ELISpot实验操作流程

联科生物

2014/04/21 20:20

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ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测，英文：Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术（即ELISA技术），能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理，一句话概括就是：用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。
将细胞因子特异性单克隆抗体包被于乙醇处理过的PVDF膜板上。具体板子处理和包被方法请参考： https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/plate-coating-guide
	将细胞加入到酶标孔中，不同组加不同的刺激剂或者不加刺激剂。具体细胞处理方法请参考： https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/cell-handling
细胞分泌的细胞因子与包被抗体结合。
		将多余细胞除去并洗板后，将生物素标记的检测抗体加入到酶标孔中。

加入连霉亲和素标记的酶偶联物
加入底物 https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/enzymes-substrates/enzyme-conjugates
	使用酶联免疫斑点读板仪读取斑点并分析。信息来源： https://www.mabtech.com/knowledge-center/assay-principles/elispot-assay-principle/elispot-step-step