首先,我们先从选择试剂开始,应该选择优良的ELISA检测试剂盒,并且严格按照试剂说明书进行操作,操作前应高将时机在室温下平衡半小时到一个小时左右的时间。这是第一步。
接下来就是加样、孵育、洗板、显色等步骤了。
我们先从加样说起,在ELISA检测试剂盒实验的过程中,选择了试剂之后就是加样了, 对于加样来讲,可能会出现加完标本再加酶试剂时酶溅出空外,或者手工操作时,加样板过多造成家养后放入孵箱前等待时间过长,针对这样的问题,我们家养后应及时放入孵箱,加完酶试剂后立即用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干,如果标本比较多的时候。
对于孵育来讲,如果孵育时没有贴封片或者加盖,会使标本稀释或者蒸发的,如果时间人为的去延长了,还会导致非特异性结合紧附于反应孔的周围,不容易彻底的清洗,我们在做孵育这一步骤的时候一定要帖封片或者加盖,然后,对于操作时间一定要按照说明去做的。
ELISA检测试剂盒实验第三部就是洗板,这一步骤如果采用手工洗板,孔与孔之间的液体会交叉,加入采取半自动洗板机的时候,如果洗液量不足的话,也会导致洗板不彻底,针对这些原因,我们应该保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完之后,最好用吸水纸在上面轻轻拍干而不是擦干,并且要合理安排或者使用多肽洗板机。
ELISA检测试剂盒实验最后一步就是显色了,这一步,也有很多要注意的地方,例如,显色剂配置后,放置时间过长,或者使用过期的显色剂,都会出现不显色,等多种原因,我们要杜绝使用过期的显色剂,并且加显色剂的时候,要保证显色剂不外流。这样,结果才能更精准的呈现。
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