一、固相萃取概念及基本原理： 固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是从八十年代中期开始发展起来的 一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。主要通过固 相填料对样品组分的选择性吸咐及解吸过程，实现对样品的分离，纯化和富集。 主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度。 固相萃取的基本原理和方法： SPE 技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进 行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似 的看作一种简单的色谱过程。 固相萃取(SPE)是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用 的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲 去杂质，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。 也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再 使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。

摘要：通过恒温水浸泡，干燥后利用二甲基亚砜(DMSO)作溶剂，六甲基二硅胺烷(TMDS)和三甲基氯硅 烷(TMCS)作硅烷化试剂，将单糖衍生化为三甲基硅醚衍生物，以肌醇为内标物，用sE-30毛细管色谱柱， 测定了苦丁茶中单糖核糖的组成及含量。同时对比了二甲基酰胺及吡啶的溶解能力和N，O·双三甲基硅烷基乙酰基 (BSA)的衍生化效果。方法的相对标准偏差小于8．0％，测得的苦丁茶中核糖含量为0．035％： 关键词：昔丁茶；可溶性单糖；硅烷衍生化；气相色谱；内标法

摘要：通过恒温水浸泡，干燥后利用二甲基亚砜(DMSO)作溶剂，六甲基二硅胺烷(TMDS)和三甲基氯硅 烷(TMCS)作硅烷化试剂，将单糖衍生化为三甲基硅醚衍生物，以肌醇为内标物，用sE-30毛细管色谱柱， 测定了苦丁茶中单糖果糖的组成及含量。同时对比了二甲基酰胺及吡啶的溶解能力和N，O·双三甲基硅烷基乙酰基 (BSA)的衍生化效果。方法的相对标准偏差小于8．0％，测得的苦丁茶中果糖含量为0．440％： 关键词：昔丁茶；可溶性单糖；硅烷衍生化；气相色谱；内标法

摘要：通过恒温水浸泡，干燥后利用二甲基亚砜(DMSO)作溶剂，六甲基二硅胺烷(TMDS)和三甲基氯硅 烷(TMCS)作硅烷化试剂，将单糖衍生化为三甲基硅醚衍生物，以肌醇为内标物，用sE-30毛细管色谱柱， 测定了苦丁茶中单糖葡萄糖的组成及含量。同时对比了二甲基酰胺及吡啶的溶解能力和N，O·双三甲基硅烷基乙酰基 (BSA)的衍生化效果。方法的相对标准偏差小于8．0％，测得的苦丁茶中葡萄糖含量为0．355％： 关键词：昔丁茶；可溶性单糖；硅烷衍生化；气相色谱；内标法

摘要：通过恒温水浸泡，干燥后利用二甲基亚砜(DMSO)作溶剂，六甲基二硅胺烷(TMDS)和三甲基氯硅 烷(TMCS)作硅烷化试剂，将单糖衍生化为三甲基硅醚衍生物，以肌醇为内标物，用sE-30毛细管色谱柱， 测定了苦丁茶中单糖半乳糖的组成及含量。同时对比了二甲基酰胺及吡啶的溶解能力和N，O·双三甲基硅烷基乙酰基 (BSA)的衍生化效果。方法的相对标准偏差小于8．0％，测得的苦丁茶中半乳糖含量为4．000％： 关键词：昔丁茶；可溶性单糖；硅烷衍生化；气相色谱；内标法

无花果含片由无花果、土牛膝、金银花、牡丹皮等八味药 材组成的复方制剂，具有清热解毒，清肿利咽的功效。主药 成份复杂，定量困难。绿原酸是金银花抑菌作用的有效成份 已有公认，在本品制备过程中金银花是与君药无花果等其它 药材同法提取的，测定其有效成份具有代表性。文献报道绿 原酸的含量测定方法有紫外分光光度法［$］、薄层扫描法［!］、 高效液相色谱法［%］等。本文采用&’() 测定无花果含片中绿 原酸的含量，取得了满意的效果。

本方法规定了用HPLC与GC-MS测定三聚氰胺的方法。 本方法适用于乳与乳制品中三聚氰胺含量的测定。 本方法三聚氰胺的最低检出限为1.0mg/kg。

摘要：高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。 1、色谱图（chromatogram）--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号－时间曲线，又称色谱流出曲线（elutionprofile）。 2、基线（baseline）--流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。 3、噪音（noise）――基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。 4、漂移（drift）基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。 5、色谱峰（peak）--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种：前延峰（leadingpeak）和脱尾峰（tailingpeak）.前者少见。 6、拖尾因子（tailingfactor，T）--T=B/A，用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子（symmetryfactor）或不对称因子（asymmetryfactor）《中国药典》规定T应为0.95～1.05。T1.05为拖尾峰。 7、峰底――基线上峰的起点至终点的距离。 8、峰高（Peakheight，h）――峰的最高点至峰底的距离。 9、峰宽（peakwidth，W）--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。 10、半峰宽（peakwidthathalf-height，Wh/2）--峰高一半处的峰宽。Wh/2＝2.355σ。 11、标准偏差（standarddeviation，σ）--正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。 12、峰面积（peakarea，A）――峰与峰底所包围的面积。A=×σ×h＝2.507σh=1.064Wh/2h。 文章链接：北京开源国创科技有限公司 http://www.keyyer.com/

从大肠杆茵中提取质粒DNA的方法很多，其中的碱性别方法提取质粒是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性存在差异而予以分离的。在强碱性条件下，染色体洲A和质粒DNA均变性（双链解开）。由于质粒DNA是共价闭合环状超螺旋结构，变性后两条互补链不会完全分开。当溶液pH调节到中性时．质粒DNA容易复性并溶解在溶液中，而染色体DNA不容易复性，互相继绕．在利用台式高速离心机进行离心时极易和蛋白质—3Ds复合物等一起沉淀下来。转移出上演液，再用乙醇沉淀出其中的质粒DNA。具体操作步骤如下： （1）接种一单菌落于100ml LB液体培养基中，加入50μl的氨芐青霉素，37℃振荡培养8—10h，使培养达到饱和状态。 （2）取1.5ml培养液利用台式高速离心机离心20s，沉淀用100μl GTE悬浮并于室温放置5min。 （3）加入200μl NaOH/SDS溶液，混匀，于冰上放置5min。 （4）加入150μl KAc溶液，在MixMax旋涡混合器上振荡2s，于冰上放置5min。 （5）离心3min，然后吸取0.4ml上清液移入干净的微量离心管中，加入0.8ml无水乙醇，室温静置2min。 （6）室温下通过台式高速离心机进行离心3min，（使用台式高速离心机时一定要注意转速、时间控制以及操作规范）用lml 70％的乙醇洗涤沉淀，然后真空于燥。 （7）沉淀用30μl dd HO溶解，-20℃保存。 文章链接：开源国创仪器网 http://www.keyyer.com/

摘要：氯甲烷 （methyl chloride，choromethane，CH3Cl），又名甲基氯，为无色易液化的气体，加压液化贮存于钢瓶中。具乙醚气味和甜味。 建立了海水中CH3Cl和CH3Br的吹扫捕集气相色谱分析方法，确定了最佳实验条件:吹扫时间12min、吹扫气流速50mL/min、吹扫温度40℃、干燥剂Mg（ClO4）2、液氮捕集、沸水解吸2min。本方法对CH3Cl和CH3Br的检出限分别为2.7和0.3pmol/L，相对标准偏差分别1.9%和7.1%，回收率分别为89%～97%和75%～85%。对海水样品保存方法的可靠性和准确性进行了现场研究，结果表明:在24h内样品浓度没有明显变化，在现场调查过程中，一般6h内可测定完毕，因此本方法可以得到准确结果。同时应用本方法对胶州湾表层海水样品中的CH3Cl和CH3Br进行了测定，其浓度范围分别为130～346pmol/L和3.90～20.7pmol/L，和文献报道的其它沿岸水体中的浓度一致，表明本方法能够满足海水中CH3Cl和CH3Br浓度测定的要求。 文章链接：开源仪器网 http://www.keyyer.com/

电子天平作为实验室常用的力学衡器，我们经常会对他的误差分析进行处里，那么我们如何计算天平的误差呢？ 　　误差计算分两种情况： ⑴ 当e=d时，示值误差计算公式应为E=I－L+（1?2）d－△L（d：电子天平实际标尺分度值，AL：在天平称盘上为示值凑整而添加的载荷） ⑵ e≠d时，示值误差计算公式应为E=I－L（E：天平示值误差，I：天平指示值，L天平称盘上所加载荷）； 以上不管哪种情况，要求所得各载荷点的误差均小于规程中所规定的允许误差。 电子天平在检定中需要注意的问题：如何选取标准砝码？选取的标准砝码可以是级砝码，也可以是等砝码，但它的误差（对于级砝码为质量允差，对于等砝码为检定精度）不得大于被检天平在该载荷下的最大允许误差的1?3。其次，标准砝码的量程能够覆盖到电子天平的最大称量范围。 二、电子天平的免检问题：⑴当d≤1mg的电子天平，可以免检该天平的鉴别力；⑵当e≠d的电子天平，可免检该天平的鉴别力；⑶对于具有数字指示和自动或半自动校准装置的天平，可以免检该天平的灵敏度。 三、电子天平重复性检定：电子天平重复性检定应在空载和加载状态下进行，加载的载荷有两种：一是全载，二是半载。要求检定中分别对加载和空载的平衡位置进行读数并记录，同时注意每加一次载荷均应返零一次。要求对同一载荷多次衡量结果之间的差值，不得超过天平在该载荷时的最大允许误差的绝对值。 四、电子天平配衡功能的检查：对于新购置的电子天平应检查其配衡功能，一般选取两个载荷点，即：（1?3）Max，（2?3）Max。在相同载荷下所得两结果之间的差值，不得超过该载荷时的最大允许误差的绝对值。 五、电子天平偏载检定（四角误差检定）：对于标准天平，试验载荷等于天平的最大称量，其四角误差等于最大示值减最小示值。对于工作用天平，试验载荷等于天平最大载荷的三分之一，其四角误差等于各点的示值与中心点的示值之差中的最大者。 六、出具检定证书应规范化：电子天平检定完毕后，应根据实际检定结果出具检定证书或检定结果通知书。

恒温恒湿试验箱如果操作保养不当或者购买到质量不合格的厂家，最容易出现问题地方有，压缩机损坏，制冷剂泄漏，制冷系统堵塞和温湿度控制器出现异常，下面由武汉华威仪器就恒温恒湿试验箱温湿度控制器异常的几种现象分析其原因并作出解决方法： 温度、湿度不稳定出现异常（波动值很大） 1.原因及解决方法：PID未调试好，自动演算或手动调试PID参数 控制器不显示或动作异常 原因及解决方法： 1.检查TEMI880控制器或TEMI300控制器损坏，更换即可 2.主线路保险丝烧毁，用万用表检查线路，更换保险丝 3.急停开关，电源开关未按接通或损坏，用万用表检查线路确认，如果损坏更换即可 湿度总显示100%RH 原因及解决方法： 1.纱布槽纱布未挂上或纱布长时间吸水性变差，挂上纱布或清洗更换纱布即可 2.纱布槽缺水，检查水路系统是否堵塞，水泵是否损坏

1、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。 2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子 问：从那些方面可以简单判别毛细管柱子的热稳定性好坏? 答：1、分配容量(或容量因子)K，好的柱子在高温运行后，分配容量K不应有明显的下降，否则，说明柱子的热稳定性不好。 2、理论塔板数n，热稳定性好的柱子经受高温后，理论塔板数应基本保持恒定 3、柱子的极性。热稳定性好的柱子，高温前后极性变化不大，具体表现为保留指数I值没有大的变化。 4、噪声。热稳定性好的柱子在高温下使用后，噪声不能增加. 5、柱子的去活层，毛细管柱子涂固定液前内部一般要用去活性试剂去活以增加惰性。质量好的毛细管柱子高温后，去活层不应该变化，表现在对强极性样品或酸碱性样品的吸附性不能增加。 问：为什么进样器内的玻璃衬套会对色谱行为造成影响? 答：进样器内的玻璃衬套主要有下列作用： 1、提供一个温度均匀的汽化室，防止局部过热。 2、玻璃的惰性不如不锈钢好，减少了在汽化期间样品分解的可能性。 3、易于拆换清洗 ，以保持清洁的汽化室表面，一些痕量非挥发性组分会逐渐积累残存于汽化室，高温下会慢慢分解，使基流增加，噪声增大，通过清洗玻璃衬套可以消除这种影响。 4、可根据需要选择管壁厚度及内径适宜的玻璃衬套，以改变汽化室的体积，而不用更换整个进样加热块。从以上几个方面可以知道玻璃衬套对色谱行为造成影响的原因。问：毛细管色谱分流进样时，非线性分流的主要原因是什么? 答：1、进样器温度太低，样品汽化不完全，发生分级分流。 2、进样器温度太高，某些组分可能发生热分解，也有的样品可能发生催化分解，或样品部分地被吸附在进样器内表面上。 3、在分流点以前样品没有混合均匀或混合不充分。 4、系统的进样垫，柱接头等地方漏气。 问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 答：1、样品量不足：解决办法为增加样品量 2、样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 3、样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器 4、检测器衰减太多：调整衰减即可。 5、检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数 6、检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗。 7、检测池中有气泡：解决办法为排气。 8、记录仪测压范围不当：调整电压范围即可。 9、流动相流量不合适：调整流速即可。 10、检测器与记录仪超出校正曲线：解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。 问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决? 答：原因可能有： 1、泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理； 2、比例阀失效，更换比例阀即可。 3、泵密封垫损坏，更换密封垫即可。 4、溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法； 5、系统检漏，找出漏点，密封即可。 6、梯度洗脱，这时压力波动是正常的。 问：做PGS／MS分析时，如何防止焦油状污染物进入毛细柱? 答：聚合物，尤其是一些含氮、硫及卤素的高分子裂解时，常有焦油状物质产生。为防止这种焦油状物质进入毛细柱造成污染而使柱性能下降，可采用保护预柱，即在裂解器与毛细柱之间接一填充预柱，通过控制预柱温度而使焦油状物质滞留在预柱内，预注可置于GC气化室内，这样既容易控制温度，又减少系统的死体积，当然，预柱填料需经常更换。 问：我最近更换了另一种牌号的ODS柱，虽然分离情况仍可以，但保留时间不能重现，为什么? 答：这是因为被分析物可能具有形成氢健的能力。尽管过去几年来，填料的制造技术有了极大的提高，但不同的厂商的ODS填料表面硅醇基的浓度不同。正是这些硅醇基可能与样品发生相互作用。因此，同一被分析物中的各组分在不同牌号的ODS柱上的相对保留时间就可能不同。在流动相中加入少量竞争物，如三乙基胺(TEA)，将会使硅醇基的成键能力饱和，从而保证不同牌号柱子上的相对保留时间具有较好的重现性。 问：我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么? 答：柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。

仪器仪表能改善、扩展或补充人的官能。人们用感觉器官去视、听、尝、摸外部事物，而显微镜、望远镜、声级计、酸度计、高温计等仪器仪表，可以改善和扩展人的这些官能；另外，有些仪器仪表如磁强计、射线计数计等可感受和测量到人的感觉器官所不能感受到的物理量；还有些仪器仪表可以超过人的能力去记录、计算和计数，如高速照相机、计算机等。 仪器仪表接地规定：1.仪表接地系统分为保护接地和工作接地两种。接地对于抑制干扰信号、保证测量精度、保护人身及设备安全、保证高产稳产具有十分重要的作用。 2.保护接地与装置电气系统接地网相连，一般接地电阻≤4Ω。 3.工作接地包括信号回路接地、屏蔽接地和本安系统接地。其中信号回路接地和屏蔽接地与仪表系统接地网相连接，接地电阻符合制造厂标准；独立设置本安接地系统时，单独的本安接地极与装置电气系统的接地网或其他接地网之间的距离≥5.0m，接地电阻≤1Ω或符合制造厂标准。4.电缆屏蔽层应在控制室一端接地，接到仪表设备的接地汇流排上，信号屏蔽层在整个电缆连接中应保持连续。 5.接地线采用多股铜芯绞线，采用压接法连接。 6.接地线的绝缘护套颜色宜为黄绿相间色，两端应有标牌表明接地类型如：本安。

烟草在生长发育过程中需要吸收大量的矿物质元素来维持正常的生命活动，其中钙和镁对烟草来说需求量最大，对烟草产品和品质的影响明显，这些称为大量元素。其中钙是烟草细胞壁的组成成分，如果含量过高，会造成烟片过厚、粗糙、使用价值低。镁是叶绿素的重要组成成分，直接参与光和作用，因此，准确地测定烟叶中的钙和镁含量，对于烟叶培育中的施肥、改良以及产品的质量控制都有非常重要的作用。 瑞士万通的EDTA容量法同时测定钙镁含量是目前烟草行业应用较多的分析方案之一。其参考的标准是YC/T314-2009卷烟纸中碳酸钙的测定电位滴定法。

化学需氧量(COD)是评价水体污染的重要指标之一。COD测定的主要方法有高锰酸盐指数法(GB11892 - 89)和重铬酸钾氧化法(GTB11914 -89) 。高锰酸盐指数法适用于饮用水、水源水和地面水的测定。重铬酸钾氧化法(CODCr )适用于工业废水、生活污水的测定,但此法要消耗昂贵的硫酸银和毒性大的硫酸汞,造成严重的二次污染,且加热消解时间长、耗能大,缺点十分明显,已不适应我国环境保护发展的需求。为此,人们从不同方面进行了改进。

这份溶剂极性表列出了常用有机溶剂极性顺序，并有常见溶剂的粘度、沸点、吸收波长等物理参数，在进行薄层色谱柱（TLC）洗脱的时候时很有帮助。可能有不准确的，希望在留言处给予更正。

水产品，进口肉中土霉素，四环素，金霉素检测方法，详细方法请下载word温度，如有任何疑问，欢迎来电咨询，固相萃取产品专业生产商北京卓信伟业科技有限公司提供技术支持。

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1 .开启问题-开启后完全无显示 序号故障原因排除 1显示屏不亮•天平未正常接通电源 •熔断丝损坏检查未接通原因，重新接通 可调换一根，如再损坏，就必须送检修单位 2称量显示不稳定(数据跳动)•工作台不稳定 •有气流 •称盘未放好或有物体触及选择安放坚固、稳定的工作台 检查防风门是否关闭 放好称盘，拿去称盘边上的触及物体。 3去皮(清零) 不显示零•工作台不稳固，去皮(清零)操 作用力太大选择坚固工作台，去皮操作用力不要过大。 4称量结果不正确•空称时天平不在零位 •天平未经校准或使用的校准砝码不准空称时按去皮键(清零)。 用正确的校准砝码重新校准。

一、峰丢失 可能的原因 可采用的排除方法 1.注射器有毛病 1用新注射器验证。 2.未接入检测器，或检测器不起作用 2.检查设定值 3.进样温度太低 3.检查温度，并根据需要调整 4.柱箱温度太低 4.检查温度，并根据需要调整 5.无载气流 5.检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速 6.柱断裂 6.如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端，是可以补救 的，切去柱断裂部分，重新安装 二、前沿峰 可能的原因 可采用的排除方法 1.柱超载 1.减少进样量 2.两个化合物共洗脱 2.提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10~20度，以 使峰分开 3.样品冷凝 3.检查进样口和柱温，如有必要可升温 4.样品分解 4.采用失活化进样器衬管或调低进样器温度 三、拖尾峰 可能的原因 可采用的排除方法 1.进样器衬套或柱吸附活性样品 1.更换衬套。如不能解决问题，就将柱进气端去掉1~2 圈，再重新安装 2.柱或进样器温度太低 2.升温(不要超过柱最高温度)。进样器温度应比样品 最高沸点高25 度 3.两个化合物共洗脱 3.提高灵敏度，减少进样量，使温度降低10~20度，以 使峰分开 4.柱损坏 4.更换柱 5.柱污染 5.从柱进口端去掉1~2圈，再重新安装 四、只有溶剂峰 可能的原因 可采用的排除方法 1.注射器有毛病 1用新注射器验证。 2.不正确的载气流速(太低) 2.检查流速，如有必要，调整之 3.样品太稀 3.注入已知样品以得出良好结果。如果结果很好，就提 高灵敏度或加大注入量。 4.柱箱温度过高 4.检查温度，并根据需要调整 5.柱不能从溶剂峰中解析出组分 5.将柱更换成较厚涂层或不同极性 6.载气泄漏 6.检查泄漏处(用肥皂水) 7.样品被柱或进样器衬套吸附 7.更换衬套。如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2 圈，并重新安装 五、宽溶剂峰 可能的原因 可采用的排除方法 1.由于柱安装不当，在进样口产生死体积 1.重新安装柱。 2.进样技术差(进样太慢) 2.采用快速平稳进样技术。 3.进样器温度太低 3.提高进样器温度。 4.样品溶剂与检测相互影响(二氯甲烷/ECD) 4.更换样品溶剂。 5.柱内残留样品溶剂 5.更换样品溶剂 6.隔垫清洗不当 6.调整或清洗 7.分流比不正确(分流排气流速不足) 7.调整流速 六、假峰 可能的原因 可采用的排除方法 1.柱吸附样品，随后解吸 1.更换衬管，如不能解决问题，就从柱进样口端去掉1~2 圈，再重新安装。 2.注射器污染 2.用新注射器及干净的溶剂试一试，如假峰消失，就将 注射器冲洗几次。 3.样品量太大 3.减少进样量。 4.进样技术差(进样太慢) 4.采用快速平稳的进样技术 七、过去工作良好的柱出现未分辨峰 可能的原因 可采用的排除方法 1.柱温不对 1.检查并调整温度 2.不正确的载气流速 2.检查并调整流速。 3.样品进样量太大 3.减少样品进样量 4.进样技术水平太差(进样太慢) 4.采用快速平稳进样技术。 5.柱和衬套污染 5.更换衬套。如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2 圈，并重新安装 八、基线不规则或不稳定 可能的原因 可采用的排除方法 1.柱流失或污染 1.更换衬套。如不能解决问题，就从柱进口端去掉1~2 圈，并重新安装。 2.检测器或进样器污染 2.清洗检测器和进样器 3.载气泄漏 3.更换隔垫，检查柱泄漏。 4.载气控制不协调 4.检查载所源压力是否充足。如压力≤500psi，请更换气 瓶。 5.载气有杂质或气路污染 5.更换气瓶，使用载气净化装置清洁金属管。 6.载气流速不在仪器最大/最小限定范围之内 (包括FID用氢气和空气) 6.测量流速，并根据使用手册技术指标，予以验证。 7.检测器出毛病 7.参照仪器使用手册进行检查。 8.进样器隔垫流失 8.老化或更换隔垫

有机溶剂能降低溶液的电解常数，从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力，导致溶解度的降低；另外，有机溶剂与水的作用，能破坏蛋白质的水化膜，故蛋白质在一定浓度的有机溶剂中的溶解度差异而分离的方法，称“有机溶剂分段沉淀法”，它常用于蛋白质或酶的提纯。使用的有机溶剂多为乙醇和丙酮。 高浓度有机溶剂易引起蛋白质变性失活，操作必须在低温下进行，并在加入有机溶剂时注意搅拌均匀以避免局部浓度过大。由此法析出的沉淀一般比盐析容易过滤或离心沉降，分离后的蛋白质沉淀，应立即用水或缓冲液溶解，以降低有机溶剂浓度。 操作时的pH值大多数控制在待沉淀蛋白质的等电点附近，有机溶剂在中性盐存在时能增加蛋白质的溶解度，减少变性，提高分离的效果，在有机溶剂中添加中性盐的浓度为0.05mol/L左右，中性盐过多不仅耗费有机溶剂，可能导致沉淀不好。 沉淀的条件一经确定，就必须严格控制，才能得到可重复的结果。有机溶剂浓度通常以有机溶剂和水容积比或用百分浓度表示。有机溶剂沉淀蛋白质分辨力比盐析法好，溶剂易除去；缺点是易使酶和具有活性的蛋白质变性。故操作时要求条件比盐析严格。对于某些敏感的酶和蛋白质，使用有机溶剂沉淀尤其要小心。

Hamilton进样针清洗液可确保进样针的清洁与干净，定期清洗进样针延长进样针的使用寿命，优质的Hamilton进样针清洗液加上详细的清洗步骤的描述可以轻松简便地维护好您手中的Hamilton进样针。 钨丝可解决进样针的阻塞问题。 北京卓信伟业科技有限公司为瑞士Hamilton华北区授权代理商，为您提供最专业的进样针选型指南，更多详情请访问：www.bjzx17.com，销售热线：010-82938685，技术服务热线：13401021128，E-mail：sale@bjzx17.com

色谱柱是高效液相色谱的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透性，延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质，造成流体阻力加大所致。浅析其原因，大致有以下几方面： 1、流动相的前处理 杂质堵塞色谱柱进口滤片，导致压力升高。这往往是由于流动相没有过滤，或虽已过滤但过滤不彻底，使固体杂质滞留于滤板上所造成的。 2、样品的沉淀 当溶解样品的溶剂与流动相不一致时，样品进入色谱柱，有时可能因溶解度降低而沉淀出来，造成压力升高。 3、晶体的析出 使用含有缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中，它们会因在新流动相中的溶解度降低而析出，造成流体阻力加大、压力升高。 4、细菌或霉菌孳生 霉菌在流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长堵塞滤板，导致压力升高。所以在使用磷酸盐缓冲液时一般要现配现用。 5、溶质吸附 当溶质在柱子上有较强的吸附，且所用的流动相难以将它们洗脱时，累积的未洗脱溶质也会造成阻力增大和压力升高。 6、流动相更换过度较快 当改变流动相体系时，不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中，也会造成压力升高。 7、压力脉冲 运行过程中，有时会产生系统内压力的突然升降。如此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的崩坏和柱床结构的微小变化，填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大，造成压力升高。

液质，气质联用检测三聚氰胺 1、超高效液相色谱2电喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺 饲料样品经1%三氯乙酸2二甲基亚砜提取,Wa te rs O as is MCX柱净化,超高效液相色谱分离,最终采用电喷雾串联四极杆质谱进行检测。结果表明,三聚氰胺在饲料中的含量范围为10～5 000μg / kg时,线性关系良好( r >0199) 。在10～100μg / kg 的添加水平范围内的平均回收率为83%～94%,相对标准偏差为412%～615%。该方法的检出限为10μg / kg。 2、高效液相色谱- 四极杆质谱联用测定饲料中三聚氰胺含量 试验采用自动固相萃取装置, 建立合适的过柱程序; 运用Agilent HP1100 高效液相色谱- 四极杆质谱联用仪, 优化质谱条件, 建立饲料中三聚氰胺残留检测方法。方法的线性范围为0.010～0.500 μg/ml, 相对标准偏差在3.2%～7.7%之间,回收率在72.4%～91.2%之间, 具有较好的准确度和精密度。 3、液相色谱串联质谱法(LC - MS/MS)分析宠物食品中三聚氰胺 建立了液相色谱- 串联质谱(LC - MS/MS)用于宠物食品中三聚氰胺检测的方法, 并将其与美 国食品药品监督管理局(US FDA)公布的气相色谱- 质谱(GC - MS)和液相色谱(LC)方法进行了对比,结果发现LC - MS/MS的方法, 前处理过程简单, 是一种高灵敏度、高选择性的分析方法。 4、液相色谱2串联质谱法测定饲料中三聚氰胺残留 应用液相色谱2串联质谱法测定饲料中三聚氰胺残留。试样用V (乙腈) ∶V (H2O) = 1∶1溶液,提取,高速离心后,供液相色谱2串联质谱仪定性定量分析。流动相为V (乙腈) ∶V (H2O) = 80∶20混合溶液。采用电喷雾离子源, 定性离子对为127. 2 /85. 2 和127. 2 /68. 2; 定量离子对为127. 2 /85. 2。在添加了0. 5 ～10. 0 mg/kg的三聚氰胺标准品时的回收率为92. 6%～103. 2%;相对标准偏差(RSD)在0. 8% ～2. 0%;检出限为0. 2 mg/kg。 5、固相萃取一液相色谱一串联质谱法检测食品中的三聚氰胺 样品经均质，1％三氯乙酸溶液提取，用OASIS MCX固相萃取小柱净化，减压浓缩后以甲醇溶解定容，用Waters BEH—C。柱分离，乙腈和水为流动相，经液相色谱一串联质谱法检测。三聚氰胺线性范围为0．1—10．0mg／kg，相关系数r为0．9999，平均回收率为71％ ～95％ ，相对标准偏差为4．56％ 一9．82％(n=6)，方法的检出限为0．5 mg／kg。 Spectra-Quad在线分析三聚氰胺含量 三聚氰胺含量的实验室检测方法存在检测结果受蛋白质分子中氮含量影响较大的问题，这种相似性会导致三聚氰胺的检测异常困难。赛默飞世尔科技(上海)有限公司提供的Spectra-Quad在线成分分析仪可以实现三聚氰胺含量的在线实时连续检测，并能较好的解决检测结果受蛋白质含量影响的问题。 Spectra-Quad采用近红外线吸收检测技术，是一种无接触、无损伤和无危害的检测方法。传感器利用特定波长的近红外线照射样品，并对反射光线进行分析，且Spectra-Quad所用光线亮度非常低，不会加热或损伤样品。对于三聚氰胺来说，其含量越高所反射出的光线就越少。实际检测中，检测人员可以将Spectra-Quad传感器固定到任何现有的传送装置上，通过使用粉末取样仪，实现对气动传输产品中三聚氰胺含量的连续检测，检测数据可以输出到某个工艺控制系统或PC机控制器内，从而确保产品免受三聚氰胺的污染。 HPLC检测三聚氰胺 1、反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量[点击右键下载PDF] 2、高效液相色谱- 二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺[点击右键下载PDF] 建立用高效液相色谱- 二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺的检测方法。对不同样品采用不同的前处理方法,然后用Agilent TC2C18 4. 6 ×250 mm色谱柱,柱温为40 ℃,流动相为0. 02 mol/L硫酸铵∶甲醇= 94 ∶6 (V ∶V) ,流速0. 8 mL /min,二极管阵列检测器于235 nm 波长下进行检测,并以保留时间和三维光谱图相似性系数进行定性,外标法定量。不同样品的加标回收率为98. 8% ～101. 5% ,RSD小于1. 2%。方法线性范围为0. 1～150μg/mL,检测限为0. 01μg/mL,相关系数R = 0. 999 9。

酶联免疫吸附测定法定量测定三聚氰胺残留。利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行免疫测定。先将三聚氰胺酶标记物，样品萃取物及标准加入到已经包被有三聚氰胺抗体的微孔中开始反应。在30分钟的孵育过程中，样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体，孵育30分钟后洗掉小孔中所有没有结合的三聚氰胺及三聚氰胺酶标记物。再用去离子水清洗结束后，每孔中加入清澈的底物溶液，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育30分钟后停止此反应，根据各孔颜色深浅进行数据读取。依据标准的颜色得出样品中三聚氰胺的的浓度值。 需要准备的材料： 1、蒸馏水或去离子水 2、可吸取50ul和100ul的移液器及吸头 3、4000转离心机 4、吸水纸或相当的吸水材料 5、450nm的酶标仪 6、计时器 7、20mM PBS：需自行配制 8、清洗液：需自行配制 试剂配制： 1、20mM PBS： 0.62g NaH2PO4•2H2O+5.73g Na2HPO4•12H2O+9g NaCl，蒸馏水定容至1000ml 2、清 洗 液： 0.62g NaH2PO4•2H2O+5.73g Na2HPO4•12H2O+9g NaCl，蒸馏水定容至1000ml.+0.5ml 土温20 样品的前处理： 肉类(稀释倍数：5) 1、 称1g肉样，加入5ml的10%甲醇/20Mmpbs，震荡2min； 2、 4000转离心5min； 3、 取2ml 上清液加入2ml异辛烷：氯仿(2：3)，混匀； v4、 4000转离心5min，取上层150ul测定。[/b] 测定过程： 1、将所有试剂及样品回升至室温20-28℃，但不要放置超过24小时； 2、从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条固定在微孔板架上，未使用的孔条与干燥剂一同放入密封袋中保存； 3、吸取150ul标准品、样品到对应微孔中，必须保证每种溶液使用干净的吸头吸取，避免交叉污染。加入 50ul三聚氰胺酶标记物到每个小孔中； 4、轻轻摇板60秒，20-28摄氏度下孵育30分钟； 5、将微孔中的溶液倒入水槽中，用清洗液完全充满微孔，震荡后倒掉，重复三次，总共四次洗板； 6、最后一次清洗完后，倒掉孔中溶液，然后翻转微孔板在吸水纸上拍干； 7、每个微孔中加入100ul底物溶液； 8、20-28摄氏度下，孵育30分钟； 9、每个微孔中加入100ul停止液； 10、450nm下读板。

(一)准备和安装 　　清洗好过滤器，干燥，放入一张孔径0.22μm的微孔滤膜，用布包装好，15磅20 min进行高压灭菌处理。在超净台内打开过滤器架好，胶管一端接入滤泵再插入待除菌的液体中，出口端胶管深入到已消毒好的瓶子中。用泵过滤，过滤后要检查滤膜是否完好无损。 (二)合成培养基的配制 　　1、根据细胞目录中的说明，按下表选择合适品牌及货号的培养基干粉，用适量超纯水充分溶解。 　　2、 按要求添加碳酸氢钠、谷氨酸钠、HEPES等，充分搅拌使之溶解。 　　3、 调 pH至7.2左右。 　　4、 加水至最终体积。 　　5、 在超净台中对溶液进行滤过除菌，分装入250 mL或500 mL玻璃瓶中，用翻帽塞塞紧瓶口。 　　6、 瓶口封好，4℃冰箱贮存。 (三)小牛血清的处理 　　市场上出售的小牛血清一般做了灭菌处理，但在使用前还应做热灭活处理，即通过加热的方法破坏补体(近来也有观点认为热灭活处理是不必要的)。胎牛血清不必灭活。 　　1、 将血清加热至56℃并保持30 min，其间要不时轻轻晃动，使受热均匀，防止沉淀析出。 　　2、 处理后的血清贮存于4℃。 　　3、 小牛血清在使用前最好进行筛选以掌握血清的质量。 (四)生长培养基的配制 　　除无血清培养之外，各种合成培养基在使用前需加入一定量的小牛血清或胎牛血清和抗菌素。 1. 培养基分装成小瓶(100～200 mL)以便使用，翻帽塞塞紧瓶口。 2. 按如下比例配制： 基本培养基占80％~90％，小牛血清或胎牛血清占10％~20％。按1％体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素)，使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U／mL和100μ／mL，。 (五)冻存细胞的复苏 1. 应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。 2. 在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。 (六)传代: 1. 贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。 2. 悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。 (七)冻存 　　将贴壁细胞消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1～2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。 (八)注意事项 1. 玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上; 2. 无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净，紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上; 3. 培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内，用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天，肉眼见无浑浊或沉淀等异物。分装后置4度保存; 4. 消化液(pH7.8)或其它加入液，应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌，分装成支置-20度保存; 5. 培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上，如有高温灭菌的应按程序来菌)。至少每月一次。 6. 进入操作时应注意先清洗双手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作时注意无菌台内空间层次。手及物品不要在暴露的瓶口上方来往，如果数量较多，培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作，瓶与瓶之间应相隔一定的距离，开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧，打开后应用灯先烧口，然后烧盖。用完后同样操作。整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点。

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。 颗粒 颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它，这会导致回压增大。颗粒还会表现为另一种固相，可能改变样品的组分。 有机物 超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。 离子 离子浓度的改变会影响分离结果，部分能吸收UV的离子会对峰产生影响。某些有腐蚀性离子的还会降低高压输液泵等配件的使用寿命。 胶体 胶体会不可逆的吸附在固定相上面，影响柱的分离效果。 微生物 微生物会堵塞色谱柱，其代谢产物会增加有机物，颗粒等污染物。 瓶装纯净水和蒸馏水是目前部分HPLC分析中使用的纯净水，由于瓶装纯净水和蒸馏水均只是普通纯水而不是超纯水，水中仍含有少量离子和有机物等杂质，用以配制液相和洗脱液不仅可能污堵昂贵的色谱柱，也影响HPLC定出平坦的基线。 瓶装纯净水的纯化工艺，通常包括吸附、过滤、反渗透等，对颗粒性有机物的去除效果较好，但对微量离子及有机物的去除却不能满足高灵敏度的HPLC实验之需求，并且，由于其包装通常多为PVC瓶，透氧率高，同时存在一定的化学溶出量，从而污染瓶中的纯净水，尤其是保存一段时间后，水质下降更多，因此表现在HPLC色谱图上，虽无特定吸收峰，但基线存在较严重的不稳干扰。 蒸馏水是指用蒸馏方法制备的纯水。可分一次和多次蒸馏水。水经过一次蒸馏，不挥发的组分残留在容器中被除去，挥发的组分进入蒸馏水的初始馏分中，通常只收集馏分的中间部分，约占60％，要得到更纯的水，可在一次蒸馏水中加入碱性高锰酸钾溶液，除去有机物和二氧化碳；加入非挥发性的酸（硫酸或磷酸），使氨成为不挥发的铵盐。通过对双蒸水进行HPLC检测时发现，254nm和214nm在22-27分钟时都出现较强的吸收峰，这表明有疏水性较强的有机物污染，其原因应是蒸馏过程的共沸现象导致了某些挥发性有机物去除不彻底。 超纯水系统综合了反渗透、离子交换、活性炭吸附、膜过滤、超滤及紫外光氧化等多种纯化工艺，产水电导率达到18.2MΩ•cm, 产水水质超过国标一级水标准且稳定可测，超纯水即取即用，不会因储存引入污染，水质有保证，较之使用瓶装纯净水或蒸馏水，更能满足用户高精度仪器分析的需要。

【摘要】目的建立三越麻黄颗粒中甘草酸的反相高效液相色谱(RPHPLC)含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法测定三越麻黄颗粒中甘草酸含量，KromasilODS1C18色谱柱（5μm，4.6mm×250mm），流动相为乙腈0.05M磷酸二氢钾（用三乙胺调pH5.75）（26.5∶73.5），检测波长为250，柱温为40℃，流速为1.0ml/min。结果三越麻黄颗粒颗粒中甘草酸的线性范围为3.75～154.5μg/ml(r＝0.9998)，加样回收率100.2%，RSD=2.5%。结论采用RP-HPLC法测定甘草酸具有简便、准确、重复性好的优点，可为三越麻黄颗粒的质量控制提供一定的依据。 　　【关键词】高效液相色谱法甘草酸三越麻黄颗粒 　　三越麻黄颗粒由10味药材(麻黄、石膏、苦杏仁、板蓝根、甘草、陈皮、柴胡、射干、鱼腥草、浙贝母)精制而成。方中甘草为使药。甘草酸是甘草药材中的主要指标成分之一，拟定该成分的含量测定标准可以反映和控制本品的内在质量。建立了HPLC法测定本品中甘草酸的含量，以期达到能够准确定量的目的。

无花果含片由无花果、土牛膝、金银花、牡丹皮等八味药 材组成的复方制剂，具有清热解毒，清肿利咽的功效。主药 成份复杂，定量困难。绿原酸是金银花抑菌作用的有效成份 已有公认，在本品制备过程中金银花是与君药无花果等其它 药材同法提取的，测定其有效成份具有代表性。文献报道绿 原酸的含量测定方法有紫外分光光度法［$］、薄层扫描法［!］、 高效液相色谱法［%］等。本文采用&’() 测定无花果含片中绿 原酸的含量，取得了满意的效果。