产品说明
GP-3000基因导入仪由仪器主机、基因导入杯及专用连接线等组成。主要是利用电转化来将DNA转入感受态细胞、动植物细胞、酵母细胞中。与其它方法相比,基因导入仪法具有高重复性,高效率、操作简易、可定量控制等优点,同时,电转没有基因毒性,已经成为不可缺少的分子生物学基本技术。
工作原理
细胞电转染(电转),也叫细胞电穿孔 (electroporation),是把外源大分子物质DNA、RNA、siRNA、蛋白质等以及一些小分子导入细胞膜内部的重要方法。
在瞬间强大电场的作用下,溶液中细胞的细胞膜具有了一定的通透性,带电的外源物质以类似电泳的方式进入细胞膜。由于细胞膜磷脂双分子层的电阻很大,细胞外部电流场产生的细胞两极电压都被细胞膜承受,细胞质内分到的电压可以忽略不计,细胞质内部几乎没有电流,因此也决定了正常范围内的电转过程中细胞毒性很小。电场使DNA等物质进入细胞膜后只能停止在细胞膜附近,随后细胞本身的机制可以允许这些物质到细胞核等处。
由于电转技术依靠的是物理方法,细胞表面的分子特性对电转影响比较小。相比化学转染方法和病毒载体转染方法,电转可以用在所有的细胞种类上,而且容易定量控制。
细胞电转电场图
1 细胞膜近似绝缘体,细胞附近电转液中电流扭曲。 2 在串联电路中电阻越大分到电压越大,细胞两端电压基本都落在两端细胞膜上。 3 只有一个细胞端面电转有效。 4 细胞质内分到电压很小,DNA电转进入细胞膜后马上停止,后续靠细胞本身机制慢速扩散。 5 细胞核两端电压及其微小,微小的电压又落在核膜上,核内部完全没有电压,电转没有基因毒性。 | ![](https://img1.17img.cn/17img/images/202404/uepic/f858f444-6055-4a3a-9d3f-0f7863538cd6.jpg)
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应用领域
• 细菌、酵母及其他微生物的电转化 | • 导入药物、蛋白、抗体等分子对细胞的结构和功能进行研究 | • 细胞杂交、融合基因导入 |
• 导入标记基因起到标记、指示的作用 | • 哺乳动物细胞的转染、植物组织和原生质体的转染 |
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产品特点
![](https://img1.17img.cn/17img/images/202404/uepic/9f7e9b9c-721f-4e7a-82d2-7f8d3fbfa6fb.jpg)
• 效率高 转化时间短、转化率高、重复性优异 | • 智能储存:可存储实验参数,方便用户调取 |
• 控制精准 采用微处理器控制的脉冲放电 | • 外形美观 整机一体化设计,显示直观,操作简单 |
实验举例![](https://img1.17img.cn/17img/images/202404/uepic/25d5f167-256e-45d0-9791-68c9bf35b1b3.jpg)
1、LI J等人基于高通量筛选分析p53–MDM2蛋白相互作用的小分子抑制剂的研究结果。[1]
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| 2、ZHANG S Y等人发现和鉴定一个独特的G蛋白偶联受体119激动剂的研究结果。[2] |
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1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
不同菌种的转化率
![](https://img1.17img.cn/17img/images/202404/uepic/5630ab5e-b9a2-4239-99db-98083b895aac.jpg)
备注:因各单位实验条件不尽相同,以上实验参数仅供参考
具体参数详情请参考新芝生物官网www.scienz.com