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猪白细胞介素 -4(IL-4)elisa试剂盒说明书

2015-06-27 16:38

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使用目的: 本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素 -4(IL-4)含量。实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪白细胞介素 -4(IL-4)水平。用纯化的猪白细胞介素-4(IL-4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-4(IL-4),再与 HRP标记的白细胞介素 -4(IL-4)抗体结合,形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。 TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素 -4(IL-4)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度( OD值),通过标准曲线计算样品中猪白细胞介素 -4(IL-4)浓度。试剂盒组成标本收集方法: 1. 血清: 室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 2. 血浆: 应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 3. 尿液: 用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。 4. 细胞培养上清: 检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。 5. 培养细胞 检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 6. 组织标本 切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

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