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TSK色谱柱色谱分析简介

默隆实业

2015/04/04 22:25

阅读:883

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       TSKgel系列色谱柱包括可运用于SEC、IEC、HIC、RPC、HILIC和AFC等不同色谱分析的几十种TSKgel色谱柱,重点介绍用于多肽、蛋白、抗生素药物分析的TSKgel G2000SWXL色谱柱;用于化药、中药分析的TSKgel ODS-100V色谱柱等。

  生物碱是一类重要的天然有机化合物,多数具有复杂的氮杂环结构,游离状态生物碱根据溶解性氛围亲执行和水溶性两大类,其中水溶性生物碱分离方法包括反相离子对色谱法和亲水作用色谱法。张琳老师应用TSKgel ODS-100V色谱柱进行反相离子对色谱法分析益母草-盐酸益母草碱,得到良好的分析结果。

  亲水作用色谱(HILIC)分析是利用样品在流动相和固定相中的分配平衡,样品中的极性官能团与固定相表面进行亲水相互作用。东曹推出新型HILIC色谱柱——TSKgel NH2-100 3μm,氨基型色谱柱耐久性大幅度提高,与Amide-80具有相同或更高的保留性能和更高的分离。在2010年版《中国药典》生物碱类中药分析中,具有柱效高、峰型好,按照要点要求,可满足该类样品分析。同时相比酰胺基型的HILIC色谱柱,新型HILILC色谱柱具有更好柱效、峰型对称性。

  β-内酰胺抗生素室临床常用药物,较易发生不良反应——速发型过敏反应,引发其过敏的郭明阳是其中存在的高分子聚合物。其主要分析方法包括凝胶过滤色谱法、离子交换色谱法和反相色谱法。采用TSKgel 高效凝胶过滤色谱柱可以实现大部分水溶性β-内酰胺类抗生素高分子杂质分析,相对于中低压凝胶色谱柱可获得更好的分离度、更快的分析速度、更高的灵敏度和相似选择性。采用TSKgel高效凝胶渗透色谱柱可以实现大部分非水溶性抗生素β-内酰胺类抗生素(可溶于DMF)高分子杂质分析。

  氨基糖苷类抗生素属广谱抗生素,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有作用,由于其分子结构不含紫外吸收基因,且极性强、挥发性差,使氨基糖苷类抗生素分析研究有较大难度。目前其质量分析现状包括有关物质检查(普遍采用TLC法)和含量测定(微生物法和色谱法)。张琳老师强调,HPLC-ELSD联用是我国药典分析氨基糖苷类抗生素的趋势!

  由于抗体药物存在7中变体,抗体变体分析更有意义。

  目前TSKgel抗体分析用色谱柱包括尺寸排阻色谱法(SEC)——TSKgel SW系列(分子尺寸的不同、多聚体、分解片断);

  离子交换色谱法(IEC)——TSKgel STAT系列(带电性不同、氨基酸残基不同、脱氨基化、N末端和C末端变化);

  疏水相互作用色谱法(HIC)——TSKgel Phenyl-5PW &Buryl NPR系列(立体构造不同、氨基酸残基不同、多聚体);

  反相色谱法(RPC)——TSKgel Protein C4-300(分子量不同、氨基酸残基不同);

  正相色谱法(NPC/HILIC)——TSKgel Amide-80(亲水性不同、糖链分析、糖链构造不同);

  亲和色谱法(AFC)——TSKgel Boronate-5PW(抗体糖化差异);

  最后,张琳老师提到2012年12月,东曹公司全球同步上市抗体分析用三款新型SEC色谱柱,TSKgel SuperSW mAb HR、TSKgel SuperSW mAb HTP、TSKgel UltraSW Aggregate。

  TSKgel SuperSW mAb HR主要用于二聚体/单体/抗体片段的高分辨率分离分析,R&D品质管理;

  TSKgel SuperSW mAb HTP主要用于二聚体含量的超高速、短时间评价分析,R&D品质管理;

  TSKgel UltraSW Aggregate主要用于多聚体(二聚体以上)的高分辨率分离分析,R&D过程物性评价);

 

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