人乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞 MDA-MB-231 贴壁上皮细胞
(1)细胞背景
MDA-MB-231是从一名51岁的白人女性乳腺癌患者的胸水中分离建立的。该细胞表达表皮生长因子EGF受体、TGF-α受体和WNT7B癌基因。
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A88023 马尿酸钠培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88024 DNA酶琼脂 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88025 赖氨酸脱羧酶培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88026 脱羧酶对照试验培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88027 鸟氨酸脱羧酶培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88028 精氨酸脱羧酶试验培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88029 Thormley氏精氨酸双水解酶培养基 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A88030 精氨酸葡萄糖斜面琼脂 ,规格: 100毫升 ,保存条件: 2~8℃
A88031 苯丙氨酸脱羧酶培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88032 厌氧菌靛基质试验培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88033 假单胞菌琼脂P基础 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A88034 假单胞菌琼脂F基础 ,规格: 100毫升 ,保存条件: 2~8℃
A88035 卫矛醇半固体琼脂 ,规格: 100毫升 ,保存条件: 2~8℃
A88036 色氨酸肉汤 ,规格: 250毫升 ,保存条件: 2~8℃,避光
A88037 四号琼脂基础 ,规格: 25毫升 ,保存条件: RT
A88038 我妻氏培养基基础 ,规格: 200毫升 ,保存条件: RT,避光
A88039 60%/L氯化钠蛋白胨肉汤 ,规格: 50克 ,保存条件: RT
A88040 42℃生长培养基 ,规格: 250克 ,保存条件: RT
A88041 酪蛋白琼脂 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A88042 酚红葡萄糖肉汤 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88043 木糖-明胶培养基 ,规格: 1公斤 ,保存条件: RT
A88044 葡萄糖铵培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88045 葡萄糖半固体培养基 ,规格: 5米 ,保存条件: RT
A88046 克氏双糖铁琼脂(上层) ,规格: 150米 ,保存条件: RT
A88047 克氏双糖铁琼脂(下层) ,规格: 5米 ,保存条件: RT
A88048 磷酸盐葡萄糖胨水培养基 ,规格: 150米 ,保存条件: RT
A88049 KORSER氏枸橼酸盐肉汤 ,规格: 5米 ,保存条件: RT
A88050 结晶紫中性红胆盐琼脂 ,规格: 150米 ,保存条件: RT
A88051 亚利桑那菌琼脂 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88052 叠氮钠葡萄糖肉汤 ,规格: 150米 ,保存条件: RT
A88053 KF链球菌琼脂 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88054 乙基紫叠氮钠肉汤 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88055 LIM培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88056 BETA-SSA琼脂 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88057 胰酪胨大豆羊血琼脂基础 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88058 改良V-P培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88059 R2A琼脂 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88060 A1培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88061 酵母粉琼脂 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88062 茜素-β-半乳糖苷琼脂 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88063 乳糖蛋白胨培养液 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88064 Cary-Blair运送培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88065 MFC培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88066 品红亚硫酸钠培养基(滤膜法用) ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88067 亮绿乳糖培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88068 乳糖蛋白胨半固体培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88069 卵磷脂吐温80营养琼脂培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88070 乙酰铵琼脂 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88071 大豆酪蛋白葡萄糖卵磷酯吐温80培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88072 十六烷基三甲基溴化铵琼脂培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88073 普通琼脂斜面培养基 ,规格: 1米 ,人乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞保存条件: RT
A88074 盐蛋白胨水培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88075 绿脓菌色素测定用培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88076 甘露醇发酵培养基 ,规格: 1米 ,保存条件: RT
A88077 营养琼脂平板(无菌) ,规格: 1米 ,保存条件: RT