Freedom EVO在诊断用维生素B检测方面带来的积极作用

质谱法正在快速成长为微量元素（如维生素B1、B6、B12和D）、类固醇、荷尔蒙和许多其他其他药物的首选定量分析方法。对于临床实验室，质谱技术的瓶颈并不在于分析本身，而在于如何预处理样品，去除可能干扰结果的蛋白质和其他生物学分子。

过去30年，人们对于微量元素在维持老龄化人群健康方面的作用的认识，越来越深刻。但仅仅在过去十年左右，能够有效检测饮食或代谢之中的缺乏微量元素的可靠实验方法才成为常态。认识的深入和有效检测手段的扩展，导致临床实验室从主要或辅助机构接收到的导致这方面的需求激增，这就要求临床实验室变革工作方式变化，以应对日益增长的工作负担。

维生素B1（硫胺素）和B6（吡哆醇）分别负责从葡萄糖和脂肪中提取能量，同时参与很多其他代谢通路。对这两种维生素的检测需求也出现了大量增长。荷兰Noordwest Ziekenhuisgroep (Northwest Clinics) Alkmaar 的临床化学部门一年要进行这类代谢物的检测数量就要超过19000起。该部门临床化学家Edwin ten Boekel表示：“我们部门是Northwest Clinics的两大实验室之一，服务北荷兰大约60万人口。我们实验室平时非常忙碌，每天要出具超过1万名病人的报告结果，因此需要采取快速、有效的分析流程，确保我们能够应付这一工作负担“。

“早在20多年前，我们便已开始在HPLC系统上定量维生素B1和B6，但这一实验涉及一个衍生步骤，需要进行长时间的后续分析。此外，该实验还需要大量的人工加样技术，因而要花上大量时间进行高度重读的工作。鉴于此，我们最近开始寻求实现样品制备自动化的方法，以期提高通量、降低人为误差、消除加样错误。我们并未直接对自己现有的实验方案进行自动化处理，而是选择过渡到采用质谱(UHPLC-MSMS)技术的高效液相色谱法，利用支持自动化的蛋白沉淀步骤进行分析钱样品处理。

我们考察了很多可实现这类样品制备自动化的系统，Freedom EVO®平台在阿姆斯特丹的展示令我印象非常深刻。我们的目标是实现LC-MS样品制备完全自动化，根据Tecan的建议，我们购买了一台Freedom EVO 150工作站。

我们实验室的Freedom EVO于2016年夏季开始试用，并针对96孔板形式应用进行了优化。含有患者溶解全血样品的反应板、校准剂和质控样品放置在仪器架上，向每个孔中加入三氯乙酸(TCA)，以便沉淀血浆蛋白。随后密封检测板，并在离心机之中离心，然后采用Tecan系统，将每个孔的上清液转移到一个新的96孔板中。随后，将这块可以直接进行分析的检测板重新密封，转移到一台独立的UHPLC-MSMS系统上。Edwin补充说：“尽管我们之前并没有使用Tecan平台的经验，但一旦您熟悉Freedom EVO，就会发现这一系统非常易用。Tecan的客户支持部门的工作也非常出色；他们非常友善，我们的咨询从未出现长时间等待无回复的情况。我们现在已经在这款仪器上进行了多项试验方案，相对于我们之前的移液操作步骤，自动化操作的可重复性提高了不少。我们通过反复处理不同批次的同一样品，进行了对照试验。通过使用手持式条形码扫描仪和条形码标记的微孔板，我们还能够提高可追溯性——这对诊断实验室而言无疑十分重要。

最重要的是，Freedom EVO的自动化样品制备将处理等量样品所需的时间减半。它让我们不仅避免了员工的样品重复移液工作，更解放了人力从事其他工作任务。Edwin总结道。

NWZ的Freedom EVO可提供全自动的分析前处理

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