Life Technologies细胞内离子测定产品

Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础，具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证，包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选，能够实现各种细胞功能的分析：

a.细胞活性和细胞毒性 b. 细胞增殖和细胞周期 c. 细胞凋亡 d. 自噬 e. 氧化应激 f. 内吞作用和吞噬作用 g. 细胞内离子

　　本文为大家介绍细胞内离子的产品。

　　离子通道为药物的研发提供了重要机遇，可以靶向各种治疗领域，包括神经、心血管和肺部疾病、疼痛及炎症。要解决各种目标细胞背景中最复杂的离子通道靶点，研究人员需要能满足其研究要求的各类优化的分析。Life Technologies基于细胞的离子通道分析产品系列具有灵敏、易用和分析灵活等优点。

图1 FluxOR?检测原理。在静息细胞中，加载了FluxOR?染料的本底荧光很低(左)，直到钾离子通道被激活。当Tl随着刺激物一起加入时，可激活染料(右)。

产品特点： ? 通道特异性：在电压和配体设门的钾离子通道中测定离子流 ? 快速：高通量检测钾流 ? 方便：通过BacMam技术高效、无病变转导hERG；可随时冻存转导的细胞 ? 药理相关：已知阻断剂显示剂量依赖的抑制作用

货号 产品名称 应用 规格 F10016 FluxOR? Potassium Ion Channel Assay HCS;IF 10 microplates F10017 FluxOR? Potassium Ion Channel Assay HCS;IF 100 microplates B10332 BacMam Kv1.3 Ion Channel Reagents   1 kit B10333 BacMam Kv2.1 Ion Channel Reagents   1 kit B10334 BacMam Kir1.1 Ion Channel Reagents   1 kit B10019 BacMam-hERG Potassium Channel Kit   1 kit

　　钙离子指示剂在与钙离子结合后，可使荧光强度增强。Fluo-3是目前最常用的一种钙离子荧光指示剂，可用于荧光显微镜、高通量检测等。Fluo-3 AM是Fluo-3的一种乙酰甲酯衍生物，通过培养，能够轻易进入细胞中，被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-4 是Fluo-3的类似物，但比Fluo-3更明亮、光稳定性更好。Fluo-5F、Fluo-5N和 fluo-4FF是Fluo-4的类似物，具有较低的钙离子结合力，适合于检测1 μM – 1mM的胞内钙离子水平，在这个浓度范围内，Fluo-3和Fluo-4与钙离子的结合通常已经饱和。此外，Life Technologies的Fluo-4 Direct? Calcium Assay Kit可抑制培养基产生的背景荧光，而对细胞荧光几乎没有影响。可使用含血清的培养基，无需去除血清。

图2光滑爪蟾卵母细胞注射三磷酸肌醇的非水解类似物后，以Fluo-3作为钙离子指示剂的螺旋状钙流的激光共聚焦成像图片。

图3 对muscarnic 1 (M1)受体拮抗剂剂量依赖的钙应答。 CHO M1细胞种于多聚赖氨酸包被的384孔板中培养过夜。次日细胞经carbachol、MCN-A-343、ethanechol、oxotremorine和pilocarpine刺激后，使用Fluo-4 Direct? Calcium Assay Kit测定钙应答。相对荧光强度为最大应答减去最小应答后，除以最小应答。

货号 产品名称 应用 Ex/Em 规格 F1240 Fluo-3,  Pentaammonium Salt,  cell impermeant HCS;IF;M 506/526 1 mg F1241 Fluo-3, AM, Calcium Indicator HCS;IF;M 506/526 1 mg F1242 Fluo-3, AM, Calcium Indicator HCS;IF;M 506/526 20x50 μg F14218 Fluo-3, AM, cell permeant HCS;IF;M 506/526 1 ml F14242 Fluo-3, AM, Calcium Indicator HCS;IF;M 506/526 40x1 mg F23915 Fluo-3, AM, FluoroPure? grade HCS;IF;M 506/526 10x50 μg F14201 Fluo-4, AM, cell permeant HCS;IF;M 488/530 10x50 μg F14202 Fluo-4 AM - Packaged For High-Throughput Screening HCS;IF;M 488/530 5x1 mg F14217 Fluo-4, AM, cell permeant HCS;IF;M 488/530 500 μl F23917 Fluo-4, AM, FluoroPure?  grade - Special Packaging HCS;IF;M 488/530 10x50 μg F36205 Fluo-4 NW Calcium Assay Kit M 488/530 100 microplates F36206 Fluo-4 NW Calcium Assay Kit M 488/530 10 microplates P10020 PowerLoad? Concentrate, 100X HCS;IF;M 488/530 5 ml F10471 Fluo-4 Direct? Calcium Assay Kit HCS;IF;M 488/530 10×10 ml F10472 Fluo-4 Direct? Calcium Assay Kit HCS;IF;M 488/530 1 ×100 ml F10473 Fluo-4 Direct? Calcium Assay Kit HCS;IF;M 488/530 1 ×1 L

氯离子通道参与多种重要的生理功能，包括跨上皮的离子转运、细胞电兴奋性和离子稳态。氯离子通道功能受损会引起很多慢性疾病，因此它们也是药物靶标。为了方便测定氯离子通道活性，Life Technologies开发了荧光蛋白的生物传感器Premo? Halide Sensor。

      特点： ?  氯离子通道特异性：以电压和配体设门的氯离子通道和转运子进行功能检测。 ?  快速：高通量测定氯离子流，重复性高 ?  信号强：高表达，无需洗涤 ?  方便：通过BacMam技术即可将Premo? Halide Sensor有效无毒性地转入细胞     图4 Premo? Halide Sensor检测技术。

货号 产品名称 应用 Ex/Em 规格 P10229 Premo? Halide Sensor IF 515/530 1 kit

电压敏感探针(VSPs)是基于荧光共振能量转移(FRET)的电压感应检测技术，用于测定细胞膜电位的变化。

特点：
? 高通量：一天可检测32000个样本
? 灵敏度高：精确地检测到1%的Emission Ratio per mV变化
? 快速检测应答：次秒响应时间
? 比率计读数：减少孔与孔之间、染料加载、温度波动等引起的实验误差
? 应用广泛：可用于检测任何可改变膜电位的靶标

货号 产品名称 规格 K1016 Voltage Sensor Probes Set, DiSBAC2(3) and CC2-DMPE 1 mg K1046 Voltage Sensor Probes Set, DiSBAC4(3) and CC2-DMPE 1 mg K1019 VABSC-1 Dye (Voltage Assay Background Suppression Compound) 1 g K1017 CC2-DMPE (voltage sensor probe) 1 mg K1070 CC2-DMPE (voltage sensor probe) 10 mg K1018 DiSBAC2(3) 1 mg K1021 DiSBAC2(3) 5 mg K1047 DiSBAC4(3) 1 mg K1022 DiSBAC4(3) 5 mg