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TSK硅胶基质尺寸排阻色谱柱的保存及清洗

默隆实业

2017/07/10 16:55

阅读:474

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硅胶基质尺寸排阻色谱柱的保存

? 短期保存(2-3天后还要使用)

在使用的流动相条件下,拧好堵头后,常温保存

? 长期保存(超过3天以上不用)

 为了防止生菌和腐蚀,使用含有0.05%叠氮化钠的水溶液或者有0.1%Proclin200的水溶液或者缓冲液保存柱子。 置换时建议在使用流速一半以下进行。堵好堵头后常温保存。

 

硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱清洗方法(7.8x30cm

1. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时.

2. 如果是疏水性吸附,以20%乙腈水溶液为流动相(用0.45um 的有机相滤膜过滤),采用

0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时.

3. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时.

4. 如果是离子性物质的吸附,以0.1mol/LPB0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4

缓冲液+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2 mL/min

的流速冲洗1.5 小时后,再以0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品,进样量为20uL,

UV280nm 下,以0.1mol/LPB0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4)缓冲液

+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相检测柱效,

5. 如果是碱性物质的吸附,以0.05mol/L 的磷酸二氢钠溶液(用磷酸调整pH2.5)为流动

相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时。

6. 如果上述处理后仍未能解决问题可能是氢键的吸附,在淋洗液中添加6-8mol/L 的尿素或

0.2%-0.3%的中性界面活性剂(TritonTween)(用0.45um 的水相滤膜过滤)后以

0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时。但需要注意尿素和表面活性剂会在柱中残留。一般不

建议此项操作。

7. 冲洗完成后,使用0.1mol/LPB 0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4 )缓冲液

+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(0.45um 水相滤膜过滤),0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)

为标准品,进样量为20uL,280nm 检测柱效。

 

硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱清洗方法(7.5x60cm

8. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗3 小时.

9. 如果是疏水性吸附,以20%乙腈水溶液为流动相(用0.45um 的有机相滤膜过滤),采用

0.2mL/min 的流速冲洗3 小时.

10. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗3 小时.

11. 如果是离子性物质的吸附,以0.1mol/LPB0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4

缓冲液+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2 mL/min

的流速冲洗1.5 小时后,再以0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品,进样量为20uL,

UV280nm 下,以0.1mol/LPB0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4)缓冲液

+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相检测柱效,

12. 如果是碱性物质的吸附,以0.05mol/L 的磷酸二氢钠溶液(用磷酸调整pH2.5)为流动

相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2mL/min 的流速冲洗3 小时。

13. 如果上述处理后仍未能解决问题可能是氢键的吸附,在淋洗液中添加6-8mol/L 的尿素或

0.2%-0.3%的中性界面活性剂(TritonTween)(用0.45um 的水相滤膜过滤)后以

0.2mL/min 的流速冲洗3 小时。但需要注意尿素和表面活性剂会在柱中残留。一般不建

议此项操作。

14. 冲洗完成后,使用0.1mol/LPB 0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4 )缓冲液

+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(0.45um 水相滤膜过滤),0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)

为标准品,进样量为20uL,280nm 检测柱效。


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