预制菜 肉制品中糖检测的分析方法

预制菜 肉制品中糖检测之前处理方法

本篇中的肉制品，如素肉堡、腌渍鲜嫩鸡胸肉、原味炸鸡、辣味炸鸡、基础风味鸡肉丝、香料鸡排、鸡翅蓉、鸡肉热狗、香草鸡腿排等，在加工过程中添加复杂的佐料进行调味，这给肉制品中糖的定量分析造成很大困难。

肉制品中糖的定量分析有两个难点：

一、没有现成的定量分析标准方法可以参考。

二、净化不彻底的样品溶液上机LC/ELSD后，极易毁坏糖专用色谱柱和堵塞ELSD雾化器，消耗很大的维修成本；

为了解决这个问题，巨研科技研发出FaAEx-AD2糖专用SPE净化柱，摸索出合适的前处理操作步骤和仪器分析条件。

此分析方法通过方法验证后，邀请业内同行进行实践验证，同行反馈FaAEx-AD2糖专用SPE柱的净化效果良好！

本篇将介绍两个肉制品中糖检测的方法：

方法一：使用巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化，以LC/ELSD法分析；

方法二：参考GB/T 9695.31-2008方法，使用分光光度法和直接滴定法分析。

方法一：使用巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化

以泰式調味腿肉片样品为例，测试果糖（Fructose）、山梨醇（Sorbitol）、半乳糖（Galactose）、葡萄糖（Glucose）、蔗糖（Sucrose）、乳糖（Lactose）和麦芽糖（Maltose），样品加入10ml的50%乙醇溶液、超声、震荡、定容、离心后取上清液。

将上清液通过FaAEx-AD2糖专用柱除杂（只需一步过柱），获得目标物溶液，过滤后上机到LC/ELSD进行定量分析。

（1）前处理步骤：

样品均质
↓
取1g样品于离心管中，加10 ml 50%乙醇溶液
↓
超声震荡20min
↓
高速震荡10min
↓
以50%乙醇溶液定容至20 mL(固体样品:直接加10mL)
↓
6000rpm离心30min
↓
取10ml上清液过巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱，取滤液上机分析

（无须活化平衡，一步通过法获得目标物）

（2）LC-MSMS分析出谱图如下：

（3）小结：

使用FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化后，再上机分析，有两个好处：

1、 果糖（Fructose）、山梨醇（Sorbitol）、半乳糖（Galactose）、葡萄糖（Glucose）、蔗糖（Sucrose）、乳糖（Lactose）和麦芽糖（Maltose）这7种糖的回收率在80-120%之间。

2、 有效延长糖专用色谱柱的使用寿命，避免堵塞ELSD雾化器，大大降低耗材和配件的损耗成本。

3、 前处理中已经进行萃取、超声和离心的净化操作，为什么还要开发FaAEx-AD2 糖专用柱再次除杂？

答：因为离心得到的上清液过滤膜后上机分析，进几针样品后，糖专用色谱柱被污染、ELSD雾化器也很快被堵塞，基本不能进行日常的品控管理。

离心得到的上清液经过FaAEx-AD2 糖专用柱净化后，有效地解决了这个问题，需要在日常做肉制品中糖测试的用户，持续回购FaAEx-AD2 糖专用柱。

方法二：参考GB/T 9695.31-2008标准方法

关于肉制品中总糖的检测，我们有一个标准方法，即：《GB/T 9695.31-2008肉制品 总糖含量测定》，以葡萄糖为对照物。

第一法适用于肉制品中总糖含量的测定，使用分光光度法；

试样中的总糖含量以葡萄糖计。

第二法适用于不含淀粉的肉制品中总糖含量的测定，使用直接滴定法测糖

总结：

1、 肉制品中糖的检测，若采用GB/T 9695.31-2008标准方法，前处理步骤操作复杂，耗时长，花费大量人力，分析结果的灵敏度比LC/ELSD法低，几乎不能做定量分析。

2、 采用LC/ELSD法分析肉制品中的糖含量，难点在于怎么充分去除复杂样品中的杂质。通过在样品中加入10ml的50%乙醇溶液、超声、震荡、定容、离心、过滤这些步骤，回收率尚可，但除杂效果不佳，进样几次后，糖专用色谱柱被污染，甚至ELSD雾化器被堵塞，增加耗材和仪器配件的消耗成本。

3、将离心后的上清液，一步法通过FaAEx-AD2糖专用SPE柱的净化、过滤后上机分析，可有效去除杂质，延长糖专用色谱柱和ELSD的使用寿命，且HPLC基线更加平稳，回收率表现更优（80-120%）。