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人甲胺喋呤(MTX)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

2016-06-16 09:25

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人甲胺喋呤(MTX)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胺喋呤 (MTX) 。用纯化的人甲胺喋呤(MTX)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲胺喋呤(MTX),再与 HRP标记的甲胺喋呤(MTX)抗体 ,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲胺喋呤(MTX)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人甲胺喋呤(MTX)浓度。 试剂盒组成 标本要 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过(HRP)活性。 计算 以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上 ,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有 析出,稀释时可在浴中加温助溶,洗涤时不影响 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在 5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD值 大于标准品孔第一孔的 OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

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近期,我公司技术员对新品Elisa试剂盒的产品性能做出分析总结,我司技术员表示:研究思路是科研研的灵魂,实现好的科研指导思想离不开好的研究设计,如果研究设计不理想,好思路也不一定能最终成功形成成果。今天我们就一起来看看,上海恒远为您带来的最新技术,Elisa试剂盒性能介绍: 一、精密度和准确度 对于有最高残留限量的药物,添加浓度为MRL及MRL上下各一个浓度;对于禁用药物,添加浓度为定量限和2倍定量限,每个添加浓度至少测定5个平行样,并至少进行3批实验(不同检测日期,不同标准曲线,不同批次试剂盒)。 1.准确度:回收率范围大于40%或符合相应检测标准的要求。 2.精密度:以变异系数表示。 批内变异系数:每批平行样之间的变异系数小于或等于25%,对于禁用药物小于或等于30%. 批间变异系数:所有样品之间的变异系数值小于或等于30%,对于禁用药物小于或等于40%. 定性方法:阴性和阳性样品各测定不少于50份,确定假阳性率和假阴性率。 二、检测限和定量限 1.检测限:20份空白样品测定均值加3倍标准差。 2.定量限:应大于标准曲线中最低浓度点。对于定量方法,应对该浓度样品至少测定6次进行验证,而不能通过外延法推断。 三、标准曲线 1.定量方法:标准曲线至少由5个浓度组成,测定次数不少于5次,以确定工作浓度范围和IC50范围。 2.定性方法:工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定,每个浓度重复不少于5次,浓度与响应值之间应有一定的关系。 四、复核试验 1.定量方法:检测限、IC50以及至少两个添加浓度的准确度和精密度,并与理化方法(或与具代表性进口试剂盒)比较。 2.定性方法:检测限、假阳性率和假阴性率。 掌握了Elisa试剂盒性能特点之后,能够在原有实验方法的基础上,进行大胆的科学合理创新。从而提炼出实验设计思路,寻找到合适且优质的实验方法。上海恒远生物公司专业提供高品质Elisa试剂盒,提供全程技术指导及代测服务,助您实验成功。

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