eBioscience磷酸化抗体破膜缓冲液选择指南

联科生物

2015/01/20 23:33

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eBioscience磷酸化抗体都经过三种buffer（IC fixation and permeabilization, Foxp3/Transcription Factor Buffer, and IC fixation Buffer/Methanol的测试，在抗体说明书上详细告知了最适buffer的种类。由于甲醇会毁坏某些抗体识别的表位，理想的状况是在甲醇作用前做表面marker的标记，这些marker的抗体可以选择甲醇耐受的荧光标记，如eFluor450、FITC或eFluor660。然而另一方面，表面抗体与细胞的结合可能也会引起不必要的激活。所以，我们推荐在刺激/处理、固定及甲醇处理之后来做表面抗体的标记，不受固定过程影响的抗体克隆号选择，可参考前面的文章“固定破膜对细胞表面抗体的影响”，来源：http://us.ebioscience.com/resources/application/flow-cytometry/clone-performance-after-fix-perm.htm
Target Clone IC fix/perm Foxp3 IC fix/methanol pSTAT1 (Y701) KIKSI0803 - - +++ pSTAT4 (Y693) 4LURPIE - - +++ pSTAT5 (Y694) SRBCZX - - +++ pSTAT6 (Y641) CHI2S4N - - +++ pSrc (Y418) SC1T2M3 ++ ++ +++ pZAP-70/SYK Y319/Y352 n3kobu5 ++ ++ +++ pSYK (Y348) moch1ct ++ ++ +++ pBTK/ITK (Y551/Y511) M4G3LN ++ ++ +++ pERK1/2 (T202/Y204) MILAN8R - - +++ pNFkB p65 (S529) B33B4WP +++ - +++ pS6 (Y235/Y236) cupk43k +++ ++ +++ pH2AX (S139) CR55T33 - +++ +++
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厂商目录号产品名称(简述) 规格 eBioscience 85-00-8222-49 IC Fixation Buffer 125 mL 125 mL eBioscience 85-88-8824-00 Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set Kit Kit eBioscience 85-00-5523-00 Foxp3 / Transcription Factor Staining Buffer Set Kit Kit