2023/03/02 15:28
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多种真菌毒素专用柱液质质法 一步通过法SPE柱净化谷物类
真菌毒素为真菌增殖时产生的次生有毒代谢产物。
真菌的孢子能透过空气、风力、水流和动物等方式来传播。只要有少量蛋白质、淀粉、脂质及水份,就是适合真菌生长的环境,因此谷物、果实类、玉米及花生都是真菌最好的生长处。
黄曲毒素具有潜在性的肝毒害(hepatoxin)及致癌性,其性质稳定,因此真菌毒素易出现在食物链中;除了直接食用被真菌毒素污染的食物,也可能透过饲料让动物生病。
真菌毒素污染食品和饲料对于全球性作物及动物养殖业影响很大。
据估计每年约25%农作物受到不同程度的真菌毒素污染,以美国和加拿大而言,真菌毒素造成饲料业和家畜业每年损失约50亿美金(IFST, 2006)。
本篇应用以FaTEx-gen快速净化萃取净化柱进行前处理,使用LC-MS/MS分析11种真菌毒素的含量, 包含黄曲毒素类、赭曲毒素A及镰孢菌毒素类(伏马毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)、玉米赤霉毒素等),建立一套快速准确的检测方法,利于维护饲料质量及相关作物食品安全。
搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱及Agilent 6470液相层析串联式质谱仪,检测谷物、黄豆及花生等基质。
样品制备流程如下:
样品秤样后加标静置,加入12mL萃取溶液,高速震荡机震荡30分钟,于3500rpm离心5分钟,得到上清液。
取一定量的上清液通过FaTEx-gen SPE柱净化,氮吹回溶后上机到LC-MSMS分析。
分析结果如表三所示,回收率落在81.9~112.7%范围内,CV%皆小于20,显示此为一快速、稳定之检验方法。
前处理步骤和仪器分析条件,欢迎索取。
产品信息:FaTEx-gen 真菌毒素专用SPE柱 巨研科技 50只/盒
表2、霉菌毒素11项药剂之添加浓度
分析物 | 中文名称 | 添加浓度(ng/g) |
Aflatoxin B1 | 黄曲霉素 B1 | 2.5 |
Aflatoxin B2 | 黄曲霉素 B2 | 2.5 |
Aflatoxin G1 | 黄曲霉素 G1 | 2.5 |
Aflatoxin G2 | 黄曲霉素 G2 | 2.5 |
Ochratoxin A | 赭曲霉毒素 A | 2.5 |
T-2 toxin | T-2毒素 | 5 |
HT-2 toxin | HT-2毒素 | 5 |
Deoxynivalenol | 呕吐毒素 | 25 |
Zearalenone | 玉米赤霉烯酮 | 25 |
Fumonisin B1 | 伏马毒素 B1 | 100 |
Fumonisin B2 | 伏马毒素 B2 | 100 |
表3、谷类样品中11项霉菌毒素之回收率和变异系数
中文名称 | 英文名称 | 黃豆 | 花生 | ||
CV% | R% | CV% | R% | ||
黄曲霉素 B1 | Aflatoxin B1 | 2.3 | 108.5 | 9.0 | 97.5 |
黄曲霉素 B2 | Aflatoxin B2 | 3.7 | 105.0 | 2.4 | 98.2 |
黄曲霉素 G1 | Aflatoxin G1 | 2.6 | 105.4 | 2.0 | 102.9 |
黄曲霉素 G2 | Aflatoxin G2 | 3.4 | 107.4 | 4.0 | 103.0 |
赭曲霉毒素 A | Deoxynivalenol | 4.8 | 100.3 | 1.6 | 103.9 |
T-2毒素 | Fumonisin B1 | 8.1 | 90.3 | 6.1 | 89.0 |
HT-2毒素 | Fumonisin B2 | 13.5 | 81.9 | 5.3 | 96.7 |
呕吐毒素 | HT-2 toxin | 9.1 | 109.7 | 13.4 | 100.4 |
玉米赤霉烯酮 | Ochratoxin A | 2.8 | 101.9 | 3.8 | 106.0 |
伏马毒素 B1 | T-2 toxin | 5.9 | 110.1 | 5.6 | 112.7 |
伏马毒素 B2 | Zearalenone | 8.1 | 108.6 | 5.0 | 94.4 |
*重复性,n=3
结论:
1、
本篇以FaTEx-gen SPE柱净化样品,采用液质质(LC-MSMS)的仪器分析方法,检测谷类样品(黄豆及花生)之多重霉菌毒素(黄曲毒素类、赭曲毒素A及镰孢菌毒素类)共11项,每次分析时间13分钟,为快速准确的检验方法。
2、 FaTEx-gen萃取净化套组可针对复杂检体基质加强净化,降低基质干扰。
3、 以FaTEx-gen套组检测添加多重毒素标准品之谷类样品(添加浓度:黄曲霉素B1 Aflatoxin B1,黄曲霉素B2 Aflatoxin B2, 黄曲霉素G1 Aflatoxin G1, 黄曲霉素G2 Aflatoxin G2,赭曲霉毒素 A Ochratoxin A:2.5 ng/g,T-2 toxin, HT-2 toxin:5 ng/g;呕吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤霉烯酮 Zearalenone:25 ng/g;伏马毒素 B1 Fumonisin B1,伏马毒素 B2 Fumonisin B2:100 ng/g)回收率落在81.9~112.7%范围内,变异系数皆小于20,为稳定之检验方法。
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