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ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA技术),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。 | |||||
将细胞因子特异性单克隆抗体包被于乙醇处理过的PVDF膜板上。具体板子处理和包被方法请参考: | ![]() | ||||
![]() | 将细胞加入到酶标孔中,不同组加不同的刺激剂或者不加刺激剂。 具体细胞处理方法请参考: | ||||
细胞分泌的细胞因子与包被抗体结合。 | ![]() | ||||
![]() | 将多余细胞除去并洗板后,将生物素标记的检测抗体加入到酶标孔中。 | ||||
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加入连霉亲和素标记的酶偶联物 | ![]() | ||||
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![]() | 使用酶联免疫斑点读板仪读取斑点并分析。信息来源: | ||||
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阅读原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014040021.html
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