顶空气相色谱法检测食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留

　　1　范围 　　本标准规定了粮食、蔬菜中α－666、β－666、γ－666、δ－666、七氯、艾氏剂、p，p′－DDT、p，p′－DDD、p，p′－DDE、 O，p′－DDT、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯(功夫)、二氯苯醚菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等农药残留量的测定方法。 　　本标准适用于使用过六六六等有机氯及拟除虫菊酯类农药的粮食、蔬菜等作物的残留量分析。 　　2　原理 　　样品中有机氯和拟除虫菊酯农药用有机溶剂提取，经液液分配及层析净化除去干扰物质，用电子捕获检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。 　　3　试剂 　　3.1　石油醚：沸程60～90℃，重蒸。 　　3.2　苯：重蒸。 　　3.3　丙酮：重蒸。 　　3.4　乙酸乙酯：重蒸。 　　3.5　无水硫酸钠。 　　3.6　弗罗里硅土：层析用，于620℃灼烧4h后备用。用前140℃烘2h，趁热加5%水灭活。 　　3.7　农药标准品，见表1。 　　3.8　标准溶液的配制 　　分别准确称取表1中标准品，用苯溶解并配成1mg/mL的储备液。使用时用石油醚稀释配成单品种的标准使用液。再根据各农药品种在仪器上的响应情况，吸取不同量的标准储备液，用石油醚稀释成混合标准使用液。 　　4　仪器 　　4.1　气相色谱仪：附电子捕获检测器(ECD)。 　　4.2　电动振荡器。 　　4.3　组织捣碎机。 　　4.4　旋转蒸发仪。 　　4.5　过滤器具：布氏漏斗(φ80mm)，抽滤瓶(200mL)。 　　4.6　具塞三角瓶：100mL。 　　4.7　分液漏斗：250mL。 　　4.8　层析柱。 　　5　样品制备 　　取粮食样品经粮食粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样。取蔬菜样品擦净，去掉非可食部分后备用。 　　6　分析步骤 　　6.1　提取 　　6.1.1　粮食样品：称取10g粮食试样，置于100mL具塞三角瓶中，加入20mL石油醚，于振荡器上振摇0.5h。 　　6.1.2　蔬菜样品：称取20g蔬菜试样，置于组织捣碎杯中，加入30mL丙酮和30mL石油醚，于捣碎机上捣碎2min，捣碎液经抽滤，滤液移入 250mL分液漏斗中，加入100mL 2%硫酸钠水溶液，充分摇匀，静置分层，将下层溶液转移到另一250mL分液漏斗中，用20mL×2石油醚萃取，合并三次萃取的石油醚层，过无水硫酸钠 层，于旋转蒸发仪上浓缩至10mL。 　　6.2　净化 　　6.2.1　层析柱的制备：玻璃层析柱中先加入1cm高无水硫酸钠，再加入5g5%脱活弗罗里硅土，最后加入1cm高无水硫酸钠，轻轻敲实，用20mL石油醚淋洗净化柱，弃去淋洗液，柱面要留有少量液体。 　　6.2.2　净化与浓缩：准确吸取样品提取液2mL，加入已淋洗过的净化柱中，用100mL石油醚十乙酸乙酯(95∶5)洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸发仪上浓缩近干，用少量石油醚多次溶解残渣于刻度离心管中，最终定容至1.0mL，供气相色谱分析。 　　6.3　测定 　　6.3.1　气相色谱参考条件 　　6.3.1.1　色谱柱：石英弹性毛细管色谱柱，0.25mm(内径)×15m，内涂有OV－101固定液。 　　6.3.1.2　气体流速：氮气40mL/min，尾吹气60mL/min，分流比1∶50。 　　6.3.1.3　温度：柱温自180-230℃ 5℃/min 保持30 min；检测器、进样口温度250℃。 　　6.3.2　色谱分析：吸取1μL试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高。再吸取1μL混标溶液进样，记录色谱峰的保留时间和峰高。根据组分在色谱上的出峰时间与标准组分比较定性；用外标法与标准组分比较定量。 　　6.3.3　色谱图 　　7　结果 　　7.1　计算 　　按式(1)计算。 　　式中：X--样品中农药的含量，mg/kg； 　　Esi--标准样品中i组分农药的含量，μg； 　　V1--样品进样体积，μL； 　　V2--最后定容体积，mL； 　　hsi--标准样品中i组分农药峰高，mm； 　　hi--样品中i组分农药峰高，mm； 　　m--试样的质量，Kg； 　　K--稀释倍数。 　　7.2　精密度和准确度 　　将10种有机氯和6种菊酯类农药混合标准液分别加入到面粉、黄瓜、油菜中进行方法的精密度和准确度试验，添加回收率在81.71%～112.41%之间，变异系数在2.48%～10.05%之间。