免疫球蛋白IgG,目前已作为功效成分添加于保健食品中,该成分对于增强免疫力、调节动物体的生理功能和某些特定物质的代谢等均有一定效果。
食品安全国家标准GB/T 5009.194-2003中的IgG检测法,是根据高效液相亲和色谱的原理,在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白IgG与配基连接,在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。
本文中采用了亲和色谱柱 TSKgel Protein A-5PW 参照GB/T 5009.194-2003,对初乳素样品中的IgG含量进行了分析。
分析条件
仪器:UltiMate3000
色谱柱:TSKgel ProteinA-5PW (4.6 mmI.D.×3.5 cm)
流动相A:pH6.5, 0.05 mol/L磷酸盐缓冲液
流动相B:pH2.5, 0.05 mol/L甘氨酸盐酸盐缓冲液
流速:0.4 mL/min
柱温:35 ℃
进样体积:20 μL
检测器:UV 280 nm
IgG对照品溶液色谱图
初乳素样品溶液色谱图
分析结果表明,IgG与前面杂质峰的分离度Rs为18.99,两次进样测定结果的算数平均差值与算术平值比值为0.26%,完全满足国标中规定的检测要求。
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