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人白介素-7(IL-7)ELISA试剂盒宣传资料

2015-03-18 15:05

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资料摘要:

准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。 2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成2000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液200ul。在第一管中加入2000pg/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 人白介素-7(IL-7)ELISA试剂盒检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 4. 洗板:同前。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。 6. 洗板:同前。 7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗处反应15分钟。 8. 每孔加入100ul终止液混匀。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 2. 以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应IL-7含量。 人白介素-7(IL-7)ELISA试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的IL-7 检测浓度小于15pg/ml。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的人IL-7。不与人其它细胞因子有交叉反应。 3. 重复性:板内、板见变异系数均小于10%。 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。 2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。 3. 板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。 5. 本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!

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近期,我公司技术员对新品Elisa试剂盒的产品性能做出分析总结,我司技术员表示:研究思路是科研研的灵魂,实现好的科研指导思想离不开好的研究设计,如果研究设计不理想,好思路也不一定能最终成功形成成果。今天我们就一起来看看,上海恒远为您带来的最新技术,Elisa试剂盒性能介绍: 一、精密度和准确度 对于有最高残留限量的药物,添加浓度为MRL及MRL上下各一个浓度;对于禁用药物,添加浓度为定量限和2倍定量限,每个添加浓度至少测定5个平行样,并至少进行3批实验(不同检测日期,不同标准曲线,不同批次试剂盒)。 1.准确度:回收率范围大于40%或符合相应检测标准的要求。 2.精密度:以变异系数表示。 批内变异系数:每批平行样之间的变异系数小于或等于25%,对于禁用药物小于或等于30%. 批间变异系数:所有样品之间的变异系数值小于或等于30%,对于禁用药物小于或等于40%. 定性方法:阴性和阳性样品各测定不少于50份,确定假阳性率和假阴性率。 二、检测限和定量限 1.检测限:20份空白样品测定均值加3倍标准差。 2.定量限:应大于标准曲线中最低浓度点。对于定量方法,应对该浓度样品至少测定6次进行验证,而不能通过外延法推断。 三、标准曲线 1.定量方法:标准曲线至少由5个浓度组成,测定次数不少于5次,以确定工作浓度范围和IC50范围。 2.定性方法:工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定,每个浓度重复不少于5次,浓度与响应值之间应有一定的关系。 四、复核试验 1.定量方法:检测限、IC50以及至少两个添加浓度的准确度和精密度,并与理化方法(或与具代表性进口试剂盒)比较。 2.定性方法:检测限、假阳性率和假阴性率。 掌握了Elisa试剂盒性能特点之后,能够在原有实验方法的基础上,进行大胆的科学合理创新。从而提炼出实验设计思路,寻找到合适且优质的实验方法。上海恒远生物公司专业提供高品质Elisa试剂盒,提供全程技术指导及代测服务,助您实验成功。

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