2012年12月5日，德国耶拿公司联合河南百奥凯公司，在郑州市金质大酒店隆重举办了“德国耶拿生命科学前沿技术交流会”，取得圆满成功。       当天近100名在河南省从事生命科学基础研究或质控检测的专家学者参加了此次交流会，其中有耶拿公司的老用户，也有对耶拿公司慕名而来的潜在新用户，有在郑州当地的老师，也有专程从外地赶过来参会的老师。本次会议主题紧密贴合广大科研工作者的实际工作需求，德国耶拿生命科学部的吴潇韫和孙婷技术专家分别做了“定量PCR技术进行基因表达分析的质量控制”和“应对SSR分子标记技术在育种及种质鉴定中的挑战”的专题报告，引起参会老师的共鸣，大家提问踊跃、讨论热烈。会后大家纷纷表示很有收获，并欢迎耶拿公司今后在河南做更多类似的活动。       除了专题报告外，德国耶拿还在现场展示了一系列分子生物学实验室必备工具，如高速PCR仪SpeedCycler2，高速定量PCR仪qTOWER，超微量核酸蛋白测定仪ScanDrop250、便携式移液工作站SELMA 96、水平/垂直/转印电泳系统等，受到大家的热切关注，让老师们近距离直观感受到了耶拿公司产品的高技术、高品质。     德国耶拿公司会一如既往地以“品质造就非凡”为宗旨，继续为广大中国用户提供高品质的产品、优质的服务。

    2012年11月14-16日，德国耶拿公司参加了第三届全国食源性病原微生物检测技术与实验室质量控制学术研讨会。此次研讨会在南京黄埔大酒店举行，出席会议的有各省检验检疫局及分支局、质监系统从事食品微生物学工作的科研技术人员和企业代表110余人。其中多名国内外专家就食源性病原微生物检测的新技术应用、食品安全的研究现状及发展趋势等议题进行了深入的交流与探讨。 作为会议赞助商之一的德国耶拿公司，针对本次研讨会特别带来了本公司最新推出的产品—MobiLab 微生物现场快速检测系统，它是符合现场检测的理想产品。MobiLab是紧凑、一体化的便携箱内装备的移动实验室，从样品采集、核酸抽提、高速PCR扩增到检测结果显示，全部操作在同一系统平台上完成，将原本需要24-48h完成的病原微生物检测，缩短到1h即可完成。该仪器配有耐用电池及各种车载和常规充电器，保证在各种现场能完成检测工作。该仪器操作简便，无需特殊培训，可提供沙门氏菌、李斯特菌、大肠杆菌、流感病毒等多种常用的检测试剂盒，也可根据用户的要求定制检测试剂盒。在展台现场，各位专家和老师都对MobiLab有非常浓厚的兴趣。                              展台现场     本次研讨会上德国耶拿公司生命科学部门的产品专员吴潇韫做了专题报告，主要介绍了微生物现场快速检测系统MobiLab的特点及应用。同时还介绍了德国耶拿公司的其他产品，我们可以为客户提供整套的生命科学解决方案，从样品处理、核酸提取、核酸定量、核酸扩增到功能基因组分析。                     研讨会现场------吴潇韫做专题报告

    两年前的慕尼黑展会上，德国耶拿公司的生命科学产品第一次在国内大型展会上系统亮相，此次慕尼黑展会上，大家可以看到与上届相比有了更丰富的产品、更全面的产品展示。2009年，德国耶拿收购了欧洲最大的PCR仪生产商Biometra公司和专业的高通量液体工作站供应商Cybio公司，极大丰富了耶拿公司生命科学的产品线，从样品处理和制备、核酸纯化和测定、PCR和定量PCR、电泳和凝胶成像系统、生物分子相互作用分析仪、自动化液体工作站、核酸纯化试剂和快速检测试剂等等，为分子生物学实验室提供全面的解决方案。本次慕尼黑展会上，耶拿生命科学整合了耶拿原有的、Biometra和Cybio三家公司的产品，以一个全面统一的形象展示给大家。       德国耶拿生命科学虽然进入中国时间并不长，但发展速度非常快，不断推出新产品来满足各种应用需求。高速PCR技术是德国耶拿专利性的独特技术，能为用户提供最快的PCR反应，大大节省PCR时间，并有效提高产物的特异性。除了已在疾控、质检等方面有很好应用的高速定量PCR仪qTOWER以外，本次展会上展示了定量PCR仪产品系列的最新成员qTOWER2.2，真正的六通道检测，无需光路校正，带12列的温度梯度功能，检测滤光片组可灵活更换，能满足用户各种检测需求。InnuPure C16是一台更新换代的新产品，采用磁珠法的原理，通过底部吸附磁珠来分离纯化核酸，能避免用磁棒法吸附磁珠不够完全的不足，能得到非常纯净的不含磁珠的核酸。还有食源性病原微生物现场快速检测系统MobiLab，也是一套非常独特的系统，旅行箱的设计，遇到突发食品安全事件可以拎箱即走，在事发现场只需1小时的时间就能完成食品中常见病原微生物的检测。“品质非凡、精度优异、技术领先、持久耐用”是德国耶拿公司的服务宗旨，我们还将一如既往地为中国用户提供全面先进的产品。                 InnuPure C16                MobiLab                   qTOWER2.2   自动核酸纯化系统      食源性微生物现场快速检测系统    六通道荧光定量PCR仪       德国耶拿在中国已经走过了十一年，耶拿中国团队从销售、技术、市场、应用、售后等方面有非常强大齐全的服务队伍，有稳定友好的合作伙伴，接下来耶拿公司连同合作伙伴一起将继续致力于基础科研、植物育种、食品安全等领域，为广大中国用户提供全面、专业、及时的服务。

    慕尼黑上海分析生化展(Analytica China)是分析和生化技术领域的国际性博览会，专门面向飞速发展的中国市场。凭借着 Analytica 的国际品牌，Analytica China 吸引了来自全球主要工业国家的分析、诊断、实验室技术和生化技术领域的厂商。继 2002年首次成功举办以来，Analytica    China 已经成为世界最大的分析、实验室技术和生化技术领域的专业博览会和网络平台，每两年举办一次，是业内领军企业全面展示最新技术、产品和解决方案的最佳平台，这也是该展会能够吸引越来越多展商和观众的关键所在。同期举办的Analytica China国际研讨会也是业内人士关注的焦点。       德国耶拿分析仪器股份公司（Analytik Jena AG, 简称AJ公司）目前在全球90多个国家设有分支机构。公司的宗旨是不断创新和追求活力。2009年成功收购两家德国著名的生物企业CyBio和Biometra公司。     Biometra公司于1985年成立，是欧洲最大的分子生物学仪器生产商。主要以不同系列的分子诊断试剂盒、快速现场检测系统、样品制备、核酸抽提纯化试剂和自动提取设备、质检，高速PCR、高速定量PCR、各种电泳、转印、凝胶成像、大分子相互作用仪等生命科学设备为主的公司，并在中国拥有众多的用户。     CyBio公司是一家专注于半自动和各类专业自动化液体处理工作站的著名企业，1986年就已经推出第一台液体处理工作站。作为一家全球知名的多品种半自动、全自动高通量移液工作站和药物筛选设备的专业制造商，是这个领域公认的领导者。20多年的经验累积与多项独创的专利技术保证了Cybio产品无以伦比的准确性，并且在提高自动化操作的速度和减少试剂用量方面形成了独特优势。广泛应用于法医、疾控、商检、医学检测、科研、农业、食品卫生、制药等实验室客户群，特别是在全球各大制药企业拥有多年忠实客户。       展会期间，相关技术、维修以及客户应用专家，将能与您面对面探讨不同应用需求以及仪器使用方案。运用一台便携式移液工作站向您展示最新的移液工作站产品设计理念和客户友好化操作和控制界面的实现，并向您讲解不闲置的液体处理工作站如何实现。现场准备了大量技术发展和产品应用资料以及各类视频演示文件。     更多资料详细信息和您的需求请电邮 mx.zheng@analytik-jena.com.cn。我们会在适当时间主动联系您共同探讨。 您也可以致电德国耶拿分仪器股份公司北京代表处总机010-65543849; 65543879转郑女士。     更多活动，敬请关注德国耶拿公司官方网站：http://www.analytik-jena.com.cn。　        10月16日-18日，上海-新国际博览中心，理化分析N2馆-2422，德国耶拿公司生命科学部，欢迎新老客户再次莅临我公司展台！

    德国耶拿分析仪器股份公司（Analytik Jena AG, 简称AJ公司）成立于1990年， 今天已成为德国最大的分析仪器公司之一。公司总部设在德国耶拿(Jena)市。目前在全球90多个国家设有分支机构。公司支柱是其久负盛名的分析仪器。      “生命科学”是德国耶拿公司下一个战略重点，其产品线发展迅速，公司多年来在科学仪器和精密光学器件的研发经验为其飞速发展奠定了坚实的基础。分子生物学高效解决方案产品线包括：液体处理工作站、分子诊断试剂盒、快速现场检测系统、样品制备，核酸抽提纯化试剂和自动提取设备、质检，高速PCR、高速定量PCR、各种电泳，转印，凝胶成像，大分子相互作用仪等。       德国耶拿公司从2001年开始进行不断的并购，从实验室液体处理自动化系统、分子诊断试剂盒到核酸纯化试剂盒和电子生物芯片产品，不断地完善生命科学业务。其独创的高速PCR技术正引领着PCR技术向更快、更高的方向发展。2009年成功收购两家德国著名的生物企业CyBio和Biometra公司。CyBio公司是一家专注于半自动和各类专业自动化液体处理工作站的著名企业，1986年就已经推出第一台液体处理工作站；Biometra公司于1985年成立，是欧洲最大的分子生物学仪器生产商。主要以PCR仪、电泳仪等生命科学设备为主的公司，并在中国拥有众多的用户。     耶拿公司在生命科学领域的收购里程碑：     2001 – 收购Cybertron，实验室自动化系统     2002 – 正式推出第一款生命科学类仪器     2004 – 收购Roboscreen，分子诊断试剂盒     2006 – 成立AJ Innuscreen 产品组，专门研发生产核酸纯化试剂盒     2007 – 收购eBiochip，电子生物芯片     2009 – 收购Biometro，分子生物学领域仪器和技术     2007 – 收购CyBio，各类半自动和全自动移液工作站       旗下的CyBio 公司为一家全球知名的多品种半自动、全自动高通量移液工作站和药物筛选系统的专业制造商，是这个领域公认的领导者。20多年的经验累积与多项独创的专利技术保证了Cybio产品无以伦比的准确性，并且在提高自动化操作的速度和减少试剂用量方面形成了独特优势。仪器产品以紧凑的设计、高效的操作、稳定的可靠性、灵活的组合和超高通量著称。各种组件可以灵活搭配，形成多种性能卓越、功能强大的系统。公司特有的吸头密封、活塞动力等专利技术为行业高端产品设计。从而充份保证移液体积高度重现性、精确度的长期稳定性、以及生命科学实验室的卫生洁净度。产品类型丰富，广泛应用于法医、疾控、商检、医学检测、科研、农业、食品卫生、制药等实验室客户群，特别是在全球各大制药企业拥有多年忠实客户。   　　德国耶拿进军中国十多年来，凭借其非凡的品质和卓越的服务，得到了国内用户及业界的广泛赞誉。2012年3月被继续评为十大最有影响力的进口分析仪器公司， 并名列前茅。 而生命科学领域短短两年国内重点推广期间，其下属的Biometra GmbH公司在亚洲的代理商就获得了一个大订单。该订单的销售额超过50万欧元。包括数百台PCR热循环仪(在生物、医学、药学研究等领域用于DNA扩增)。另外，在2011年中国科学仪器发展年会上，qTOWER高速实时荧光定量PCR仪赢得了评审专家们的肯定，获得2010年年度优秀新产品称号。移液工作站在国内推广不到一年，以其高品质材质、精密设计、操作友好的界面、可开放的平台、个性化的应用方向以及不断拓展的产品性能，特别是高性价比的半自动移液工作系统，迅速获得业内代理商和购买客户的信任和支持。       为将其生命科学产品更好地介绍到中国，更好地服务于科研、检验及生命科学企业。德国耶拿公司将致力于迅速发展生命科学服务团队，提高市场管理、技术指导和设备安装、维护服务水平。诚挚欢迎您早日加入我们这一朝气蓬勃的队伍，共同携手服务于中国的液体处理工作站应用市场。       详细信息和您的需求请电邮 mx.zheng@analytik-jena.com.cn  我们会在适当时间主动联系您并电邮相关资料和产品演示视频等。 您也可以致电德国耶拿分析仪器股份公司北京代表处总机010-65543849; 65543879转郑女士。                                                           德国耶拿分析仪器股份公司生命科学部   2012年10月8日

尊敬的用户：   您好！非常感谢您的热心参与！   德国耶拿分析仪器股份公司生命科学部于2012年4月9日至2012年4月13日期间，在中国农业大学举行有奖问卷调查活动，填问卷即可获得纪念奖计时器一个。截止目前活动已经圆满结束，我们已经在所有有效答卷（即完整填写所有问题及基本信息）中随机抽取50名获奖者。其中包括一等奖10名（100元移动充值卡一张）和二等奖40名（50元移动充值卡一张）。 获奖名单如下： 一等奖 黄堃 生物学院 段金琳 动科学院 陈婧瑶 生物学院 于肖夏 农学院 杨乃科 农学院 刘金金 生物学院 徐媛媛 农学院 黄敏 农学院 杜昕宇 生物学院 毕明君 生物学院 二等奖 刘旸 动科院 张立帆 生物学院 郑传威 动科学院 叶青青 生物学院 张媛媛 动科学院 王怡婧 生物学院 张融雪 生物学院 王倩 生物学院 刘晓磊 生物学院 张伟 生物学院 路悦 动科学院 孙佳增 生物学院 高驰 农学院 钟辰 农学院 段梅 生物学院 邵凡 动科学院 王林海 生物学院 王亚秋 生物学院 迟爽 生物学院 徐俊 生物学院 赵飞羽 农学院 崔凯 动科学院 王旭 生物学院 刘杨杨 生物学院 魏凯文 生物学院 赵小红 生物学院 赵荦 生物学院 何彦锋 生物学院 仝宗永 生物学院 康晓龙 动科学院 徐芹芹 动科学院 陈宁 生物学院 杨晔 生物学院 竺林 生物学院 张传苹 动科学院 刘凌子 生物学院 孙江东   冯浩 生物学院   刘伟 生物学院 李菲菲 生物学院   如有疑问请与本公司联生命科学部王忠华系！

  德国耶拿超微量核酸蛋白测定仪ScanDrop在原有功能的基础上，又开发出操作便捷的超微量检测模式，配备Traywell只需滴加一滴样品就可完成检测工作。这使ScanDrop成为市场上唯一一款多功能超微量核酸蛋白分析仪，将新旧两代紫外分光光度计完美整合，同时具有三种检测模式可满足任何客户的需求。 详细信息请登录http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102376/download.asp。  

　　仪器信息网讯 2011年10月12-15日，第十四届北京分析测试学术报告会及展览会(BCEIA 2011)在北京展览馆隆重举行。为让广大网友及仪器用户深入了解BCEIA 2011仪器新品动态，仪器信息网特别开展了以“盘点行业新品 聚焦最新技术”为主题大型视频采访活动，力争将科学仪器行业最新创新产品、最新技术进展及最具有代表性应用解决方案直观地呈现给业内人士。以下是仪器信息网编辑采访德国耶拿分析仪器股份公司中国总经理赵泰先生的视频。 　　德国耶拿分析仪器股份公司(Analytik Jena AG, 简称AJ公司)成立于1990年，前身为卡尔.蔡司(Carl-Zeiss Jena GmbH)公司的分析仪器部, 今已成为德国最大的分析仪器公司之一。公司目前的主要业务是研究、开发、设计和生产制造总有机碳(TOC)/总氮(TN)分析仪，有机卤素化合物(AOX)分析仪，元素(C、S、N、Cl)分析仪;原子吸收光谱仪(AAS)和紫外/可见(UV/VIS)分光光度计和生化分析仪器等。 　　采访中，赵泰先生对耶拿新品高速荧光定量PCR以及该公司生命科学业务的发展情况进行了详细的介绍。 　　“耶拿在十年前就开始涉足生命科学业务，只是在在中国更大力发展分析仪器业务。现在耶拿公司也要在中国大力发展生命科学业务，我们去年才刚刚组建了一个完整的生命科学业务的团队。” 　　“耶拿有非常齐全的生命科学的产品，从样品的抽提、制备到测定，拥有非常完整的解决方案。耶拿的高速荧光定量PCR与高速PCR都能很快地完成分析，其扩增速率相比于普通的PCR至少提高了3倍。耶拿公司收购了biometra以后也更加强了自己在生化领域的力量，以后会有更多的产品推向市场。”

  法医DNA数据库（Legal DNA database），也称作法庭科学DNA数据库（Forensic DNA database）、罪犯DNA数据库（Crime DNA database）、DNA犯罪调查数据库（DNA criminal investigative database）等，是将DNA多态性分析技术、网络信息技术和数据库管理技术相结合，实现DNA信息数字化采集、管理和存储，远程自动查询比对和异地数据信息共享等功能的综合数据信息系统，主要用于为侦查破案、执法办案、诉讼活动、公共安全和社会管理提供DNA数据服务。   目前，法医DNA数据库的构建是基于PCR技术的短串联重复序列（Short Tandem Repeat，STR）。STR是广泛存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的分子遗传标记，多由2~5个碱基对构成核心序列，呈串联重复排列，目前在人类基因组中已经发现大量的STR基因座，其中法庭科学DNA检验领域最常用的核心序列为4个碱基的STR基因座就超过20000个。联合使用多个STR基因座可以产生数以亿计的等位基因型组合，能在很高的概率水平上认定目标个体，为法庭科学领域个体识别和亲权鉴定提供高精度的技术支持，因此STR检验已经成为DNA检验和各国DNA数据库建设中采用的主要技术。     公安机关DNA实验室正在逐步推广免核酸提取的直扩技术。该技术无需核酸提取，直接将采样卡载体加入PCR-STR反应体系中进行PCR扩增，然后进行毛细管电泳及STR数据分析。   法医DNA数据库构建流程如下：   1）利用采血卡采集血液样品；2）构建PCR反应体系；3）采用直扩法进行扩增；4）毛细管电泳及STR数据分析。      法医DNA数据库构建工作的挑战 建立法医DNA数据库时，需要处理的样品量是非常大的。因此，在构建PCR体系时需要大量的加样工作，工作负荷大成为一项挑战； 在建立法医DNA数据库的工作中，PCR实验是比较耗时的一步，如何缩短反应时间和获得高质量产物成为另一项挑战。   应对这些挑战，德国耶拿为您带来高品质的解决方案            如需了解详情和下载该资料请登录http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102376/down_180744.htm#。  

  品质造就非凡，十年共创辉煌        2011年，德国耶拿分析仪器股份公司中国代表处迎来了自己的十周年庆，并第六次参加BCEIA。回首十年： 我们秉承“品质造就非凡”的企业信条，为用户提供最高品质的仪器 我们坚持技术创新，多项技术成果为原子光谱行业的发展注入活力 我们以专业的技术支持和全方位的服务，回馈我们的广大用户 我们逐步形成了耶拿中国专业严谨，勤奋敬业的团队文化     在这个特殊的里程碑上，我们与您分享感动和喜悦。在下一个十年、二十年、一百年...我们还将与您继续欢乐同行，共创分析行业的美好未来！     10月12日-15日 BCEIA 展会期间，我们将继续广泛开展多种形式的用户回馈活动，新老客户到展台均可领取十周年纪念礼品。并邀您参加幸运大抽奖，更有机会赢取纯金纪念币！欢迎您光临德国耶拿的展台：2号馆2055-56，2077-78（靠近主席台）。我们还将于10月13日下午1:30 – 4:30在1号技术交流室举行专场技术讲座，期待与您深入交流连续光源原子吸收、高速实时荧光定量PCR等最新应用技术。         若需领取展会门票，请随时与我们联系。耶拿中国十周年庆更多活动详情请登陆我们的官方网站查询：     http://www.analytik-jena.com.cn    

  标准曲线线性不佳、熔解曲线杂峰多、基因表达数据不知如何分析、多重定量PCR如何设计引物……相信每一个荧光定量PCR的工作者都会遇到这样那样的问题。   为了给大家提供一个技术交流的机会，让有经验的人能和大家分享其成功的经验，让更多的人尽快从定量PCR的实验困惑中走出来，德国耶拿分析仪器股份公司携手上海生工共同举办“荧光定量PCR达人秀”活动，邀请“身经百战”的您秀出您完美的解决方案！     活动细则：   您只需要将您曾经碰到过的定量PCR实验中最头疼的问题以及最后的解决方案填写后发给我们，就可以参加此次活动。     评选流程：   9月16日至10月16日：文章投递有效期。   10月17日，从收集到的所有文章中评选出20篇优秀文章进入最终PK，于网上公布   10月18至10月30日，20篇文章网络公开投票，截止于10月30日24点，欢迎大家踊跃投票   10月31日公布获奖名单   网络投票及获奖名单公布网站：www.sangon.com/DM/vote01.aspx     奖品设置：   一等奖：1名，参观德国耶拿分析仪器股份公司总部，体验德国异地风情   二等奖：2名，Apple公司iPad平板电脑一台   三等奖：6名，名牌自行车一辆               您是荧光定量PCR达人吗？还在犹豫什么？快来参加吧！           详情请联系：                                     德国耶拿分析仪器股份公司            生工生物工程（上海）有限公司  电话：021-54261977                  电话：021-37772430  网址：www.analytik-jena.com.cn      网址：www.sangon.com                文章投递请登录以下网址： http://www.sangon.com/vote.aspx http://www.ebiotrade.com/custom/analytik-jena/110921/index.htm               

 高速PCR之典范SpeedCycler2吴潇韫王忠华(德国耶拿分析仪器股份公司)  摘要 本文介绍了德国耶拿分析仪器股份公司生产的高速PCR的SpeedCycler2的性能特点和应用。重点介绍了如何通过提高PCR升降温速度，提高模块温度与样品溶液温度一致性，来极大地降低每个PCR循环的时间，从而达到提高整个PCR反应速度的目的。指出了高速PCR提高PCR 产物的特异性的可能性。同时也列举了高速PCR在人类基因组学，长片段DNA植物基因组学，及在法庭科学等方面应用，指出了高速PCR技术为各项基因研究可能带来的新的进步。关键词 高速PCR、自适应技术、软件自控技术     中图分类号TH77 SpeedCycler2 with Rapid PCR TechnologyWu Xiaoyun，Wang Zhonghua（Analytik Jena China Office） Abstract The specification and application of one typical rapid PCR instruments SpeedCycler2 ，made by Analytik-jena.AG, Germany, are described. It is introduced that how SpeedCycler2 increased the PCR speed by increasing the PCR ramp rate, and decreasing the temperature  difference between the PCR module and sample solution. The possible increasing of PCR specificity is also introduced. Some application of rapid PCR in Human Genome, long piece DNA research in Plant Genome, and forensic are listed, and the possible progress in gene research by using rapid PCR was concluded.Key words Rapid PCR; Self-Adapting Container Technology; Software Adaption Controlling Technology  高速PCR技术(Polymerase chain reaction：聚合酶链反应，即是在体外模拟体内DNA复制的过程)说起来已不是一项最新的技术，因为德国耶拿分析仪器股份公司在2003年即拥有了高速PCR技术，并据此开发出了第一代高速PCR仪SpeedCycler，而今天SpeedCycler已被新一代的SpeedCycler2所更新换代。SpeedCycler2可以说是目前面市的历经考验的速度最快的PCR仪，本文将对这款PCR仪的性能特点、具体应用等做一概要介绍。1.SpeedCycler2主要性能特点 图1. SpeedCycler2 高速PCR仪   SpeedCycler2高速PCR仪具有高速、高效、高质量产物、配置灵活等多项优点，采用镀金纯银槽和高品质帕尔帖（Peltier）控温，升降温速率最高可达15℃/s和10℃/s。如大家所熟知，要提高PCR反应速度，仅提高PCR仪的升降温速度是不够的，因为在每个PCR循环中的变性、退火、延伸温度上的停留时间是决定PCR总耗时的另一个主要因素。专利性的自适应技术（Self-Adapting Container Technology，SAC）实现90%以上的热能利用率，能使常规的30s—30s—60s的PCR程序缩短为2s-2s-10s甚至更短，最快15min即可完成一个常规PCR实验。同时由于样品温度在非常短的时间内能达到设定温度，大大缩短退火时间，因此高速PCR带来的另一个好处是可有效防止引物错配，提高扩增产物特异性。  SpeedCycler2有两大类共四种热反应模块供用户选择，配置非常灵活，并都能实现高速PCR。两大类不同的热反应模块，与之相对应适用两种不同的PCR反应耗材。一种模块叫低缘紧凑型快速模块（Low-Profile-Rapid，LPR，见图2），其特点是样品槽浅、孔径小、孔间距小、孔容积小，可以视为标准PCR模块的缩小版，配套的耗材也是低缘紧凑型的超薄壁PCR板。之所以设计这样的独特模块，一方面是为了实现在能量一定的前提下，通过降低单管样品量和减少样品管覆盖面来提高能量的利用率，进而实现温度的快速变化，另一方面，低缘紧凑型模块是高速PCR专利性的核心技术之一自适应技术（Self-Adapting Container Technology，SAC）实现的前提。样品管高度低，管内空气受热膨胀进而施加到管壁上的压力大，而LP耗材管壁本身又超薄又富有弹性，这样就可以在PCR反应过程中使样品管壁紧密贴合在样品槽壁上，进而大大提高热传递效率，加快样品热量的交换传递，体现出高速的升降温速率变化和短暂的温度停留时间。            图2. 96孔LPR模块                  图3. 96孔SPR模块   SpeedCycler2另一种热反应模块为标准型快速模块（Standard-Profile-Rapid，SPR，见图3）。标准型，即其模块构型和普通PCR仪是一样的，所使用的耗材也是通用型的PCR管或板。那么，为何用普通的PCR反应槽和耗材也能实现高速PCR呢？除了采用热传导性非常好的镀金纯银槽、温度变化快速的帕尔贴控温部件外，耶拿公司采用了另一种实现高速PCR的核心技术，即软件自控技术（Software Adaption Controlling, SAC），通过软件调节帕尔贴的加热功率来实现用较厚管壁的PCR耗材也同样能完成高速PCR。  图4比较形象地解释了软件自控技术的原理，正如用薄壁锅和厚壁锅烧开水，在同样量的水、同样的火力加热条件下，薄壁锅把水烧开所需要的时间少于厚壁锅，因为热量传递更快，但如果我们加大厚壁锅的火力，在更短的时间内把水烧开也是完全有可能的。所以当采用比较厚壁的PCR耗材在SpeedCycler2进行PCR反应时，我们只需通过软件来调控仪器的加热和制冷功率，同样保证了样品温度与模块温度的一致性，因而能在30min内完成30个循环，从而实现高速的PCR实验。                                   图4.借用不同锅烧开水的示意图来解释软件自控技术原理  SpeedCycler2除了通过快速的升降温和高效的热传递来实现高速PCR外，还有众多的优点来提高扩增产物的质量，提升用户的体验。  比如非常有用的SPS样品保护技术，仪器启动运行后，首先是热盖快速升温，样品槽温度维持在室温不变，直到热盖升温到设定温度比如110℃后模块才开始升温，这样可以保持样品上部的温度一直比下部的高，样品就不会有蒸发，即使5µL的反应体系也能得到很好的扩增效果。  比如可以设置温度和时间随着每个循环的进行而增减，像进行Touchdown PCR实验，逐步降低退火温度来提高扩增产物的特异性，还可以使每个循环中的延伸时间不断增加，以弥补DNA聚合酶活力的降低，提高扩增效率。再比如具有断电自动重启功能，一旦在PCR运行过程中断电，仪器会自动记录运行状态，再次通电后PCR反应会从断电前的最后一个循环的变性步骤开始继续进行，这样可以减少非特异性扩增产物。  SpeedCycler2有96孔、48孔、36孔等多种通量的模块供用户选择，配的5.7英寸彩色触摸操控器HID-Pro 320，基于Window CE的操作系统，界面简洁清晰，操作方便，运行情况一目了然，具有USB、RS 232、LAN等多种接口，便于数据的传输存储，同时SpeedCycler2还可以直接连接电脑使用，方便程序和结果的管理。2.SpeedCycler2高速PCR应用  在半个小时之内完成PCR反应，对很多PCR实验者来说是一件不可思议的事情，他们在接触高速PCR技术时的第一反应通常是“这么快，扩增效果怎么样？”，下面就举几个用SpeedCycler2来进行高速PCR的实验例子，看看高速PCR在快速的同时还能保证非常好的扩增效率。   图5. 1kb lambda DNA用SpeedCycler2扩增，总共用时24min。Marker分别为1500/850/400/200/50bp。  图5实验中扩增1kb的lambda DNA，模板量0.1ng，采用耶拿公司普通的innuTaq DNA聚合酶，20µL的反应体系，PCR仪为耶拿公司的高速PCR仪SpeedCycler2，PCR程序为预变性95℃120s，95℃2s，58℃2s，72℃10s，30个循环，最后72℃60s，设置的仪器升降温速率分别为12℃/s和8℃/s，完成整个PCR过程只需要24min，其产物的琼脂糖凝胶电泳结果见图5。  我们再来看一个扩增小片段的例子，可以进一步地缩短PCR时间。目的基因分别为210bp和536bp的人类β-球蛋白基因片段，模板量1.2ng，采用耶拿公司的innuTaq HOT A DNA聚合酶，20µL的反应体系，PCR仪为耶拿公司的高速PCR仪SpeedCycler2，PCR程序为预变性96℃30s，96℃0s，56℃0s，30个循环，最后72℃30s，仪器升降温速率分别为12℃/s和8℃/s，最终完成整个PCR过程仅需要14min，其产物的琼脂糖凝胶电泳结果见图6。     图6. 210bp和536bp的DNA用高速PCR扩增，总共用时14min。Marker分别为1500/850/400/200/50bp   高速PCR的省时优势在扩增长片段方面发挥得更为明显。图7是一个扩增长片段的PCR对比实验，采用普通PCR技术和高速PCR技术分别扩增一个24kb的人类基因组片段，由于仪器的热传递性能不同，所以采用的PCR扩增程序也有所不同，普通PCR程序为预变性94℃180s，94℃15s，65℃30s，68℃23min，30个循环，最后68℃180s，完成整个PCR程序用了8h 22min，而高速PCR程序为预变性94℃180s，94℃15s，65℃30s，68℃10min，30个循环，最后68℃60s，完成整个PCR程序只用了4h 59min，比普通PCR节省了约42%的时间即3h 30min，相当于半个工作日，这无疑是速度上巨大的提高，能大大提高PCR使用者的工作效率。                                     Marker   高速PCR   普通PCR                                              4h59min   8h22min                          图7. 高速PCR和普通PCR在扩增24kb长片段的对比   微卫星（microsatellite analysis）即短串联重复序列(short tandem repeat，STR)由于在人类基因组中具有广泛性、高度保守性、高度多态性等特点，被广泛用于分类学研究、物种的系统发育、造血干细胞移植以及亲子鉴等方面，而高速PCR技术因其扩增特异性好、反应速度快在STR的多重PCR检测中发挥了优势作用。Promega PowerPlex 16 system kit是一个通过3色荧光标记来检测16个基因座（15个STR位点和1个性别位点）的多重PCR试剂盒，系统内的基因座包括，Penta E，D18S51，D21S11，TH01，D3S1358，FGA，TPOX，D8S1179，vWA，Amelogenin，PentaD，CSF1PO，D16S539，D7S820，D13S317和D5S818。在这些位点中，Penta E，D18S51，D21S11，TH01和D3S1358的特异引物采用荧光素（FL）标记；FGA，TPOX，D8S1179，vWA和Amelogenin的特异引物使用TMR标记；Penta D，CSF1POD16S539，D7S820，D13S317和D5S818的特异引物使用JOE标记。全部的16个位点在同一PCR管中在高速PCR仪SpeedCycler2上同时进行扩增，然后通过测序分析。PCR扩增程序为：第一步95℃11min，96℃1min，第二步94℃30s，60℃30s，70℃45s，循环10次，第三步90℃30s，60℃30s，70℃45s，循环22次，第四步60℃30min，总时间约2h，图8显示的是16个基因座PCR后的检测结果，可以看出16重的PCR扩增效果和特异性都非常好。 图8. 16重STR 高速PCR的测序结果 荧光素标记的基因座 JOE标记的基因座 TMR标记的基因座 3.结束语 SpeedCycler2高速PCR仪凭借快速、高特异性扩增、灵活的配置、精湛的工艺等特点，一经推出迅速吸引了众多生命科学工作者的眼球，在全球跨入高铁时代的时候，SpeedCycler2也将引领PCR技术进入高速PCR时代。

高速PCR技术 赵晓光  薛燕 （国家生物医学分析中心  北京  100850） 摘要 PCR技术是现代分子生物学最基础的技术之一，在实现扩增效果的同时如何缩短PCR的实验时间成为实验工作者亟待解决的问题。本文从高速PCR的概念入手，阐述了实现高速PCR 仪器技术的原理、优势，及可能的应用。指出了高速PCR技术的核心在于，不仅要提高PCR仪器的升降温速率，更重要的是提高PCR样品温度与金属样品槽的一致性，从而达到缩短变性，退火，延伸等停留时间的目的，进而大大的缩短PCR时间。同时也指出，高速PCR对提高反应特异性带来的好处等。 关键词  PCR；高速PCR；自适配技术；产物特异性 中图分类号TH77                                       Rapid PCR Technology Zhao Xiaoguang,Xue Yan (National Center of Biomedical Analysis,Beijing,100850) AbstractPCR technology has been one of the basic and key technologies of Modern Molecular Biology. How to shorten PCR time is a question badly needed to be solved on the premise of PCR amplification effect. In the paper we describe the concept, principle, advantage and application of rapidPCR technology which can highly increase the PCR speed. As addressed in the paper, the Key of rapid PCR is not only to increase the heating and cooling rate of PCR machine, more important, it relays on reducing the temperature difference between the PCR module and sample solution, so that the holding time of denaturation, annealing, elongation  could be shorten, and the whole PCR time could  be shorten dramatically. While, rapid PCR could also lead to another benefit to improving the specificity of PCR. Key words  PCR；rapid PCR；Self-Adapting-Container technology；product specificity   1.PCR仪的温度控制   PCR(Polymerase chain reaction：聚合酶链反应)即是在体外模拟体内DNA复制的过程，用一对寡聚DNA作为引物，通过加温变性－退火－DNA合成这一周期的多次循环，使目的DNA片段得到扩增[1]。PCR反应通常在热循环仪（DNA扩增仪、PCR仪）中的小型反应管，以10-200 微升的反应量进行。热循环仪对反应管进行加热和冷却，达到每个反应步骤所需的温度。一个常规PCR扩增温度循环：94℃变性保持1分钟；55℃退火保持2分钟；72℃延伸保持2分钟，一个循环持续5分钟。热循环仪的变温方式和性能是PCR技术的核心与关键，直接决定PCR的效率和DNA产物的质量与数量。自1985年Mullis等人发明PCR技术以来，出现多种变温方式的PCR仪[2,3]，哪一种变温方式也难十全十美，目前主要有两种变温方式的PCR仪，一种是AB、伯乐、耶拿、Eppendorf、Biometra等公司的PCR仪所采用的半导体制冷器（peltier：帕尔帖）的PCR仪；另一种是以罗氏和corbett等公司采用专利的离心空气浴PCR仪(由于数量较少，本文暂不讨论)。温度控制的主要参数包括；温度的准确性、均匀性和升降温速度。   采用半导体制冷器[4]的PCR仪利用半导体制冷器既可以加热又可以制冷的特点，经过导热介质金属样品槽，控制PCR样品管的温度。主要特点：金属样品槽（银或铝）热传递速率快、易于自动化（没有机械部件）、体积小、控温简单、稳定可靠、环境影响小。主要缺点是金属样品槽的均匀性不好，大部分产品的温度均匀性只能控制在±0.3℃左右。近几年这类产品的一个主要突破就是升降温速度的提高，这也是许多厂家喜欢大力宣传的指标，主要原因是关键部件半导体制冷器升降温速度的技术突破，表1是目前几种主要PCR仪的温度指标。其中尤以耶拿SpeedCycler2 PCR仪最为突出，升温速率高达15℃/sec，降温速率10℃/sec，在8-15分钟内即可完成标准的30个PCR循环，创建了高速PCR的业界新标准 。当然高速PCR不仅仅是节约时间，同时也具有应用意义！   表1. 几款常规PCR仪的主要温度参数   品牌 Analytik Jena ABI Biorad Eppendorf Biometra 型号 SpeedCycler² Veriti 96 Well Fast C1000 Mastercycler pro s Tprofessional 升温速率 最大15℃/s 5 °C/sec 5℃/s 6 °C/sec 最大6℃/s 降温速率 最大10℃/s 4.25 °C/sec 5℃/s 4.5 °C/sec 最大4.5℃/s 样品槽材质 银质镀金 合金 铝质 蜂巢式 银质 纯银镀金 加热元件 高速Peltier Peltier Peltier Peltier，三组回路技术 Peltier 温度控制范围 4 °C- 105 °C 4-99.9℃ 0-100℃ 4-99℃ 3-99℃ 控温准确性 ≤±0.2℃ ±0.25℃ ±0.2℃ ±0.2℃ ±0.1℃ 控温均匀性 ≤±0.3℃at 72℃ ±0.4℃   2.高速PCR的标准与意义   高速PCR[5]这一概念最早是由在PCR和定量PCR技术领域享有盛誉的快速PCR先驱者、美国犹他大学的Carl Wittwer教授在二十世纪九十年代提出的，他认为在30分钟内完成30个循环的PCR扩增实验，才可称之为高速PCR。现在该定义已经被业界广泛认可接受，成为衡量是否为高速PCR的标准。   众所周知，目前常规PCR仪运行一个完整的PCR实验大约需要1～3小时，一天下来只能做3～4次PCR实验，这对于样品量大或使用者多的实验室来说，安排实验工作就非常不方便，严重影响工作效率。而高速PCR可在8-30分钟内即可完成一个常规PCR实验，大大缩短了PCR实验的时间，别小看这节约下来的几十分钟，一天下来就可以多运行好几轮了。而且缩短PCR反应时间，对医院、生产线产品质量控制、现场检测和应急处理等对时间敏感的场合，更有实用意义。   除了反应速度快外，高速PCR的另一个突出优点是可以提高PCR产物的特异性。影响PCR产物特异性的因素有很多，其中引物和模板的正确配对是最为关键的，而这又与引物的退火温度和时间密切相关。在退火温度一定的条件下，退火时间越短，越有利于提高准确配对的引物-模板的比例，进而提高扩增产物的特异性。由于高速PCR技术能使样品温度在非常短的时间内达到设定温度，所以可以大大缩短退火时间，进而扩增出高特异性的PCR产物。 3.高速PCR仪的原理与关键技术   为什么普通PCR仪的PCR反应需要1～3个小时呢？比如扩增1kb片段的目的基因，常规的PCR程序为：95℃ 预变性2min，95℃ 变性30s，58℃ 退火30s，72℃延伸1min，30个循环后再充分延伸2min。即使不考虑升降温变化所需的时间，单纯计算PCR三个步骤所需的时间，一次循环需2min，30个循环也需要60min。有个问题可能有些人没有想过，为什么变性－退火－延伸的步骤必须停留那么长的时间？缩短一点行不行？主要原因是热量从仪器传递到样品要通过半导体制冷器→传热介质金属样品槽→样品管→样品几个环节，而每个环节的热传递效率都会影响样品的实际温度变化，一般情况下样品的温度变化与加热模块相比会有时间上的滞后。当金属样品槽达到了设定温度时，样品实际温度还远远没有达到设定温度。图1为普通PCR仪金属样品槽温度和样品实际温度之间的差别，从中可以清晰地看出这一现象，当样品槽温度达到设定的50℃时，样品的实际温度还在65℃左右，而15s后，两者的温度还有1.5℃的差别。所以进行常规的PCR时，各步骤的停留时间必须足够的长，以使样品的温度达到设定的温度。                              图1 普通PCR仪样品槽温度和样品实际温度之间的差别     所以要实现高速PCR反应，就必须解决两个关键问题，提高PCR仪的变温速率和热传导效率。这要取决于基础器件、材料、技术和方法的突破与创新。仪器方面，最主要的是高速大功率半导体制冷器的技术突破，因为他是PCR仪温度控制的源动力和高速PCR的根本。金属样品槽采用导热性好的银材质，由于银的热传导速率两倍于铝，银槽PCR仪的升降温速度及温度均匀性明显优胜于铝槽，银槽再镀金以避免银被氧化，可以最大幅度地提高银槽的导热效率。选择薄壁PCR管和减少反应体系，也可显著提高PCR管内样品的温度响应时间。在追求PCR速度越来越快的同时，反应体系越来越少也是一大发展趋势，这不仅可以节省样品和试剂用量，还可以加快样品的温度变化，和水壶里的水越少越容易烧开是一个道理。以前PCR反应体系通常为50µL，后来改进为25或20µL，现在已经有一些产品的反应体系能降低至5-10µL，这也是实现高速PCR的一个前提条件。   金属样品槽导热虽然好，但是与反应管，很难做到无缝接触，影响样品槽和样品间的热传递效率。各厂商生产的PCR仪金属样品槽和PCR管也多少有些不同。这也是为什么有些厂家会推荐使用者使用某种特定品牌的样品管的原因。针对这个问题，耶拿公司推出专利的自适配容器技术（SAC：Self-Adapting-Container）。基本思路是让样品管形状适应样品槽的形状，随样品槽的形状而变化。技术关键是采用聚丙烯材料制成管壁仅50µm极薄且富有弹性的PCR管，在PCR加热过程中，管内空气受热膨胀而对管壁施加压力，管壁就会像皮肤一样紧密贴合在样品槽上，实现无缝接触，如图2所示，使热量能快速穿过极薄的管壁传递到样品上，使样品温度和样品槽温度几乎同步变化，如图3所示，从而可大大缩短PCR循环各步骤的停留时间，把先前的几十秒缩短到几秒，进而实现高速PCR。可能处于专利的考虑，这种PCR管只能在耶拿自己独有的一种低缘紧凑型的银质镀金样品槽上使用，由于这种样品槽的深度仅有5mm，减少了银质镀金样品槽的质量，因而进一步提高了银质镀金样品槽与半导体制冷器之间的温度响应速度。比如说上述的常规PCR程序，如果改用SAC高速PCR技术，可实现变性2s，退火2s，延伸10s，升降温变化速率大于10℃/s，30个循环可以在25min甚至更短的时间内轻松完成。                          PCR反应前                               PCR反应期间                 图2  PCR开始后，自适配样品管壁会紧密贴合在样品槽壁上，实现能量的快速传递                          图3  高速PCR过程中，样品温度与加热模块温度几乎保持同步   在此，大家可能会产生一个疑问，高速PCR是否要使用特殊的高速PCR聚合酶？将延伸时间或退火停留时间缩短，是否可保证聚合？众所周知，延伸时间是受扩增产物的长度决定的，大家形成的常规概念是按1kb/min来设定。但实际上，普通Taq酶的扩增效率大约为35-100bp/s，扩增1kb仅需要10s-30s。 因此，如果产物长度在300bp，而且采用热平衡时间很短的高速PCR仪，10s的延伸时间就已足够。问题是常规PCR中，要保证样品温度要在延伸温度下停留10秒，须将模块温度停留30秒以上才能实现，而高速PCR由于保证了样品温度和金属样品槽温度的一致性，因此，将模块温度停留10秒即可。另外，近年来一些公司推出了一些快速的Taq 酶，例如，Bio-rad公司的Ssofast酶, Takara的TaKaRa Z-Taq酶等，这些酶的扩增速度比普通Taq酶快5-10倍，使用这些酶，使用高速PCR仪时，延伸时间可以进一步缩短。 4.结束语   PCR技术在生命科学研究领域是一个非常基础又非常重要的技术，随着各种应用需求越来越多，人们对能拥有一台速度快、样品量小、产物特异性好、试剂无特殊要求、操作简便的PCR仪的要求也越来越强烈，高速PCR技术将在不断地改进创新中成为PCR发展的一个必然趋势。 参考文献 [１]黄培堂，俞炜源,  PCR 技术原理和应用. 北京: 中国科学技术出版社, 1990：1- 9 [２]张文超.聚合酶链反应（PCR）技术与基因扩增分析仪器（PCR 仪）.生命科学仪器，2005 第3 卷第3 期 [３]章春笋，徐进良.时域式PCR生物芯片中温度动力学研究进展.现代科学仪器，2005（03）：13-17 [４]王南林，吴太虎.半导体制冷与医疗仪器. 医疗卫生装备,2002，6：２８－３０ [５]Wittwer，C.T.et al., in Mullis, K.et al.,(Eds.). The polymerase chain reaction. Birkhauser, Boston(1994)：174-181 [6]高惠兰，方福德.聚合酶链反应技术.现代科学仪器，1993（01）07-10       收稿日期：2011-08-22 作者简介：赵晓光，男，主要研究方向：分析仪器

德国耶拿分析仪器股份公司(Analytik Jena AG)最新研发出EHEC现场快速检测试剂盒 　　前不久在德国出现的由肠出血性大肠杆菌(EHEC)感染造成的死亡和严重的疾病爆发，并由此疫情带来的巨大的经济损失，这些都清楚地告诉我们能够快速诊断病原微生物对于及时诊断治疗、控制疫情是多么地重要。 　　由于EHEC疫情的持续时效性，德国耶拿公司在现有产品的基础上，利用几周的时间就研发出了该致病菌的现场快速诊断系统，该系统可以有针对性地识别此次疫情的主要病原菌EHEC O104菌株的特定分子，比如当前流行的高致病性EHEC O104:H4，以便于对EHEC进行初筛预检。 　　“当有信息表明此次的EHEC疫情比最初的预测要严重得多的时候，我们加快了研发的步伐”，德国耶拿公司的CEO Klaus Berka先生说，“鉴于当前的EHEC疫情的流行程度，能否尽快知道哪些食物是被污染过的这个问题变得非常重要，这也很有助于寻找确定真正的传染源。” 　　这项现场快速检测技术，基于耶拿公司创新性的快速扩增杂交技术(RAH technology)。整个反应在一个特殊的反应器中进行，测试结果可通过肉眼观察试纸条条带来轻松获得，无需昂贵复杂的检测设备。最为重要的是，该检测项目不仅可在任何分子生物学诊断实验室进行，还可在事发现场进行，这得归功于耶拿公司独特的检测系统MobiLab。MobiLab将核酸抽提、目的基因扩增、目的基因检测等功能集于一身，系统小巧，便于携带，操作简便，可用电池供电，这些都使得在室外完成分子诊断实验成为可能。　　      　   阳性         阴性 　　相关的产品： 　　现场快速检测系统MobiLab 　　   　　检测快速：从样品采集到检测出结果，只需1h; 　　操作简便： 无需移液器，无需特殊培训，简明的操作说明，阴阳性结果一目了然; 　　现场检测：桌子上、车上、野外都可以快速检测; 　　结实耐用. 结实的外壳、安全的构造。 　　rapidSTRIPE E.coli O104 检测试剂盒 　　   　　详情欢迎联系耶拿公司咨询： 　　德国耶拿分析仪器股份公司 　　中国总部： 　　地址：北京市东城区朝阳门北大街8号富华大厦A座503室 　　电话：010-65543849 65543879 　　传真：010-65543265 邮编：100027 　　售后服务热线：400 602 1766 　　E-Mail：info@analytik-jena.com.cn 　　中文网址：www.analytik-jena.com.cn 　　上海办事处 　　地址：上海市钦州北路1122号91号楼10层B座[200233] 　　电话：021-54261977 54261978 　　传真：021-54261976 邮编：200233 　　成都办事处 　　地址：成都市顺城大街206号四川国际大厦19楼D座 　　电话：028-86520070 86520090 　　传真：028-86520266 邮编：610015 　　广州办事处 　　地址：广州市天河区珠江新城海安路19号东田大厦804室 　　电话：020-38392865 38392864 　　传真：020-38103232 邮编：510627