赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测

德国赫施曼

2024/07/15 09:58

阅读：3

我国鸭养殖数量位居世界首位，近年来鸭的疫病日益增多，生产和使用的鸭源生物制品种类越来越多。外源病毒检验是病毒类活疫苗质量控制项目之一，对保证产品质量至关重要。

根据GB/T 41698-2022，鸭源生物制品外源病毒的检测有：鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒Ⅰ型、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、番鸭小鹅瘟病毒的鸭源生物制品外源病毒检测。以下简述鸭瘟病毒的检测方法：

1.加样与孵育：取抗原包被板，分别将阴性对照血清、鸭瘟病毒阳性对照血清和稀释好的待检血清加入到抗原包被板孔中，各2孔，100μL/孔。轻轻振匀孔中样品，用封板膜密封包被板，置37℃孵育1h。

2.洗涤：去除封板膜，弃去孔中液体，用Miragen电动移液器每孔加入300μL洗涤液，作用3min，弃去洗涤液，重复洗涤3次。可用洗板机或手动洗涤。

3.与鸭瘟病毒单克隆抗体作用：用Miragen电动移液器每孔加入鸭瘟病毒单克隆抗体100μL，用封板膜密封包被板，置37 ℃孵育1h。

4.洗涤：按2中方法洗涤。

5.与酶标抗体作用：用Miragen电动移液器每孔加入羊抗鼠酶标抗体100μL，用封板膜密封包被板，置37℃孵育1h。

6.洗涤：按2中方法洗涤。

7.显色：用Miragen电动移液器每孔中加入TMB底物溶液100μL，轻摇2s，20℃~25 ℃下避光显色10 min。

8.终止：用Miragen电动移液器每孔加入终止液50μL，置酶标仪在OD450nm 波长下测定各孔OD值。

9.试验成立条件，当阴性血清对照孔平均OD450nm值大于或等于0.8，且阳性对照孔的阳断率(PD)大于或等于50%，判定检测结果有效。

以上实验涉及多次小体积液体移取，实验室移取小体积（几微升到10毫升）的液体，一般采用移液器。Miragen电动移液器，数值靠设定或选定，电机控制活塞运动，吸液和排液也更加稳定，还有步骤少、调数快、模式多等诸多优势。Miragen电动移液器可给电机多段信号，从而达到吸液和排液分多次且各体积独立可调。比如上面的标准溶液的移取，就可设置单吸多排（如吸200uL，排2次，每次100uL），程序可存储和调用，非常便捷。