)
质谱仪：API 4000
流动相：A:  0.1% HCOOH+10 mM乙酸铵(取1 mL HCOOH和0.77 g乙酸铵至1 L水溶液中)
             B:  甲醇
洗脱方式：梯度洗脱
表1  流动相梯度洗脱程序

流速：0.35 mL/min
柱温： 40 ℃
进样体积：5 μL
离子源：电喷雾(ESI)
扫描模式：正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM)

表2  质谱仪离子源参数

表3  氨基甲酸酯类农药各组分名称、保留时间及母离子和子离子检测离子对

六、实验结果
1、大米中农药多残留的添加回收结果
表4  0.2 mg/kg大米中有机氯类、拟除虫菊酯类农药多残留的添加回收结果

表5  0.05  mg/kg大米中氨基甲酸酯类农药多残留的添加回收结果

2、大米中农药多残留检测色谱图
图1  添加水平为0.2  mg/kg大米中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留检测色谱图
图2  添加水平为0.05  mg/kg大米中氨基甲酸酯类农药多残留检测色谱图