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检测兔血浆中盐酸氯胺酮质量浓度
2015/12/07 11:07
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方案摘要：
产品配置单：
科捷仪器LC600C 梯度液相色谱仪
型号： KJ LC600C
产地： 江苏
品牌： 南京科捷
¥10万 - 20万
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方案详情：
氯胺酮为苯环己哌啶的衍生物，系一种新型的分离麻醉药，起效快，作用时间短，是目前唯一具有镇痛作用的静脉全身麻醉药，因其作用确切、呼吸影响小、咽喉保护性反射抑制轻微等优点，广泛用于小儿麻醉和辅助麻醉，但不良反应较多，因此需明确了解其在体内的血药浓度，保证术中患者生命体征的平稳。
需建立具有操作简便、快速准确、经济实用的检测血浆中盐酸氯胺酮质量浓度的方法，为盐酸氯胺酮临床血药浓度的监测及毒理学和药动学的研究提供帮助。
检测仪器：高效液相色谱仪，包括四元梯度泵及在线脱气机、二极管阵列检测器；色谱工作站；离心机；电子天平；漩涡混合器。
色谱条件：流动相为甲醇-乙腈原磷酸盐缓冲液（50:15:35），流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长220nm，进样量20μL。
测定：标准溶液制备：精密称取盐酸氯胺酮、布比卡因标准品适量，分别用甲醇定容后配成两种标准贮备液，质量浓度分别为1g/L和100μg/mL的贮备液，于4℃冰箱内保存备用，用前配制成不同质量浓度的标准溶液。
血样处理：取新鲜全血2mL，迅速加入含50IU肝素的试管中，4000r/min离心10min，精密吸取兔血浆1.0mL至5mL具塞玻璃试管，置冰箱备用。精密吸取0.2mL含药血浆至5mL玻璃试管，加入内标液，2mol/L NaOH10μL，涡旋30s，再加入2mL乙酸乙酯萃取，涡旋30s，在振荡器上振摇20min，12000r/min离心员10min，取有机相移入至另一洁净管内，氮气吹干，加入流动相200μL溶解，高效液相色谱仪中进样20μL分析，重复3次。
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