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酶联免疫ELISA试剂盒范围

上海基免

2015/06/30 20:24

阅读:70

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使用目的:

本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中 CD206含量。

兔CD206酶联免疫ELISA试剂盒实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔  CD206。用纯化的兔 CD206抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入CD206,再与 HRP标记的  CD206抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CD206呈正相关。用酶标仪在  450nm 波长下测定吸光(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔CD206浓度。

兔CD206酶联免疫ELISA试剂盒操作步骤

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50?l,待测样品孔中先加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l(样品最终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

温育:兔CD206ELISA试剂盒用封板膜封板后37℃温育30分钟。30倍稀释后备用

配液:将 30倍浓

洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体甩干,每孔加满洗涤液,静重复 5次,拍干。30秒后弃去,如此

加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。

温育:操作同 3。

洗涤:操作同 5。

显色:兔CD206酶联免疫ELISA试剂盒每孔先加入显色剂 A50?l,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。


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