超敏反应的免疫检测

超敏反应的免疫检测，一、过敏原皮肤试验(skin test)

皮肤试验是在皮肤进行的体内免疫学试验，简称皮试。

(一)皮肤试验原理

1．I型超敏反应皮肤试验原理

当变应原通过皮肤挑刺、划痕、皮内注射等途径进入致敏者皮肤时， 与吸附在肥大细胞和嗜碱粒细胞上的IgE特异性结合，导致肥大细胞或嗜碱 粒细胞脱颗粒，释放生物活性介质。在20～30分钟内局部皮肤出现红晕、 红斑、风团以及瘙痒感，数小时后消失。出现此现象者判断为皮试阳性， 即对变应原过敏；未出现红晕、红斑、风团者为阴性，即对该变应原不过 敏。

最常用的部位是前臂曲侧或上臂伸侧，因这些部位的皮肤较光滑细 腻，且便于实验操作与结果观察。

2．Ⅳ型超敏反应皮肤试验原理

用皮内注射、皮肤斑贴等方法使用变应原进入已致敏机体，体内致敏 的T细胞再次接触到变应原后，释放多种细胞因子，造成局部以单核细胞和 淋巴细胞浸润为主的炎症反应。24～48小时后局部出现红肿、硬结或水泡， 以此来判断变应原是否引起机体Ⅳ型超敏反应或机体的细胞免疫功能状 态。

(二)方法

1．皮内试验(illtracutaneous test)

(1)I型超敏反应的皮内试验：消毒后，将试验用变应原提取液注入皮 内，一般注射前臂内侧皮肤。若同时作多种变应原皮试时，相互间隔应为 2．5～5 cm(高度可疑敏感的变应原应选择5 cm)，以免强烈反应时混淆结 果。反应须观察15--20分钟，根据风团、红晕大小判定结果。

出现假阳性的常见原因有①皮试液不纯，含有非特异性刺激物；②患 者皮肤反应过强，如患者皮肤划痕症阳性；③操作者手法较重，注射量较 大或浓度过多、注入少量空气等。出现假阴性的常见原因有①皮试液抗原 性低或失效；②患者皮肤反应性差如老年人，或过敏性休克或哮喘大发作 后的一段时间；③皮试前使用过抗组胺药物或免疫抑制剂等。

(2)Ⅳ型超敏反应的皮内试验：结核菌素皮试是检测Ⅳ型超敏反应典型 的例子。OT试验既可用于了解个体对结核菌素是否有免疫力及B03接种后效 果观察，又可了解个体细胞免疫功能状况。

试验抗原用旧结核菌素1：2 000 0．1 ml(含5IU-国际结核菌素单位) 或结核杆菌纯蛋白衍生物O．1Ⅱ11(含0．1 rag结核蛋白)，前臂内侧皮内 注射，48--72小时后观察局部有无红肿、硬结。

2．挑刺试验(prick test)

也称点刺试验。主要用于检测I型超敏反应，其原理同皮试。先将点刺 皮试液滴在皮试处(如前臂曲侧)，然后用点刺针穿过液滴，刺入皮肤，以 刺破皮肤而不出血为度，试验即告完成。15分钟后观察结果。点刺试验用 皮试液的浓度应是皮内试验液浓度的10～100倍或更多，作为阳性对照的磷 酸组胺浓度也应相应增加(国内l rag／ml，国外用浓度更高)。

3．斑贴试验(patch test)

主要用于寻找引起接触性皮炎的过敏原。试验是将可疑过敏原直接贴 敷于皮肤表面，涂敷范围为0．5～1 ClTI为宜。如试验抗原为软膏时可直 接涂抹在皮肤上；如为固体物时则可用蒸馏水混匀浸湿后涂敷于皮肤上； 如为液体则浸湿纱布后敷贴于皮肤上。涂敷后盖以玻璃纸或油纸，再用纱 布或绷带固定，如有不适可随时打开查看、处理。48～72小时后观察局部 有无红肿和水疱。斑贴试验用于Ⅳ型超敏反应的检测，敏感度虽不太高， 但假阳性较少，结果的可信度大。