蔬菜中农药多残留检测的固相萃取方法（CopureTM NH2 ）

蔬菜中农药多残留检测的固相萃取方法蔬菜中农药多残留检测的固相萃取方法（Copure ^TM   NH₂ ）

一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为水果蔬菜中农残检测的前处理方法，LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物
四种农残标准品：克百威(CAS:1563-66-2)，灭多威(CAS:16752-77-5)，残杀(CAS:114-26-1)，多菌灵(CAS:63090-40-4)。

三、应用范围
本方法适用于蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药多残留的测定。

四、参考标准
《NY/T 761-2008蔬菜水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定 第三部分》。

五、实验材料
Biocomma  Copure TM   NH2 固相萃取柱 1g/6mL(Cat.No.CONH61000)。

六、实验方法
1、样品提取
称取10.0ｇ韭菜(精确至0.01  g)于50 mL离心管中，加入20  mL乙腈，均质2 min，加入5-7  g氯化钠，盖上盖
子剧烈震荡5 min，在室温下静置10 min，5000 r/min离心4 min，使乙腈和水相分层，取乙腈层待净化。
2、SPE柱净化
(1)活化：向NH 柱中加入5 mL甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)活化，弃去流出液。
(2)上样和洗脱：加入待净化液，流速控制在1    mL/min内，收集流出液；用5  mL甲醇-二氯甲烷(1:99,   v/v)洗脱，接收流出液；合并流出液。
(3)浓缩定容：40   ℃缓慢氮气流条件下吹至近干(约0.5     mL)后挥干，用1  mL乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90,v/v)定容至1 mL，过0.45 μｍ微孔滤膜，上液相色谱-质谱仪，待测定。
3、LC-MS/MS条件
质谱仪：AB API4000
色谱柱：C18柱(2.1ｍｍX150ｍｍ，5 μｍ)或相当者
流动相：A: 乙腈;  B: 0.1%甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱
表1  流动相梯度洗脱程序

进样体积：20 μL
柱温：30 ℃
流速：0.3 mL/min或根据仪器条件优化
离子源：电喷雾离子源，正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM)

七、实验结果
1、韭菜中农药多残留0.5mg/kg加标回收结果
表2 韭菜中农药多残留0.5mg/kg加标回收结果

2、添加水平为0.5mg/kg韭菜基质中农残检测色谱图
图1 四种农残待测物总离子流图

图2 灭多威(Methomyl)(163.1/88.1)质谱图

图3 多菌灵(Carbendazim)(192.1/160.1)质谱图

图4 克百威(Carbofuran)(222.1/123.1)质谱图

图5 残杀威(Propoxur)(210.2/186.3)质谱图