慢病毒包装试剂盒

提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。

本公司转染试剂Lentifect是针对真核细胞转染的高效转染试剂，该转染试剂对细胞毒性较小，可在含血清与抗生素的完全培养液中充分发挥作用，对常用于蛋白表达的多种细胞都有较高的转染效率，可广泛用于瞬时和稳定转染，也可以用于蛋白表达和基因功能的研究。与其他转染试剂相比，本公司转染试剂不仅具有高转染效率，而且价格便宜，是性价比最佳的真核转染试剂。

本公司提供293T包装细胞系，选择处于生长旺盛期，细胞状态较佳，存活率90%以上，细胞边缘清晰，传代次数较低。与优化的其他组份共同包装产生高滴度慢病毒颗粒。

慢病毒包装                                                                                     

以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。

1. 转染前24 h，用胰酶消化对数生长期的细胞，以含10%FBS的培养基调整细胞密度为5.0×105/ml，接种6孔板，每孔2 ml，37°C，5% CO2培养箱培养；24 h待细胞密度达到80~90%时即可用于转染；

2. 取1.5 ml灭菌EP管，取2 μl慢病毒表达载体和10 μl慢病毒辅助载体溶于200 μl的无血清培养基；轻柔混匀，室温孵育5 min；

3. 取1.5 ml灭菌EP管，取20 μl Lentifect溶于200 μl无血清培养基中；轻柔混匀，室温孵育5 min；

4. 将DNA溶液和转染试剂溶液轻柔混匀；室温孵育15 min，即为转染复合物；

5. 取出接种好细胞的培养板，将转染复合物加入，轻轻晃动混匀，37°C，5% CO2培养箱培养；

6. 4~6 h后，移除含有转染复合物的培养基，代之以DMEM完全培养基（含10%FBS）；

7. 继续培养48 h收获含病毒的上清；3000 rpm 离心10 min，去除沉淀；

8. 病毒上清4°C贮存。