Coriolis生物气溶胶采样器结合分子生物学方法评估家禽养殖场内真菌污染

奕枫仪器

2019/04/04 16:38

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Accessing indoor fungal contamination using conventional and molecular methods in Portuguese poultries

C. Viegas & J. Malta-Vacas & R.Sabino & S. Viegas & C. Veríssimo

背景

流行病学研究表明，长期暴露于高浓度的条件致病真菌及其代谢产物中，能够引发家禽饲养人员出现呼吸道症状和肺功能衰退等健康问题。本研究对家禽饲养场的黄曲霉（Aspergillus flavus）和烟曲霉（Aspergillus fumigatus）的产毒菌株进行了职业暴露评价。

材料与方法

本研究在7个葡萄牙家禽养殖场进行采样，分别采用平板培养法和分子生物学方法对样品进行检测分析[1]。常规平板培养法使用撞击式Millipore空气采样器，对空气、物体表面以及褥草分别进行采样。分子生物学分析方法使用气旋型Coriolis μ采样器对家禽饲养场的生物气溶胶进行采样，再提取样品的DNA，然后使用检测黄曲霉产毒菌株与烟曲霉菌株的特定引物和探针对样品的DNA进行real-time PCR分析。

结果

常规平板培养法的结果显示，黄曲霉（Aspergillus flavus）和烟曲霉（Aspergillus fumigatus）在不同地点具有不同的阳性率：在空气中，阳性率为74.5% 和1.0%；在物体表面，阳性率为24.0% 和16.0%；在新的褥草中，阳性率为0% 和32.6%；在使用过的褥草中，阳性率为9.9%和15.9%。常规平板培养法检测结果为阴性的场所，通过分子生物学方法却能够检测出黄曲霉产毒菌株。常规培养法仅在1个室内空气样品中检测出烟曲霉。然而，分子生物学方法却在3个家禽饲养厂的7份室内空气样品中检测出烟曲霉。

结论

在7个家禽养殖场，采用常规培养法和分子生物学方法可以检测出黄曲霉和烟曲霉污染。研究结果显示，在真菌职业暴露评估中，常规培养法和分子生物学方法是互补性检测方法。

[1] Viegas C, Malta-Vacas J, Sabino R, Viegas S, Verissimo C. Accessing indoor fungal contamination using conventional and molecular methods in Portuguese poultries. Environmental monitoring and assessment. 2014;186:1951-9.