一、培养基简介:
硫乙醇酸盐流体培养基,也称液体硫乙醇酸盐培养基(FT),是在有氧条件下培养厌氧菌的一种澄清液体培养基。
《中国药典》中列出该培养基的配方为:
![111111.PNG 111111.PNG](https://img1.17img.cn/17img/images/202207/uepic/29ced52f-44c1-4470-b713-b2fff8d1c700.jpg)
培养基配方中各成分的作用及原理,可参考
本文主要就《中国药典》中对该培养基的质量和使用方法上的一些规定进行分析和解读。
二、关于使用范围的规定:
《中国药典》规定:硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养,也可用于需氧菌的培养;胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。
顾名思义,对于厌氧菌的培养,必须使用硫乙醇酸盐流体培养基,而对于需氧菌,则有两种培养基可选用,硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基,本人认为,对于需氧菌应首选胰酪大豆胨液体培养基,因为硫乙醇酸盐培养基因为空间有限,里面的氧浓度未必能满足所有需氧菌的生长。尤其是药品中有些需氧菌可能菌体细胞已经受损,在这种氧气浓度受限的培养基中未必能准确检出;另外,培养基中刃天青的存在,也会对细菌的生长有抑制。综合这两方面考虑,为了将药品中的需氧菌尽可能检出来,建议最好使用胰酪大豆胨液体培养基。
三、关于氧化层的规定:
《中国药典》规定:该培养基的装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的1/2。
即分装硫乙醇酸盐培养基所用的容器必须有一定的高度,最终目的是为了能够更好地营造培养基内部的厌氧环境。目前我公司产品有多种规格,干粉形态、即用型瓶装和即用型试管装。其中瓶装又分别有100mL、200mL和500mL规格,管装有10mL和7.5mL规格,满足不同客户群的需求(如图1)。
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图1 公司现有的硫乙醇酸盐流体培养基产品
对于氧化层的高度,2020版《中国药典》还有如下规定:在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/3(2015版药典中该项规定为1/5),否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失(不超过20分钟),迅速冷却,只限加热一次,并防止被污染。
正常生产出的硫乙醇酸盐是有氧化层的,这是有该款培养基的配方特性所决定,并不妨碍试验人员使用,只要氧化层满足相关规定,就能有效地检出样品中的厌氧菌。
生孢梭菌和产气荚膜梭菌在本公司产品中的生长形态如图2所示。
![](https://img1.17img.cn/17img/images/202205/uepic/56891142-ff67-4faf-a8b6-aa703fb950ee.jpg)
图2 液体硫乙醇培养基中厌氧菌的生长状态
四、有关培养基存放和培养温度的规定:
制备好的培养基若不即时使用,应置于无菌密闭容器中,在2-5℃避光的环境下保存,并在经验证的保存期内使用。
除另有规定外,接菌后的硫乙醇酸盐流体培养基置30-35℃培养。
五、有关对菌种的要求:
对于培养基灵敏度的检查,《中国药典》规定菌种培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代(从菌种保存中心获得的干燥菌种为第0代),并采用适宜的菌种保藏技术进行保存和确认,以保证试验菌株的生物学特性。
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