帝肯发布二代测序建库仪新品 适合小通量NGS实验室

自2003年第一台二代测序仪诞生以来，NGS技术经历了近二十年的发展，文库制备技术也基本趋于成熟。虽然NGS建库技术一直在更新，但是文库制备流程依然需要大量的时间进行手工操作。繁琐的手工操作对实验人员的操作水平要求较高，且文库的一致性和可重复性差，是困扰很多实验室研究的一个难题。为解决相关问题，NGS自动化建库方案应运而生。目前，市面上常见的NGS自动化工作站主要以高通量为主，仪器占地面积较大，无法满足所有实验室的需求。Tecan拥有四十多年的自动化开发经验，已开发DreamPrep NGS、Fluent和EVO液体处理平台，可为大型的NGS实验室提供自动化工作站。近日，Tecan发布了专为小通量NGS建库实验室设计的MagicPrep NGS，能够满足从低通量到高通量的自动化文库制备需求。

什么是MagicPrep NGS？

Tecan的MagicPrep NGS是一个完整的自动化NGS文库制备解决方案，由一个简单的台式系统完成。基于墨盒设计的试剂和耗材使MagicPrep NGS可以在10分钟内启动。由于使用了预混试剂卡，用户添加样本后就可以开始运行该系统。据介绍，MagicPrep NGS系统结合了超高的易用性和经过验证的强大技术，可实现超过97%的可靠性，最大限度地减少了用户错误的可能性，提供一致和可重复的结果。

MagicPrep NGS的主要优势

>99%平均成功率*

MagicPrep NGS制备NGS文库操作简便，其预先优化的试剂、脚本和强大的自动化为文库制备提供了一个可靠的解决方案，并能将错误降至最低。*成功率基于平均内测数据得出。样本质量和可变性可能会影响成功率。更多信息，访问tecan.com/magicprep-ngs/reliability

图1. MagicPrep NGS文库成功率。

图1为MagicPrep NGS系统用于对照样本的Illumina测序文库制备。在10多种不同仪器上进行了共59次（472个样本）测试，包括mRNA-Seq和DNA-Seq测试。无论应用程序如何，都计算所有运行的平均库成功率。总的来说，MagicPrep NGS系统的平均成功率大于99%。

什么是文库成功率？

MagicPrep NGS系统旨在为自动化文库准备提供一个简单、可靠的解决方案。经过大量的测试，以优化的试剂配方、自动化脚本和耗材，最大限度地降低文库失败率。

使用推荐的输入量和PCR循环数的对照样本测试MagicPrep NGS文库制备成功率。如果文库的总回收率大于或等于200ng，则认为文库是成功的。使用片段分析仪确认所有文库的预期文库片段分布。

文库的质量与成功受到样本质量、输入量和样本潜在抑制剂的影响。质量较低的样本可能会看到不一样的成功率。

10分钟的简单运行设置

MagicPrep NGS可代替耗费数小时或数天时间的手动移液过程。使用MagicPrep NGS系统，所有文库制备所需的试剂和耗材都预先装在一个试剂盒中，可在10分钟内开始运行。用户只需要提供样本，无需预混试剂，也无需购买其他试剂。

用户只需将样本加入样本板，再将试剂卡和样本板插入仪器，点击运行，即可开始建库。

MagicPrep NGS试剂卡整合了帝肯专利技术和专门设计的新技术，提供简单的无人值守解决方案。该试剂卡包含DimerFree®技术，可以最大限度地减少接头二聚体的形成。无论输入量或GC含量为多少，都能保持一致的DNA酶切片段化。同时，试剂卡还包含高保真文库扩增，可以实现文库的准确复制。

免安装免校准免脚本编写

MagicPrep NGS无需仪器安装，插电即可运行。其触摸屏的可视化图形界面在简化操作的同时也减少了错误的发生，对于实验室新手或者没有NGS建库背景的实验人员非常友好，简单的培训即可上手操作。此外，MagicPrep NGS软硬件一体机的设计也为实验室节省了空间。

MagicPrep NGS系统提供了真正的一站式自动化建库系统，开始运行后无需额外的用户交互，节省时间，由MagicPrep NGS负责完成后续的文库制备工作。另外，MagicPrep NGS仪器可以保护文库不蒸发，存储文库长达65个小时，因此用户可以在任何时候开始文库制备。

可靠性和可重复性

MagicPrep NGS系统采用了一种新型的试剂分装技术与成熟的技术，提供可靠和可重复的解决方案，同时最大限度地减少了用户错误的可能性。MagicPrep NGS提供了一个完全自动化和可复制的实验流程，让实验人员不再局限于单纯的文库制备，而是寻求更多的突破。

图2.MagicPrep NGS系统不同运行的文库一致性。

MagicPrep NGS系统在同一运行和不同运行均能制备一致的文库。在同一台仪器上使用Revelo mRNA-Seq试剂盒制备40个文库(5次运行)，以100 ng的K562总RNA文库为起始量。将每个文库的总量绘制成图表，以证明文库得率的一致性。数据显示，每个批次的CV在5.8% ~ 16.8%之间，表明每个批次的8个样本的产量一致。此外，在所有5次运行中生成的文库结果是相似的，证明MagicPrep NGS系统有较好的一致性。

MagicPrep NGS系统提供一套完整且可靠的文库制备方案

试剂卡汇集了帝肯手动试剂盒的全部优势，并经格式化后使用在MagicPrep NGS仪器上，因此可以节省数小时的操作时间。具有以下特点：

• 宽泛的样本输入区间和体积，便于加样

•  DimerFree技术减少了接头二聚体的形成

• 双端唯一分子标签（UDI）接头，可灵活应用于样本的多重组合以及index跳跃检测

REVELO mRNA-SEQ FOR MAGICPREP NGS

图3. 在宽泛的输入区间内保持一致的性能。

使用Revelo mRNA-Seq试剂盒制备10 ng、100 ng和1000 ng的 K562总RNA文库。无论输入量多少，所有文库的指标相似。Revelo mRNA-Seq试剂盒提供了从总RNA样本中选择和构建mRNA-Seq文库所需的所有试剂和耗材，与MagicPrep NGS系统共同为自动化制备mRNA-Seq文库提供了一个简单的解决方案。

REVELO DNA-SEQ ENZ FOR MAGICPREP NGS

图4：可靠的酶切DNA片段化，不受CG含量的影响。

使用Revelo DNA-Seq Enz试剂盒，用100ng不同GC含量的三种细菌基因组混合物（金黄色葡萄球菌（32%GC）、大肠杆菌（50%GC）和类球红细菌（68%GC））制备文库。所有基因组都在测序数据中得到了预期的体现。插入片段长度分析显示所有三个基因组的插入大小相似，表明DNA片段化不受GC含量的影响。Revelo DNA-Seq Enz试剂盒提供高质量DNA酶切构建文库所需的所有试剂和耗材，与MagicPrepNGS系统为自动化制备DNA-Seq文库提供了一个简单的解决方案，且DNA片段的一致性不受输入量与GC含量的影响。

REVELO DNA-SEQ MECH FOR MAGICPREP NGS

图5. 不同GC含量样本的结果一致性高。

Revelo DNA-Seq Mech试剂盒被用于从100ng三种GC含量不同的细菌基因组（金黄色葡萄球菌（32%GC）、大肠杆菌（50%GC）和类球红细菌（68%GC））的预片段化混合物中制备文库。测序结果显示，三种细菌基因组的均一性和基因组覆盖率均达到99.9%。每个基因组的读长比例与手动得出的结果相似，表明自动化文库构建过程中的GC偏好低。Revelo DNA-Seq Mech试剂盒提供了预片段化的DNA构建DNA-Seq文库所需的所有试剂和耗材，与MagicPrep NGS系统为自动制备DNA-Seq文库提供了一个针对片段化的基因组DNA的高灵敏解决方案。