碱性磷酸酶染色液(改良Gomori 钙钴法)如何操作

碱性磷酸酶染色液(改良Gomori 钙钴法)如何操作
首先(一)石蜡切片染色
1、 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2、 切片入ALP 孵育液中，37℃孵育2~12h。
3、流水洗2min，入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液中，37℃孵育5min。
5、流水洗5min 后，入蒸馏水。
6、在上述过程中配制ALP 硫化工作液，即取试剂(C)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液，即配即用。切片入硫化工作液，孵育2min。
7、流水洗10min，入蒸馏水。
8、(可选)核固红复染细胞核，蒸馏水洗。
9、石蜡切片常规脱水、透明，树胶封片。
然后(二)冰冻切片染色
1、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2~5min。
2、切片入ALP 孵育液，37℃孵育5~15min。
3、流水洗2min，入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液，37℃孵育5min。
5、流水洗5min 后，入蒸馏水。
6、在上述过程中配制ALP 硫化工作液，即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50 倍, 即
为ALP 硫化工作液，即配即用。切片入ALP 硫化工作液，孵育1～2min。
7、流水洗10min，入蒸馏水。
8、(可选)核固红复染细胞核，蒸馏水洗。
9、栺油明胶封片。