二手HPLC高效液相色谱可以分为液/固吸附色谱、液/液分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱四类。其基本理论和定性定量分析方法与气相色谱基本相同。二手HPLC高效液相色谱仪五大组成系统 :输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。
二手HPLC高效液相色谱的输液系统包括流动相贮存器、高压泵和梯度淋洗装置。流动相贮存器为不锈钢或玻璃制成的容器,可以贮存不同的流动相。高压泵是高效液相色谱仪重要的部件之一。由于高效液相色谱仪所用色谱柱直径细,固定相粒度小,流动相阻力大,因此,必须借助于高压泵使流动相以较快的速度流过色谱这。
高压泵需要满足以下条件:能提供150-450kg/cm2的压强;流速稳定,流量可以调节;耐腐蚀。目前所用的高压泵有机械泵和气动放大泵两种。梯度淋洗装置可以将两种或两种以上的不同极性溶剂,一定程序连续改变组成,以达到提高分离效果,缩短分离时间的目的。它的作用与气相色谱中的程序升温装置类似。
梯度淋洗装置分为两类:一类叫外梯度装置;一类内梯度装置。外梯度装置是流动相在常压下混合,靠一台高压泵压至色谱柱;内梯度装置是先将溶剂分别增压后,再由泵按程序压入混合室,再注入色谱柱。
二手HPLC进样器是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。
分离系统进样系统一般高效液相色谱多采用六通阀进样。先由注射器将样品常压下注入样品环。然后切换阀门到进样位置,由高压泵输送的流动相将样品送人色谱柱。样品环的容积是固定的,因此进样重复性好。
二手HPLC分离系统包括色谱柱、连接管、恒温器等。色谱柱是高效液相色谱仪的心脏。它是由内部抛光的不锈钢管制成,一般长10—50cm,内径2—5mm,柱内装有固定相。液相色谱的固定相是将固定该涂在担体上而成。担体有两类:一类是表面多孔型担体;另一类是全多孔型担体。
近年来又出现了全多孔型微粒担体。这种担体检度为5—10um,是由nm级的硅胶微粒堆积而成,又叫堆积硅珠。由于颗粒小,所以柱效高,是目前广泛使用的一种担体。在高效液相色谱分析中,适当提高柱温可改善传质,提高桂效,缩短分析时间。因此,在分析时可以采用带有恒温加热系统的金属夹套来保持色谱拄的温度。温度可以在室温到60℃间调节。
二手HPLC高效液相色谱的检测器很多,常用的有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器等。
二手HPLC对色谱数据进行处理,并参与HPLC仪器的自动控制。
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