Moxi系列库尔特细胞分析系统在PBMC检测中的应用

外周血单个核细胞（Periphery blood mononuclear cell，PBMC）是外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞，单核细胞，浆细胞等（如图1）。在机体免疫系统中，PBMC细胞扮演着重要角色，不仅参与免疫应答和免疫调节，还是抗体药物研发、感染性疾病、恶性血液疾病、疫苗开发以及移植免疫等领域的研究原材料。

图1. PBMC细胞的组成

外周血中，除了PBMC外，还有无核的血小板、成熟的红细胞、多核的粒细胞等，其体积、形态和比重均不相同。因此，可用密度梯度离心法将各种细胞与PBMC分离开，如Ficoll密度梯度离心法，离心后比重较大的红细胞和粒细胞沉于管底，PBMC漂浮于分离液表面（如图2）。

图2. PBMC细胞的分离

PBMC的质量非常关键，直接决定下游的实验研究或治疗方案如何推进。但是受限于技术方法，分离出来的PBMC难以避免会混有其他细胞，如红细胞等。因此，对PBMC样本进行精确的细胞计数、精准的细胞活率检测，以确定细胞的质量尤为重要。

PBMC样本的特殊性：1.样本通常来自患者，数量有限，用尽可能少的检测次数获取到最真实的浓度数据；2.红细胞与PBMC大小相近，难以通过肉眼区分；因此常规的计数方法对此类样本均无法满足要求。采用血球计数板的显微镜下人工计数方式，通常计数几十个细胞，继而推断整个样本浓度，其计数体系非常小，影响统计学准确性，同时细胞活率的判定依赖台盼蓝染色，人为主观因素导致低准确性和低重复性。基于图像法的自动细胞计数仪，通过自动化消除了一些不可靠性，但其原理与依赖图像的血球计数方式相同，仍然存在低准确性和低重复性的问题。

为解决这种复杂细胞悬液的计数问题，需要加大计数体系，即计数更多的细胞，并避免对图像的依赖。美国Orflo Technologies 公司的Moxi系列库尔特细胞分析系统就是解决这一困难的利器，三个型号设备（Moxi Z，Moxi V和Moxi Go II）均采用细胞计数和体积测量行业的金标准——库尔特原理，同时结合专利的微流控技术，对细胞样本进行精准计数和体积测量。Moxi V和Moxi Go II还增加了流式荧光检测模块，实现对细胞样本的荧光活率检测及常规流式分析。设备一次运行，可在几秒内完成数万个细胞的计数及荧光检测，计数体系大，不依赖图像，对细胞样本进行绝对计数和三维立体的体积测量，具备更高的准确性和重复性。

如图3所示，是Moxi库尔特细胞分析系统进行PBMC计数的结果，一次计数18000多个事件，包括细胞和碎片。通过体积门控设置，将<3μm处的碎片峰（红色框）排除，确保输出的浓度数据中只包括真实的细胞信息。

图3: PBMC检测结果

Moxi V和Moxi Go II在细胞计数和体积测量的基础上增加了流式荧光检测通道，预设有PBMC检测程序，实现一键调用，10秒即可完成细胞计数、体积检测及活率检测，同时可提供红细胞污染数据（图4）。

图4:PMMC预设程序检测结果页面

Moxi 系列产品采用库尔特原理进行细胞计数和粒径测量，其中高端型号配备流式荧光检测通道，可进行细胞活率、细胞凋亡、转染效率、活性氧簇、线粒体膜电位等常规流式检测。仪器设计小巧轻便，无需预热，开机即用，预设程序，触屏操控，运行后10秒即可给出测试结果，使用后也无需清洁维护。无论是经验丰富的实验高手，还是初试身手的实验小白，Moxi系统都可以助您轻松完成实验。

环亚生物，生命科学产品全国性代理商，不断把国外顶级的创新产品引入中国。环亚生物具备完善的公司运营、产品管理、营销、售前技术支持和售后维修体系。环亚生物作为Orflo Technologies大中华区独家代理商，负责Orflo Technologies产品大中华区的营销和售后支持。

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