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上海第二医科大学
2012/03/19
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生物实验报告有关细胞计数法的怎么写?
1、 制备细胞悬液 对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物制备成细胞悬液。 1)、终止培养,将培养液吸出,用PBS洗培养物一次。 2)、 给培养瓶内加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,于37℃消化1-3min 。期间在镜下观察。当细胞变圆接近脱壁时,弃消化液。 3)、加入一定量的培养液(如果这些培养细胞不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使细胞脱壁而制成细胞悬液。 2、计数与计算过程 1)、在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片。 2)、用玻璃虹吸管吸取细胞,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹糟处流出悬液,至盖玻片被液体充满为止。 3)、置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。对于压线的细胞只计数在上线和左线者,对于细胞团按单个细胞计数。 4)、按下式计数细胞悬液的密度: 细胞密度=(4个大正方格细胞总数/4)×稀释倍数×104个/ml 注:稀释倍数(至少乘以2,因与trypanblue等体积混合)
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2013/11/07
细胞计数法
实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 具体操作: 1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。 2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算: 细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104 说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。 公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为: 1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 (注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液) 细胞密度=(4个大正方格细胞总数/4)×稀释倍数×104个/ml 注:稀释倍数(至少乘以2,因与trypanblue等体积混合)
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2013/11/07
如何对活细胞进行计数?
用台盼蓝拒染法计数活细胞: 1. 彻底混合细胞悬液,取100礚样本至一支试管中. 2. 台盼蓝染色有两种方法。一是首先用细胞培养液稀释细胞样本,然后用台盼蓝溶液(产品号 #07050) 1/2稀释样本(细胞和台盼蓝的稀释比为1:1)
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2014/01/20
高中常用的细胞计数法有哪几种?分别适用于哪种情况?
细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。
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2014/01/20
如何进行细胞直接计数
1、如果靶细胞是帖壁细胞,在细胞因子作用适当时间后,用生理盐水洗去死亡细胞,用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打,使细胞分散 成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。
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2014/01/20
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