饲料中维生素B2的液相色谱(HPLC)检测方案

饲料中维生素B2的液相色谱(HPLC)检测方案

维生素B2又叫做核黄素，为异咯嗪衍生物，桔黄色，易被碱、光及金属元素破坏。核黄素是许多氧化还原酶的重要组成部分，参与能量和蛋白质代谢。动物缺乏核黄引起体代谢紊乱。其症状：轻则表现为生长受阻，生产力下降，严重者，猪发生皮炎，形成痂皮及脓肿，眼结膜、角膜炎；母畜缺乏则出现早产，胚胎死亡及胎儿畸形；雏鸡的典型症状为足跟关节肿胀，趾内向弯曲成拳状，急性缺乏症能使腿部完全麻痹、瘫痪；种鸡缺乏时，种蛋孵化率低，雏鸡成活率低。

参考国标（GB/T 14701-2002），利用全新高性能的LC-2010高效液相色谱仪，经实践检测可提供饲料中维生素B2的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素B2的测定。

高效液相色谱法对饲料中维生素B2的详细检测方法

二，试样溶液的制备

称取维生素预混合饲料0.25g-0.5g，于100ml棕色容量瓶中，加入三分之二的提取液于80-100℃水浴中煮沸30min，待冷却后加入14ml甲醇，用提取液定容至刻度，混匀，过滤。维生素预混合饲料样液需有提取液进一步5倍-10倍，取部分过滤液过0.45µm滤膜过滤，高效液相色谱仪分析。

三，色谱条件

　　色谱柱： C18   150mm×4.6mm×5μm；

　　流速：1.0mL/min；

　　温度：室温；

　　进样量：20μL；

　　检测波长：单检维生素B2为267nm，多种维生素联检为280nm。

　　流动相：在已装入700ml去离子水的1000ml容量瓶中，加入50mgEDTA、1.1g庚烷磺酸钠，待全溶解后，加入25ml冰乙酸、5ml三乙胺，用去离子水定容至刻度摇匀。用冰乙酸、三乙胺调解pH至3.4±0.02，过0.45µm滤膜，取该溶液860ml与140ml甲醇混合，超声脱气，待用。