上海比朗仪器有限公司研发生产的BILON品牌分子杂交仪,采用智能型数字温度控制器,可作分子杂交,也可作酶联反应的孵育器。与酶免结合可建立全定量或半定量PCR检测方法。在病毒、细菌疾病的基因诊断的临床检测中具有良好的应用效果。国内用户数量已超过千家,被清华大学,中科院,华南理工大学, 武汉大学,华中科技大学,湖南大学,四川大学,通用电气,香港科技大学等国内知名高校企业采用。
首先比朗小编带大家认识下什么是DNA分子杂交技术?
给你做个比喻,希望对你理解有帮助。将宿主DNA(一般做克隆是有很多宿主DNA)比喻成很多还没装锁的“门”,而你希望插入宿主DNA上(或替换掉一段序列)的目的基因比做是一把特定的“锁”,而这个基因探针就是能开那把锁唯一的“钥匙”。如果你能用“钥匙”打开某个“门”,说明“锁”已经装上了。也就是说如果能检测到杂交信号,说明目的基因已经接到宿主DNA上了。
杂交的原理其实就是碱基互补配对。 至于怎么看出来是否杂交上,这个是要在探针上做标记(标记可以有很多种,生物的、荧光的、放射性的等等),杂交后是要洗脱的,只有这种特异性的杂交才被保留下来,再通过检测探针上的标记来看出是否杂交上。比如上面的“钥匙”,就像你用一串的“钥匙”去试,但你可以先在要的那个“钥匙”上做个标记,你不要认识“钥匙”的齿(这里的齿你可以想像成探针的序列),只要认识“钥匙”上的标记就行。
(这个比喻有点漏洞,就是原始的那些“门”不管用不用钥匙都不能打开,但我暂时没想到其它比方)
什么是DNA分子杂交原理?
DNA分子杂交:DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记。如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分,就能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高,即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出。
DNA分子杂交的意义:
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的DNA分子之间杂交时,只有少量的人DNA单链和小鼠DNA单链能形成杂交分子,而且只是部分碱基配对。但是,人与鼠之间的DNA 杂交分子的形成,比人与酵母之间DNA杂交分子的形成要容易。在生物进化过程中,DNA中的碱基序列也发生了变化。两种生物的DNA单链之间互补程度越高,通过分子杂交形成双螺旋片段的程度也就越高,二者的亲缘关系就越近;反之,亲缘关系就越远。所以,可以通过DNA分子杂交技术来鉴定物种之间亲缘关系的远近。
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