硅胶基质尺寸排阻色谱柱的保存
? 短期保存(2-3天后还要使用)
在使用的流动相条件下,拧好堵头后,常温保存
? 长期保存(超过3天以上不用)
为了防止生菌和腐蚀,使用含有0.05%叠氮化钠的水溶液或者有0.1%Proclin200的水溶液或者缓冲液保存柱子。 置换时建议在使用流速一半以下进行。堵好堵头后常温保存。
硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱清洗方法(7.8x30cm)
1. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时.
2. 如果是疏水性吸附,以20%乙腈水溶液为流动相(用0.45um 的有机相滤膜过滤),采用
0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时.
3. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时.
4. 如果是离子性物质的吸附,以0.1mol/LPB(0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4)
缓冲液+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2 mL/min
的流速冲洗1.5 小时后,再以0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品,进样量为20uL,
在UV280nm 下,以0.1mol/LPB(0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4)缓冲液
+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相检测柱效,。
5. 如果是碱性物质的吸附,以0.05mol/L 的磷酸二氢钠溶液(用磷酸调整pH2.5)为流动
相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时。
6. 如果上述处理后仍未能解决问题可能是氢键的吸附,在淋洗液中添加6-8mol/L 的尿素或
者0.2%-0.3%的中性界面活性剂(Triton、Tween)(用0.45um 的水相滤膜过滤)后以
0.2mL/min 的流速冲洗1.5 小时。但需要注意尿素和表面活性剂会在柱中残留。一般不
建议此项操作。
7. 冲洗完成后,使用0.1mol/LPB (0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4 )缓冲液
+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(0.45um 水相滤膜过滤),0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)
为标准品,进样量为20uL,在280nm 检测柱效。
硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱清洗方法(7.5x60cm)
8. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗3 小时.
9. 如果是疏水性吸附,以20%乙腈水溶液为流动相(用0.45um 的有机相滤膜过滤),采用
0.2mL/min 的流速冲洗3 小时.
10. 100%纯水以0.2mL/min 的流速冲洗3 小时.
11. 如果是离子性物质的吸附,以0.1mol/LPB(0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4)
缓冲液+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2 mL/min
的流速冲洗1.5 小时后,再以0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品,进样量为20uL,
在UV280nm 下,以0.1mol/LPB(0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4)缓冲液
+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相检测柱效,。
12. 如果是碱性物质的吸附,以0.05mol/L 的磷酸二氢钠溶液(用磷酸调整pH2.5)为流动
相(用0.45um 的水相滤膜过滤),采用0.2mL/min 的流速冲洗3 小时。
13. 如果上述处理后仍未能解决问题可能是氢键的吸附,在淋洗液中添加6-8mol/L 的尿素或
者0.2%-0.3%的中性界面活性剂(Triton、Tween)(用0.45um 的水相滤膜过滤)后以
0.2mL/min 的流速冲洗3 小时。但需要注意尿素和表面活性剂会在柱中残留。一般不建
议此项操作。
14. 冲洗完成后,使用0.1mol/LPB (0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4 )缓冲液
+0.1mol/LNa2SO4 溶液为流动相(0.45um 水相滤膜过滤),0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)
为标准品,进样量为20uL,在280nm 检测柱效。
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