饮料品中食用合成色素液相色谱检测方法
2015-01-12 15:37
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资料摘要:
近年来,饮料品安全问题越来越引起人们的关注,尽管诸多大型品牌饮料制品生产商均有被曝出卫生安全问题,但各大商店超市售卖的饮料仍品种类繁多,色彩各异,不禁让人担心其鲜亮颜色背后隐藏的有机合成色素添加问题。
食用色素对人体有危害,主要是由于食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化工产品为原料,经过磺化、硝化、偶氮化等一系列有机反应而成,有些色素长期低剂量摄入,也存在致畸、致癌的可能性。尽管相关法律已明令禁止人工合成使用色素的使用,但仍有不法分子在利欲驱使下,突破允许使用品种、范围和数量,滥用、重剂量使用色素,使消费者的健康受到食品安全问题的威胁。
鉴于食用合成色素的不安全性,国家也加强了对合成色素的监管,制订了食品添加剂使用标准(GB 2760-2011),另外对合成色素的检测也非常重要,国家标准食品中合成着色剂的测定标准(GB/T 5009.35-2003)中规定了对新红、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红、亮蓝、靛蓝这8中合成色素的检测方法,主要是高效液相色谱仪检测饮料品中食用合成色素。
检测仪器:高效液相色谱仪(配备输液泵,CO-1000柱温箱,紫外检测器,N2000色谱工作站)、氮吹仪、溶剂过滤器、固相萃取仪
标准溶液:合成色素标准使用液用日落黄、柠檬黄等1.00mg/mL标准溶液,加水稀释20倍,经0.45μm滤膜过滤,配成50.0μg/mL的合成色素标准使用液。
固相萃取柱净化:SPE小柱:Cleanert PWAX(150mg/6mL)Cleanert PA聚酰胺柱(1g/6mL)取以上两种固相萃取柱及上述提取液至固相萃取仪中,完成SPE净化过程:6mL甲醇,6mL水(pH值6~7);加样10mL;6mL水(pH=4)、6mL甲醇-甲酸(6:4)、6mL水(pH值6~7)淋洗;通入空气吹干小柱5min,6mL 2%氨化甲醇洗脱并接收,收集液于50℃氮吹仪下吹干,用1mL水定容,过0.45μm水系滤器过滤,待测。
样品制备:称取10g样品放入100mL烧杯中,含二氧化碳的样品加热去除二氧化碳;称取20.0g样品溶液放入分液漏斗中,加2mL盐酸、10mL三正辛胺正丁醇溶液(5%),振摇提取合成色素,重复提取至无色,约3~4次。合并提取的合成色素,用饱和硫酸钠溶液10mL洗2次.将提取的合成色素转移至另一分液漏斗中,加50mL正己烷混匀,加氨水提取3次,每次5mL,合并氨水层,加乙酸调成中性,水浴加热蒸发至近干,加水定溶至5mL。0.45μm过滤,取10μL进高效液相色谱仪。
色谱条件:
色谱柱:C18(4.6mm×250mm,10μm);
流动相:甲醇;
梯度洗脱:甲醇︰20%~35% 3min;35%~98% 9min;98% 6min.
紫外检测器:254nm
流速:1ml/min.
进样量:10μL。
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