固定破膜对细胞表面抗体结合的影响

联科生物

2015/01/21 22:03

阅读：85



有些时候，表面抗体需要在细胞固定之后标记，但这取决于固定过程对于要研究的蛋白是否会产生影响。下表列出了eBioscience的几种固定过程，包括使用 Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set (cat. no. 88-8824) 或者 IC Fixation Buffer (cat. no. 00-8222) 加甲醇处理，对于标记的影响状况。 Antibody Clone Performance Following Fixation / Permeabilization
Antigen Clone Live cells (Before IC Fixation)1 After IC Fixation and Perm Wash1 After IC Fixation/ Methanol2 HUMAN CD3 OKT3 +++ ++ + UCHT1 +++ +++ +++ SK7 +++ ++* +++ CD4 OKT4 +++ +* +/- RPA-T4 +++ +++* + SK3 +++ +++ + CD5 UCHT2 +++ +++ +++ CD8 OKT8 +++ +/- - RPA-T8 +++ +++ +/- SK1 +++ +++* +/- CD8b SIDI8BEE +++ ++ ++ CD11a HI111 +++ +++ + CD11b CBRM1/5 + - +++ ICRF44 ++ - ++ CD11c 3.9 ++ +* ++ CD14 61D3 +++ +++* ++ CD19 HIB19 +++ ++* +/- CD20 2H7 +++ +++ - CD25 BC96 + - +/- CD27 O323 +++ +* + CD31 WM59 +++ ++* +++ CD33 p67.6 +++ +++* +++ CD38 HB7 ++ - ++ HIT2 ++ - ++ CD40 5C3 ++ - ++ CD44 IM7 +++ +++ +++ CD45 2D1 +++ +++ +++ HI30 +++ +++ +++ CD45RA HI100 +++ +++ +++ CD45RO UCHL1 +++ +++ ++ CD62L DREG-56 ++ - ++ CD56 MEM-188 + - +/- CB56 + - +/- CMSSB ++ +/-* - CD57 TB01 ++ ++ ++ CD62L DREG56 ++ - CD69 FN50 +++ ++ ++ CD80 2D10.4 + - + CD83 HB15e ++ ++ ++ CD86 IT2.2 + +* + CD94 HP-3D9 ++ ++ ++ CD95 DX2 + - + CD127 RDR5 ++ +* ++ CD161 HP-3G10 ++ ++* + MOUSE CD3 145-2C11 ++ + +/- 500A2 +++ +++* +++ 17A2 +++ +++ +++ CD4 GK1.5 +++ ++* +++ RM4-5 +++ +++* +++ CD8 53-6.7 +++ ++ ++ CD11b M1/70 ++ ++ ++ CD11c N418 +++ +++ ++ CD19 1D3 +++ ++* - MB19-1 ++ - - CD24 M1/69 +++ +++ ++ CD25 PC61.5 + - + 3C7 ++ - + 7D4 ++ ++ + CD39 24DMS1 + - ++ CD44 IM7 ++ ++* ++ CD45 30-F11 +++ +++ +++ CD45R(B220) RA3-6B2 +++ ++ +++ CD49b DX5 ++ - + CD69 H1.2F3 ++ - - CD185(CXCR5) SPRCL5 ++ - - GR-1 RB6-8C5 +++ +++ ++ NK1.1 PK136 ++ + + IgD 11-26c +++ +++* ++ IgM ll/41 ++ ++* ++ TCR beta H57-597 ++ ++* ++
RAT CD25 OX39 + - CANINE CD4 ykix302.9 +++ + CD5 ykix322.3 +++ - CD8a ycate55.9 +++ ++ CD44 ykix337.8 +++ ++ CD45 ykix716.13 +++ ++ CD45R ykix753.22 +++ ++ CD90 ykix337.217 +++ ++ MHC Class II ykix334.2 +++ +++ 1 Testing carried out with eBioscience Fixation & Permeabilization Kit for 15-30 minutes at room temperature followed by a Perm wash, see Best Protocols here (Protocol A). Please note the clones with indicate longer fixations are detrimental to staining. 2 Testing carried out with 15-30 minutes at room temperature in 50% IC Fixation followed by 30 minutes 90-100% Methanol incubation on ice, see Best Protocolshere (Protocol C).