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牛奶中苯甲酸检测的固相萃取方法Copure MAX

2015/09/17 16:31

阅读:137

分享:
应用领域:
食品/农产品
发布时间:
2015/09/17
检测样品:
液体乳
检测项目:
非法添加
浏览次数:
137
下载次数:
参考标准:
《GB/T 23495-2009 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 高效液相色谱法》。

方案摘要:

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法,HPLC法作为分析方法,检测食品中苯甲酸含量。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。

方案详情:



牛奶中苯甲酸检测的固相萃取方法
(Copure TM   MAX)

一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法,HPLC法作为分析方法,检测食品中苯甲酸含量。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。

二、实验目标物
苯甲酸 (CAS:65-85-0) 。

三、应用范围
本方法适用于食品中苯甲酸的检测的HPLC检测及确证。

四、参考标准
《GB/T 23495-2009 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 高效液相色谱法》。

五、实验材料
Biocomma  Copure    MAX 固相萃取柱60mg/3mL(Cat. No. COMAX360)。

六、实验步骤
1、样品提取
准确称取牛奶10 g于50 mL离心管中,加入0.25 mol/L的亚铁氰化钾溶液2 mL,摇匀,再加入1 mol/L的乙酸锌
溶液2 mL,摇匀,4000 r/min离心10 min。上清液待净化。
2、SPE柱净化
(1) 活化:MAX 固相萃取柱使用前用3 mL甲醇、3 mL水活化。
(2) 上样和洗脱:在MAX固相萃取柱上加入5 mL备用样液,弃去流出液。用3 mL 2%氨水水溶液(v/v)、3mL甲醇淋洗,弃去淋洗液;抽干小柱;用2 mL 5%甲酸甲醇溶液(v/v)洗脱,收集洗脱液(整个上样、洗脱过程保持流速1 mL/min)。
(3) 重新溶解:洗脱液过0.45 μm滤膜,上机测试。
3、HPLC条件
设   备:Waters Alliance 2690
色谱柱 :Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm,  5μm)
检测器 :Waters 2487 紫外检测器
流动相 :A:乙腈
B:磷酸盐缓冲溶液(称取磷酸二氢钾      2.5g+磷酸氢二钾
2.5g,加水溶解定容到1000mL)
洗脱方式:等度洗脱A:B=10:90
流速:1.0 mL/min
检测波长:230 nm
进样体积:  20 μL

七、实验结果
1、25 mg/kg牛奶中苯甲酸的添加回收结果
表1  牛奶中苯甲酸25  mg/kg添加回收结果

2、添加水平为25 mg/kg牛奶中苯甲酸检测的液相色谱图
图1  添加水平为25  mg/kg牛奶中苯甲酸检测的液相色谱图

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