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Muse智能触控细胞分析仪在细胞毒性试验中的应用

应用领域

医疗/卫生

检测样品

检测项目

化妆品、食品添加剂、药物等投入使用前,都需要进行大量的细胞毒性试验,证明它们没有毒性,对人体无害,才能正式销售。而且在这些产品的销售过程中也必须要有相关部门的监管,也需要对其定期进行监测,其中的检测项目就是细胞毒性试验。目前分析细胞毒性和细胞活性的方法有很多种,比较经典的方法有台盼蓝染料法、MTT法、中性红染色法等。对细胞毒性的评估主要围绕两个方面的检测:死细胞多少以及活细胞多少。 死活细胞细胞膜存在通透性的差异:活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加,所以台盼蓝可以穿膜与解体的DNA结合显色,而活细胞拒染。该方法操作简单,但是在实际实验中,凋亡的细胞也会存在拒染的情况,如果待测细胞群自身凋亡比例较高,则活细胞比例将不准确。 与鉴定死细胞的台盼蓝法相反,MTT法和中性红染色法是对活细胞进行检测。中性红为活性染料,其进入细胞膜要求获取储存于活细胞溶酶体的能量而激活,如果细胞膜被任何物质损坏,则其不能被胞吞而储存于细胞内,细胞受损越严重,中性红摄取率更低。而MTT能被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原为非水溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。但是这两个方法都需要长时间的染料孵育过程以及复杂的操作过程,而且容易受到其他因素的影响,造成结果的不准确。所以研究人员正在不断寻找新的实验方法,希望能获得更简单、更快捷、更准确的方法。

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活体电穿孔法介绍

应用领域

检测样品

检测项目

比较系统全面的介绍了活体转基因技术的原理、特点优势、实验条件、应用及基因治疗方面的展望 活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115μm ,这种通道能维持几毫秒到几秒,然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微小的通道进入细胞 。近年来活体电穿孔法用于转基因研究的报道不断增多,在基因治疗方面的优势也日趋显著,是一种很好的活体基因导入方法。

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