人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒详细介绍:
人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒关于我公司的产品售后服务问题,特此下述:
1.有任何质量问题免费退换,合同上注明了(客户在使用过程中测不出结果,在我们技术人员分析做不出结果的原因确实是试剂盒本事的问题我们免费给您退换,若是老师操作不当没有做出数据的技术会给您分析指导,从而解决问题,运输过程中导致试剂盒测不出结果我们会给您退换!)
2.全程技术指导。(包括售前的标本收集,使用过程中不清楚的地方,实验结束后的数据分析,有任何疑问,我们技术都会即时给您去电)
3.提供免费代测的服务。(您只需把标本寄过来,我们为您节省时间,帮您出结果,原始数据,分析数据均可提供,实验时间一般一个周左右给您结果)
人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒操作过程中可能出现的问题和解决方法:
为什么ELISA试剂盒出现白板,阳性对照不显色?
1、未加A、B显色液——不要漏加A液和B液
2、洗涤液配制有误——请按说明书所示稀释倍数配制
3、未加酶结合物而认为已加入——注意不要漏加
4、终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用——每次加液前均应看清标签
为什么ELISA试剂盒显色淡,灵敏度偏低?
1、试剂盒在运输途中时间太长,温度太高——尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温
2、试剂盒未充分平衡——试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。
3、培养箱温度不足37℃——注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意
4、保温时间不足——校正定时钟准确定时
5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加——按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数
6、移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁——校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,最好一次性使用
7、蒸馏水水质有问题——使用新鲜合格的蒸馏水
8、底物作用时间不足——准确定时
为什么ELISA试剂盒重复性不佳?
1、样品数量多少不一,加样时间有长有短——重复某一样品时,加样时间尽可能与第一次接近
2、保温时间不一致,洗涤条件不一致,操作人员不一致——重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性
3、加样量不一致——样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴
为什么ELISA试剂盒背景深,全部呈有色,临界对照OD值超出规定范围?
1、洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留——浓缩洗液准确配制;10倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释;充分洗涤,彻底拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染
2、样品污染——样品应新鲜采集,或低温保存,防止污染
3、培养箱温度超过37℃或反应时间过长——调整培养箱温度,准确定时
4、吸嘴重复使用,未洗净或消毒不彻底——吸嘴尽可能一次性使用
5、蒸馏水被污染——使用新鲜蒸馏水
6、酶等试剂混用——不同批号试剂勿混用
7、一次实验的标本量过多,加样时间太长,导致实际反应时间延长——合理安排实验,避免几块酶标板同时加样
用途:仅供科研使用
人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒相关产品如下:
小鼠β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒MouseBeta-naphthol,β-NphELISA试剂盒ELISA.96T/48T
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人磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA试剂盒实验步骤
人磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA试剂盒实验步骤 实验步骤如下: 1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10 孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉,再各取50μl 分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为90 ng/L,60 ng/L ,30 ng/L,15ng/L, 7.5ng/L)。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4.配液:将30(48T 的20 倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T 的20 倍)倍稀释后备用。 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。
生物产业
2014/10/24
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企业名称
南京森贝伽生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
320103000263505
成立日期
2012-10-18
注册资本
50
经营范围
南京森贝伽生物科技有限公司
公司地址
南京江宁区科学园
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