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瑞士步琦有限公司 BUCHI Labortechnik AG

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【瑞士步琦】近红外光谱仪ProxiMate:为您的酸奶品质把好质量关

近红外光谱酸奶品质的快速检测近红外应用”1介绍酸奶是一种营养价值高而价格相对低廉的多功能食品。每日有大量酸奶产品流向市场,因而对营养成分进行快速检测十分必要。但因取样化验所需时间较长,实时性比较差,大大影响了生产效率。近红外光谱技术的应用将大大缩短酸奶养分测定的时间,使走进工厂生产线、检测线,推动现代食品质量检测技术的发展。近红外光谱定量分析模型建成之后,酸奶产品的营养成分检测不需要再增加资金投入,节约了费用,具有可观的经济效益。近红外光谱主要是由于分子振动从基态向高能级跃迁时吸收特定波长的近红外光产生的。近红外光谱记录的是分子中单个化学键的基频振动倍频和合频信息,测量的主要是含氢基团 X-H 振动的倍频和合频吸收。因此通过扫描样品的近红外光谱,可以得到样品中有机分子含氢基团的振动信息。使用近红外光谱仪扫描样品,获得酸奶的近红外光谱图,将光谱图与化学测定值一一对应,通过化学计量学手段对近红外光谱进行处理,建立待测成分含量的定标模型,从而实现利用近红外分析方法同时对酸奶的脂肪、蛋白质等指标进行快速测定。ProxiMateProxiMate 是一种适用于乳制品行业的旁线近红外光谱仪器,具有可靠耐用、设计紧凑和使用简单的特点。它能减少生产停机时间,对批次抽样进行快速的质量控制。测量附件采用标准样品杯,并搭配透反射盖,一起用于进行酸奶的透反射测量,保证光谱的稳定。▲ProxiMate2建立相关参数的定标模型随机选取酸奶样品并扫描样品,得到样品近红外吸收光谱,测量结果显示图谱重复性好,稳定性高。▲酸奶样品近红外光谱图模型建立及模型评价▲脂肪的化学值与预测值的相关关系图▲蛋白质的化学值与预测值的相关关系图▲干物质的化学值与预测值的相关关系图酸奶中脂肪,蛋白质,干物质的实际测量值和预测值具有较高的相关性,相关系数 R2 都达到 0.95 以上,三个指标的偏差值 SEC 分别为 0.03,0.03,0.07。3总结各项指标近红外光谱与原始化学测试的含量之间都具有较好的相关性,模型误差也满足日常的检测标准,运用于生产过程工艺控制的实时监控,可快速,准确出具数据,降低了检测压力和检测时间,有效提高工厂生产效率。

应用实例

2024.06.04

【瑞士步琦】巴爷爷的博客——喷雾干燥和冷冻干燥技术在蛋白多肽领域的应用

喷雾干燥和冷冻干燥技术在蛋白多肽领域的应用蛋白多肽应用”Bart 的第 100 篇博客文章!在这个很有纪念意义的时间点,Bart 继续对喷雾干燥和冷冻干燥技术在蛋白多肽领域的应用进行剖析,完成他的蛋白多肽三部曲《如何让您的蛋白质配方稳定持久更持久?》和《当你制定蛋白质和多肽配方时,你是“喷雾干燥党”还是“冷冻干燥党”呢?》,让我们一同看看这次 Bart 给我们带来哪些应用干货吧!亲爱的读者们,我简直不敢相信,但我正坐下来写博客的第 100 篇文章!我们在这里涵盖了色谱,旋转蒸发,冷冻干燥和喷雾干燥的主题,我希望我们在接下来的 100 篇文章中继续这样做。由于这是一个有点特别(好吧,非常特别)的帖子,我决定做一些与往常不同的事情。我想和大家分享一下我最近读到的一篇非常有趣的研究论文中的发现,我认为把这篇文章专门献给我们的新成员:喷雾干燥。首先,文献链接如下:文献链接https://www.mdpi.com/2227-9717/9/3/425/htm(Sweeny C, et al. Using Peptidomics and Machine Learning to Assess Effects of Drying Processes on the Peptide Profile within a Functional Ingredient. Processes 2021, 9(3), 425; https://doi.org/10.3390/pr9030425)其次,让我告诉你他们所发现的令人兴奋的事情,是关于冷冻干燥和喷雾干燥对生物活性肽的影响以及为什么你首先应该关注这部分。 高蛋白成分因其在食用时的营养和功能益处而越来越受欢迎。然而,这些蛋白成分及其酶解产物在加工处理中可能会碰到问题,特别是在干燥过程中,因为这一步有可能会导致蛋白质变性和肽聚合。 问喷雾干燥和冷冻干燥是将一种成分转化为粉末的常用方法?提高产品稳定性提供更有效的运输选择 由于减少了水分活性,提高了产品的保质期在之前发布的一篇文章中,我已经解释了喷雾干燥和冷冻干燥的工作原理。但我将在这里再次总结这些技巧:_喷雾干燥 冷冻干燥 工作原理将溶液或悬浮液从液体转化为干燥状态,其中液体悬浮液在热干燥腔体中雾化,蒸发液滴并产生低水分含量的细颗粒水通过升华在低压环境中以冰冻状态被去除 优势快速 简单 制备定制尺寸的颗粒 包埋成分以保护其免受环境影响的可能性 相对便宜 有助于保持多肽的物理化学和生物活性的稳定性技术限制可能导致关键活性物质损失 可能导致原料中存在的营养价值成分损失 会破坏热敏性蛋白 在技术上具有挑战性 相对来说成本更高 实验过程漫长 需要较少的监督和管理 应用推荐适合低成本、高规模生产适用于关注产品稳定性和较小产品体积的应用范畴其他考虑因素包括物化性质,如溶解度、味道、密度和颜色等,需要评估冷冻干燥和喷雾干燥效果,以确定符合最终产品所需的配方。 现在,上面提到的文献中, 研究者使用肽组学和机械学习技术来观察植物蛋白水解物的干燥方法是否会影响肽谱和随后的预测功能。 研究者想要研究冷冻干燥和喷雾干燥技术不仅对样品的物理特性和蛋白质含量有影响,而且还会对肽含量产生影响。生物活性肽是活性成分功能的组成部分。天然多肽具有抗衰老、抗癌、抗炎、抗氧化、降胆固醇等特性。许多多肽物质已被证明具有一种及以上的生物活性。 有趣的是,研究者没有发现喷雾干燥和冷冻干燥制备的产品在肽谱成分和功能上有很大差异。 他们确实指出了他们在自己的研究和现有的科学工作中注意到的不同点,关于冷冻干燥和喷雾干燥对制剂的几个影响差异,包括:影响差异喷雾干燥样品颜色稍深 部分报道称喷雾干燥中随着干燥温度升高热诱导蛋白质聚集(多肽数量减少) 与喷雾干燥相比,冷冻干燥制剂中含有Asp、His 和 Lys 氨基酸的肽有所增加(如先前报道的那样,Lys 在喷雾干燥过程中特别容易受到损害) 制备得到的冷冻干燥制剂稍趋向于链更长、分子量更高、带更多正电荷的肽(可能会考虑到冷冻干燥比喷雾干燥更温和) 与冷冻干燥制剂相比,喷雾干燥制剂所得的是具有更大比例的负电荷肽(通常与喷雾干燥粉末相关的是可能有助于增加粉体溶解度) 冻干制剂制备的多肽所带负电荷略少,为0.24,这与多肽长度、分子量和物理特性的增加相关,可能导致与冻干粉末相关的溶解度降低 当使用生物信息学方法时,预测喷雾干燥的疏水性增加了 1.74%,这可能与喷雾干燥制剂里多肽中疏水氨基酸(Ala, Met, Phe, Pro, Try和Val)的轻微增加有关 根据预测,喷雾干燥和冷冻干燥的抗炎生物活性相当 以上就是冷冻干燥和喷雾干燥一个很好的对比,主要重点针对生物活性成分多肽成分。 下次见! 

应用实例

2024.06.03

【瑞士步琦】近红外光谱分析技术在玉米品质检测中的应用

近红外光谱分析技术在玉米品质检测中的应用近红外应用”1介绍玉米是我国重要的粮食作物。根据国家统计局数据显示,我国 2021 年玉米播种面 4332 万 hm2,玉米产量达 2.7 亿 t。玉米中的水分、蛋白质、脂肪、糖类等主要化学成分含量会直接影响到玉米的经济效益。化学成分含量的测定已成为原料品质评价中的重要环节。玉米种子作为生产中最基本的资料,其质量的好坏直接影响玉米的产量及品质。玉米品质指标(水分、蛋白质、淀粉等)的检测常用理化方法,安全指标(毒素等)的检测使用液相等物理或化学方法,可用冷浸法等对种质品质进行分析,但这些方法均会对样本本身造成破坏,存在处理时间较长以及需要专业人员操作、仪器成本高等缺点。因此,探究一种可以对玉米进行无损、快速检测技术显得尤为重要。近红外光谱分析技术具有样品不需复杂耗时的前处理、无损耗、多成分同时分析、无污染的检测优势,近年来得到了广泛关注。近红外光谱分析技术是利用物质对光的吸收、散射、反射与透射等特性对待测物进行分析的检测技术,通过样品的吸收光谱及理化分析结果可对样品进行定性或定量分析。近红外光谱分析技术的检测步骤为使用化学计量法对近红外光谱数据进行预处理及建立模型,将样本的预测集通过模型进行检测,验证模型是否精准,并对模型进行评价及优化。近红外光谱技术常用处理方法,由于近红外光谱中强大的背景信息造成的噪声干扰和存在冗余变量,导致从样品的近红外光谱中提取与检测目标相关的信息较困难,因此,需对光谱数据进行预处理。常用的光谱预处理方法有去噪自编码器(DAE)、正交信号校正法(OSC)、标准正态变换(SNV)、多元散射校正(MSC)等。2近红外光谱技术模型评价指标定量模型评价指标  评价近红外光谱定量模型预测准确性的实质是模型的预测结果与样品结果的接近程度,评价预测模型一般采用校正决定系数(R2c)、验证决定系数(R2v)、校正相关系数(Rc)、验证相关系数(Rv)、校正均方根误差(RMSEC)、验证均方 根 误 差(RMSEV) 和 相 对 分 析 误 差(RPD)等参数,决定系数与相关系数是预测值与使用化学方法检测出的真值样本集相关性的标准,通常 R2c、R2v、Rc、Rv 越大时,认为所建模型效果越好;RMSEC 和 RMSEV 是校正集与验证集的预测值和使用化学方法检测出的真值之间差异大小的量度,RMSEC 和 RMSEV 越小,认为所建模型性能越优;RPD 是衡量模型可靠性的指标,当 RPD>3,认为所建立的预测模型可靠性较高,3>RPD>2.5,认为模型可用于分析;RPD定性模型评价指标   近红外光谱技术在定性分析中多用于样品分类,常用判定指标有正确率、敏感性、特异性等。相关检测设备从采样现场到实验室快速无损检测样品的指标,主要包括水分、脂肪、蛋白、灰分等。可以帮助企业优化生产过程,控制最终产品质量,提高利润。近红外光谱仪检测过程无需化学试剂,可大大降低实验室湿化学成本。检测快速,可大大减少操作人员的劳动力,降低使用门槛,节约管理费用。▲ 步琦近红外光谱仪 ProxiMate防水型不锈钢外壳,入口防护等级为 IP69,可进行高压管冲洗,即使是最苛刻的工作环境也能满足多种即时可用的预校准,适用性广泛直观的现触摸屏界面,简单、明了样品使用磁耦合驱动装置旋转器,分析完成后该装置可拆除,轻松清洁允许用户利用近红外光,可见光或将两种信号结合来提高测量性能和全面评估样品,从而使其测量性能达到最大化3相关模型参数ProductParameterRangeSpectraSEPMaizeStarch16-76%6553.5MaizeFat3.14 -5.352980.2MaizeProtein6-21%6821.3MaizeMoisture7-13%6820.5MaizeAsh1-8%3070.04步琦公司为您提供完整的玉米检测解决方案,同时提供定制化服务和使用,欢迎用户前往我司实地参观考察。

应用实例

2024.05.31

【瑞士步琦】使用SFC分离手性反式-1,2-二苯乙烯氧化物

使用SFC分离手性反式-1,2-二苯乙烯氧化物SFC 应用”本应用描述了以反式二苯乙烯氧化物为手性分子的手性柱筛选和连续的制备方法,并用叠层进样方法进行制备分离。1简介手性分子是一种有机化合物,它具有一种独特的性质,即互为不可重叠的镜像。这意味着它们以两种形式存在,称为对映体,除了原子的三维排列外,它们在各方面都是相同的。虽然这些对映体具有相同的化学性质,但它们可能具有不同的生物活性和药理作用[1,2]。因此,手性分子在制药工业中变得越来越重要,它们被用于开发药物和其他治疗方法,因此分离对映体十分重要。超临界流体色谱法(SFC)在手性分子的分离纯化中,具有其他分离技术无法比拟的优点。SFC 使用超临界二氧化碳作为流动相,这是一种清洁和绿色的溶剂,很容易从最终产品中去除。此外,SFC 提供了高分辨率和快速的分离。预测哪种固定相能够有效分离 SFC 中特定的一组对映异构体,即使在现在看来也是十分困难,这使得我们需要选择合适的手性固定相来不断试错[2]。手性 SFC 多采用与手性高效液相色谱(HPLC)相同的色谱柱,其中最常用的是多糖手性固定相(CSPs),由于可以选择不同改性的多糖,因此具有很强的通用性[3]。多糖 CSPs 具有高负载能力,这使得它们在制备规模应用中非常有用。许多商业多糖手性固定相是可用的,主要是基于直链淀粉或纤维素和改性的卤化或非卤化芳香基团。改性后的多糖可以包被或固定在二氧化硅载体上,以增强其对强溶剂的抵抗力[3]。还有其他 CSPs 通常用于手性 SFC 应用,例如,Pirkle 型手性固定相[3]。本文介绍了使用 Sepmatix 8x SFC 对反式二苯乙烯氧化物(TSO)进行平行柱筛选,随后通过方法优化转移到制备的 Sepiatec SFC-50。▲反式 - 二苯乙烯氧化物 两种手性结构2设备Sepiatec SFC-50Sepmatix 8x SFCPrepPure cCDMPC, 5um, 250 x 4.6mmPrepPure cADMPC, 5um, 250 x 4.6mmPrepPure iADMPC, 5um, 250 x 4.6mmPrepPure iCDMPC, 5um, 250 x 4.6mmPrepPure iCDCPC, 5um, 250 x 4.6mmPrepPure iBT, 8um, 250 x 4.6mmPrepPure iBT, 8um, 250 x 10mm3试剂和耗材二氧化碳(99.9%)甲醇(≥99%)乙醇(99%)异丙醇(99%)乙腈(99%)反式二苯乙烯氧化物(99%)(为了安全操作,请注意所有相应的MSDS)4实验过程样品制备:在筛选和方法优化时,将 0.075g 反式二苯乙烯氧化物溶解在 5.0mL 甲醇中;在堆叠注射时,将 0.1909g 反式二苯乙烯氧化物溶解于 6.0mL 甲醇中。使用 Sepmatix 8x SFC 进行筛选:流动相A = 二氧化碳;B = 甲醇流速3 mL/min (每根色谱柱)流动相条件0 - 0.5min5% B0.5 - 8.0min5 - 50% B8.0 - 9.4min50% B9.4 - 9.5min50 - 5% B9.5 - 10min5% B检测200nm – 600nm 紫外扫描筛选完全是全自动运行,采用流量控制单元,将每通道内的流量设置为 3mL/min,并将流量平衡。样品自动进样(每根色谱柱 5μL),启动平行筛选(运行时长=10分钟)。背压调节器设置为 150bar,柱温箱设置为32℃。使用 Sepiatec SFC-50 进行制备:流动相A = 二氧化碳;B = 甲醇流动相条件等度运行检测229nm 紫外检测PrepPure iBT 色谱柱在设定的流速下预热 4 分钟,样品通过定量环自动进样并运行。背压调节器设置为 150bar,柱温箱设置为 40℃。5实验结果色谱柱筛选:为了确定手性化合物 TSO 的最佳分离条件,进行了不同手性色谱柱的筛选,使用 Sepmatix 8x SFC 允许同时进行 8 根不同色谱柱的平行筛选。本实验一共使用了 6 根不同色谱柱:Chiral iADMPC, Chiral iCDMPC, Chiral iCDCPC, Chiral iBT, Chiral cADMPC 和 Chiral cCDMPC。图1 为色谱柱筛选结果,其中 Chiral iADMPC 色谱柱不能很好地分离对应异构体 TSO(可见表1),而 Chiral iCDMPC,Chiral iCDCPC,Chiral iBT,Chiral cADMPC 和 Chiral cCDMPC 色谱柱可以分离 TSO。▲ 图1. Sepmatix 8x SFC 筛选结果。从左上至右下依次是Chiral iADMPC,Chiral iCDMPC和Chiral iCDCPC;Chiral iBT,Chiral cADMPC 和 Chiral cCDMPC。运行时长 =10min,紫外检测波段 =229nm在处理复杂的混合物时,分辨率 R 是一个特别重要的参数,因为它衡量了每一次分离的程度,并且可以被准确识别和量化。例如分辨率 R=1 表明了不理想的分离效果,两个峰本质上并没有分离,更高的分辨率数值代表了更好的分离效果。在实际运行过程中,分辨率 R 至少达到 1.5 才会被认为是分离的。表1 显示了不同色谱柱分离 TSO 时的分辨率 R。在转移至 SFC-50 制备时,选择 iBT 色谱柱,因为它有最佳的分离效果,最容易实现转移,进样量可大大提高。表1. 使用 Sepmatix 8x SFC 筛选时不同色谱柱的分辨率色谱柱RiADMPC1.23iCDMPC1.74iCDCPC4.68iBT14.47cADMPC6.20cCDMPC4.22使用 SFC-50 进行结果优化为了确定改性剂对 TSO 的影响,下列每一种改性剂都在等度条件下使用:PrepPure iBT, 8um, 250 x 10mm 色谱柱;甲醇,乙醇,异丙醇,乙腈 (见图2)。▲ 图2. 左上-甲醇,右上-乙醇,左下-异丙醇,右下-乙腈。流速 =20mL/min,改性剂含量 =25%,温度 =40℃,背压调节器 =150bar,进样量 =150μL甲醇(偶极矩参数= 5[4])在对映体有足够的峰距的情况下,仅在 3 分钟内分离 TSO。乙醇(偶极矩参数= 4[4])作为极性稍小的改性剂,分离所需时间略大于 3 min。异丙醇(偶极矩参数= 2.5[4])在不到 3.5 分钟的时间内分离 TSO,这是由于异丙醇的极性较小。乙腈(偶极矩参数= 8[4])在 2.25 分钟内最有效地分离 TSO。然而,甲醇被用作进一步实验的改性剂,因为它的窄峰宽和对称峰有望带来高进样量。此外,它比乙腈毒性更小,价格也更便宜。由于流动相中改性剂的含量会因极性变化而对分离产生影响,所以采用了不同的甲醇含量(见图3)。▲ 图3. 左上 20% 甲醇,右上 25% 甲醇,左下 30% 甲醇,右下 35% 甲醇。流速 = 20mL/min,,温度 =40℃,背压调节器 =150bar,进样量 =150μL流动相甲醇含量由 20% 连续增加到 35%,运行时间逐渐缩短。当改性剂含量为 35% 时,运行时间可以从大约 3.5 分钟缩短至约 2.5 分钟。不过分辨率有所降低,对映体的峰宽也降低了。因此,在进一步的实验中,改性剂的浓度被设定为 35%。每根色谱柱都有可达到最大效率或理论塔板数的固有最佳流速。如果流量减小或增大,则用非最佳分离塔板数进行分离。与液相色谱法相比,SFC 可以使用更高的流速,而分离塔板数不会大幅减少[5]。因此,图4显示了流速对分离效率的影响。▲ 图4. 左 20mL/min,右 30mL/min,改性剂 % = 35%,温度 = 40℃,背压调节器 =150bar,进样量 =150μL随着流量的增加,运行时间和峰宽进一步减小。运行时间从大约 2.5 分钟缩短至 2 分钟以内。根据样品的不同,温度和压力对组分的分离和保留的选择性有影响。因此,在 100 bar 和 150 bar 以及 40℃ 和 50℃ 范围内进行了 4 次实验(见图5)。可以看出,温度和压力的变化对各自的分离没有明显的影响。因此,叠层进样时,温度控制在 40℃,背压调节器控制在 150 bar。▲ 图5.左上 100bar 和 40℃,右上 150bar 和 40℃,左下100bar 和 50℃,右下 150bar 和 50℃。流速 = 30 mL/min,改进剂 %=35%,进样量 =150μL为了提高分离效率,增加 TSO 的浓度和进样量(150μL ~ 250 μL)(见图6左上)。在这些条件下,基线分离仍然是可行的。图6(右上和下)显示了在与单次进样图 6 左上相同的实验条件下,叠层进样时间为 0.97min,即每 0.97 分钟进样一次。在这种情况下,每次额外注入都节省了平衡时间,提高了产能。最终采用基于时间的方法收集馏分。每次进样的紫外信号都表明了该方法具有良好的再现性(图6右上)。垂直线表示收集相应馏分的时间窗口。▲ 图6. 左上 250μL (0.1909 g TSO 的 6mL 甲醇溶液),右上叠层进样 TSO 的紫外信号,下最后的色谱图。流速 = 30 mL/min,改进剂 %=35%,温度 =40℃,背压调节器=150bar,进样量 = 250μL,进样次数 = 10次6结论在文中,使用 Sepmatix 8x SFC 仪器进行以 TSO 为分析物的手性柱筛选,将最合适的手性色谱柱,转移到 Sepiatec SFC-50 仪器进行制备。每根手性柱对手性物质的反应都不同,这就是为什么在纯化过程之前必须进行筛选的原因,作为标准物质的 TSO 可以在许多不同的手性柱上分离。随后在 SFC-50 上放大,并利用制备柱对等度纯化的方法进行优化。结果表明,改性剂的选择、改性剂在流动相中的比例和流量对分离效果有较大影响。在这些特定条件下,温度和压力的变化对分离效果的影响不大。在一般情况下,这两个参数也可以改变以优化分离条件。7参考文献https://doi.org/10.1038/s41570-023-00476-zSUPERCRITICAL FLUID CHROMATOGRAPHY, Terry A. Berger, Agilent Technologies, Inc., 2015PRACTICAL APPLICATION OF SUPERCRITICAL FLUID CHROMATOGRAPHY FOR PHARMACEUTICAL RESEARCH AND DEVELOPMENT, Vol. 14, M. Hicks and P. Ferguson, 2022 Elsevier Inc.Laboratory Chromatography Guide, ISBN 3-033-00339-7, by Büchi Labortechnik AG (Switzerland)http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2012.10.005

应用实例

2024.05.29

【瑞士步琦】新一代旋转蒸发仪闪亮登场 — R-80 小巧、灵活且高效!

随着实验需求的与日俱增,实验室里的设备也如雨后春笋般不断涌现。原本宽敞的实验室空间,如今被越来越多的仪器、装置和工具所占据,变得拥挤不堪。每一个角落都堆满了各种设备,几乎没有多余的空间可以让人自由活动,这给实验的进行带来了诸多不便,也让实验室的环境显得愈发局促和紧张。瑞士步琦作为旋转蒸发仪的发明者与开拓者,我们一直致力于解决实验人员的各种问题。在这个绚丽多彩的 4 月,我们于上海正式推出实验室空间的救星——旋转蒸发仪 R-80 解决方案,它身形小巧玲珑,却蕴含着巨大的能量。它的出现,让原本拥挤不堪的实验室变得井然有序,每一寸空间都得到了更合理的利用。步琦旋转蒸发仪R-80系统市面上尺寸最小的旋转蒸发仪R-80 旋转蒸发仪系统作为市面上最小的旋转蒸发仪,其占地面积小于为 1000cm2 左右,甚至小于两张 A4 纸。利用精巧而紧凑的设计,巧妙地化解了实验室空间不足的难题,为实验人员创造更加舒适、高效的工作环境。市面上最灵活的旋转蒸发仪为了保证 R-80 旋转蒸发仪在不同摆放角度下都能正常使用,我们在设计中引入了特制形状的升降把手、多功能组合夹具与 0-90° 可调的操作界面。在整机旋转 90° 后,其正面宽度仅为 290mm,进一步增加 R-80 在不同环境下的适应性。特制高效冷凝盘管全新设计的“等距盘管”冷凝器,当溶剂蒸汽在通过冷凝器时会被更加高效、均匀地冷凝。这让 R-80 旋转蒸发仪在保持小巧体积的同时也能保证高效蒸发溶剂样品。无电缆水浴锅R-80 的无电缆水浴锅可确保在更换加热水时轻松操作,其底座也可进行水平调节,以适合不同大小的蒸发瓶或添加防爆球。PTFE旋塞采用 PTFE 耐腐蚀旋塞,无需涂抹真空硅脂即可轻松旋开充气,有效避免样品污染和日产维护的烦恼。除了旋转蒸发仪 R-80 系统,本次一起推出的还有全新的真空泵与真空控制器。V-80/V-180真空隔膜泵V-80V-180极高空间利用率V-80/V-180 真空泵支持垂直堆叠摆放,可以在185mm×207mm 的有限空间内放入两台真空泵,这进一步优化了真空泵的空间利用率。变频耐用的真空泵V-80/V-180 真空泵采用变频设计,这既保证了运转时的噪音控制,也可以更加平顺地使系统达到目标真空值,有效避免易起泡样品暴沸。秉承 BUCHI 对质量的执着追求,V-80/V-180 采用了耐化学腐蚀的材料,能够应对最恶劣的环境。I-80/I-180真空控制器I-80I-180方便灵活I-80/I-180 控制界面的参数设置一目了然,方便用户操作。支持多种安装方式,可与 V-80/V-180 组成单独的真空源,保证在最方便的位置实现精准的真空控制。在真空阀的设计上,I-80/I-180 控制界面采用外置阀门单元,可结合用户现有的真空源进行基本的真空控制。随着旋转蒸发仪 R-80 解决方案的发布,我们可以更合理地利用实验室空间,为实验室带来了新的活力与可能。快让它成为实验室中的得力助手,陪伴您共同探索科学的奥秘,创造更美好的未来!

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2024.05.28

【瑞士步琦】合成生物学整体解决方案

瑞士步琦合成生物学整体解决方案合成生物学”合成生物学是在工程学思想指导下,按照特定目标理性设计、改造乃至从头重新合成生物体系,其本质是让细胞为人类工作生产想要的物质,用以解决人类食品缺乏、能源紧缺、环境污染、医疗健康等各方面的问题。它把“自下而上”的“建造”理念与系统生物学“自上而下”的“分析”理念相结合,利用自然界中已有物质的多样性,构建具有可预测和可控制特性的遗传、代谢或信号网络的合成成分,是现代生物学最具发展潜力的领域之一。其具体流程大致如下:▲ 合成生物学整体解决方案流程步琦公司作为先进的仪器设备供应商,拥有丰富的产品线,在合成生物学方面也为用户在发酵产物的后处理提供完善的解决方案。其中包括: 菌株/底盘细胞的保存合成生物学中常常需要保存和运输各种微生物菌种或底盘细胞,而冷冻干燥可以有效地保持微生物的活性和稳定性,延长其保存时间,并且便于长途运输。步琦公司在冷冻干燥领域拥有性能卓越的冷冻干燥仪 L-200/L-300▲ L-200产品特点:冷凝器温度 -55°C or -105℃捕冰能力:6kg or 无极限无需待机等待除冰灵活搭配组合,经久耐用 发酵过程的监控与调控通过将近红外光谱与计算模型相结合,可以实时监测反应过程中的代谢产物积累和底物消耗情况,优化如 pH 值、温度和氧气浓度等参数。通过实时监测这些参数,并对发酵系统进行反馈控制,可以提高生产过程的稳定性和产物质量。步琦公司在发酵监控领域拥有精准稳定的旁线近红外和在线近红外系统。▲ 在线近红外产品特点:多探头系统串联并联并行,灵活布局,节约光纤双灯源设计 发酵产物的浓缩处理发酵产物的浓缩对于后端的研究至关重要,通过旋转蒸发仪可以快速、高效地去除溶剂,使得样品浓缩,有利于后续的实验操作。此外,旋转蒸发仪还可以用于制备生物活性物质的溶液,如药物、酶等,以便进行生物学实验或应用。作为世界上第一台商用旋转蒸发仪的发明者,步琦公司在样品浓缩领域有着非常丰富和领先的经验。▲ R-300产品特点:防爆沸/自动蒸馏功能全自动操系统220℃ 加热 / 5L 水浴锅隔膜变频泵,节能安静浓缩样品的分离纯化合成生物学中合成的化合物往往需要进行分离和纯化,以获取目标产物。通过先进的色谱分离技术,可帮助用户更加快速的提纯合成产物,帮助去除杂质,得到纯净的目标物质。步琦公司拥有智能且卓越的中高压制备液相色谱 Pure 系列以及更加快速高效且绿色环保的超临界流体色谱。▲ Pure产品特点:中高压一体色谱封闭式馏分收集器双检测器系统智能化方法开发功能▲ SFC产品特点:高效快速的叠加进样功能封闭式馏分收集器独立的 GLS 气液分离器环保且经济的使用成本 极具创意的工艺开发根据生产数据和产物质量,不断优化工艺参数,提高生产效率和回收率,为后续大规模商业化生产做准备是必不可少的,而通过喷雾干燥的形式被广泛的应用于产物的连续生产与保存,并且与传统的离心或过滤方法相比,喷雾干燥通常能更有效地回收溶剂,降低能耗。而目标产物的微胶囊化的工艺模式也为未来的商业化提供灵感。步琦公司在这两方面也具备相当闻名且优异的喷雾干燥仪 S-300 以及微胶囊造粒仪 B-395。▲ S-300产品特点:智能自动化功能多参数严格控制高样品回收率防静电涂层设计▲ B-395产品特点:全自动样品微球化无菌卫生环境我想大家不难发现,在合成生物学整体流程中,步琦公司能够在多数阶段为科研人员提供强有力的设备,助力实验过程“万无一失”!

应用实例

2024.05.22

【步琦维修小课堂】凯氏定氮仪和蒸馏仪的蒸汽发生器中,水是否达到水位的简单排查

当仪器显示蒸汽发生器中水没有达到水位或报相关错误时,可做以下排查检查水桶中水量是否充足。检查水管口是否浸没在液面以下,水管是否完好,连接是否正常。检查开机时水泵是否能够正常运行。如水泵启动但声音偏大,并且不能吸水,则可能泵及管路空抽,可以用洗耳球或者注射器吸水,从水管口向里注水,同时手动点加水,水进入泵后,可将水管插入水桶中,继续运行水泵加水。如果不能启动则可能泵(货号:047874)损坏,需联系步琦工程师上门确定更换。如以上排查均正常,则需要将蒸汽发生器中的水放出测定流出液的体积,该过程需要准备 500mL 带刻度烧杯一个,软管一根,一字型螺丝刀一把,同时关机后等蒸汽发生器冷却(大约1小时)后再操作,正常体积应该约等于 350mL。▲ 测量蒸汽发生器中水量的工具▲ 测量蒸汽发生器中水量的管路连接▲ 蒸汽发生器正常水量如果水量达到要求,仍然报错,则可能液位传感器(货号:11057818)损坏,需联系步琦工程师上门确定更换。

操作维护

2024.05.22

【瑞士步琦】近红外协助生物发酵制药过程

近红外协助生物发酵制药过程近红外应用”1介绍抗生素是制药工业中最重要的产品之一,而生物发酵技术是抗生素的主要生产方法。生物发酵制药是利用微生物发酵对药物进行制备生产。目前可以利用发酵工程进行生产的药物原料主要是维生素、激素、抗生素和其他生物分子,根据不同发酵类型可分为微生物菌体发酵、维生素酶发酵、代谢产物发酵、生物工程菌发酵,主要生产的药物则是抗生素类药物、核苷酸药物、氨基酸类药物、激素类药物、维生素类药物等。作为有着悠久历史的中药,其资源异常丰富,在传统生产中也借助发酵这一技术。中药发酵将药食同源的中药材进行萃取提纯,再与优选的益生菌菌群进行厌氧发酵,在合适的条件下,对中药中的有效成分进行转化,将大分子中药经过微生物的作用转化为能够被人体肠道直接吸收的小分子成分,使其药效能更快速地作用于患者。尽管中药非常早期地利用了发酵方法,但其复杂的过程和较为主观的控制手段使得药物质量难以得到有效保证。随着现代生物发酵制药技术在国内逐步发展,传统中药的生产也渐渐迈开现代化的步伐。目前利用现代生物技术可以高效稳定地生产中药。不过无论是哪种生物发酵制药技术,都需要对反应过程进行监控,确保微生物在合适的环境中进行反应。这其中不乏对发酵过程中稳定、压力、湿度、酸碱等条件进行定期监测,还有一项重要指标能够反映当前发酵进行的程度,那就是效价。效价是微生物发酵生产的某种活性物质的含量或活性程度,通常随着发酵时间而增加。通过测定当前发酵液中的效价可以辅助判断发酵过程和其中主产物的浓度,因此需要定期频繁地测定发酵液中的效价。常规检测手段就是取样进行色谱分离,通过相关物质的峰面积等效得出当前效价,也可通过公式进一步换算成具体的活性浓度。虽然色谱检测的方法相对准确,但重复批量的检测依旧会带来不小的工作压力。近红外光谱分析通过无损快速扫描发酵的光谱信息,借助化学计量学方法,就能在数十秒内检测出样品的效价含量,由于近红外是检测样品分子中氢键的倍频和合频振动吸收信息,多数有机物含量以及水分和 pH 也可同时测定。下面介绍的一个案例就是测量发酵液中的效价含量,采用的是 BUCHI NIRFlex N-500 的标准固体测量池搭配透反射盖,实现对发酵液体的光谱扫描。所有检测样品在实验前只经过简单过滤去除杂质。2实验条件检测波长 4000-10000cm-1,分辨率 8cm-1,扫描次数 32 次,每个样品测量三次,共计 171 个样品,其近红外光谱图如下所示。▲ 发酵液近红外光谱图由于效价是根据色谱出峰的峰面积表示,而峰面积数值较大,建模时对其数据大小进行转换,所建模型的效果如下所示。▲ 发酵液效价参考值(横坐标)与预测值(纵坐标)分布散点图发酵液效价模型范围为 1.06 至 64.91,SEC 和 SEP 分别为 1.5 和 1.8,说明该模型能够对发酵液的效价进行快速准确的测定。3结论▲ 步琦傅里叶近红外光谱仪 NIRFlex N-500上述案例中使用的是步琦一款采用偏振干涉的傅立叶变换型的近红外光谱仪,相较经典的傅立叶光谱仪,具有更小巧的造型和更强大的抗震动能力。模块化的测量池可以随时随地方便更换,满足各种形态样品的检测需求。双灯构造及满足多国药典和审计追踪要求的配套软件,为工业生产分析提供便利的解决方案。如果有近红外检测需求,欢迎通过以下方式与我们取得联系。

应用实例

2024.05.20

【Conference】瑞士步琦参加第十九届益生菌与健康国际研讨会

2023年,我国食品工业高质量发展进程稳步推进,产业发展的韧性、活力和潜力继续显现,益生菌作为食品工业的重要组成部分,继续保持较好发展态势。随着益生菌科学研究的不断深入,多学科的交叉融合,益生菌与宿主健康的科学内涵不断明晰,越来越多创新产品涌入市场,益生菌行业呈现出日新月异的发展新风貌。为了有效助力具有自主知识产权益生菌菌种的产业转化和创新应用,强化科技对益生菌产业创新实践的重要支撑,中国食品科学技术学会将于 5月22-24日 在广州举办第十九届益生菌与健康国际研讨会,会议将以开阔性的国际视野汇聚益生菌行业年度科技与产业创新思路,凝炼科技与产业发展新需求,优化创新体系布局,以科技创新推动我国益生菌产业高质量发展,服务“健康中国”战略。瑞士步琦作为全球领先的实验室技术研发、质量控制和生产领域的解决方案提供商,携带微胶囊造粒仪 B-395 赞助了此次会议。欢迎各位老师莅临参观!✦  ++广州白云国际会议中心国际会堂2024年5月22日~24日展台号B15参展仪器1微胶囊造粒仪 B-395特点:条件极其温和,室温和生理条件下进行,完全保留活性多种精密开口不锈钢喷嘴,颗粒粒径大小可选颗粒粒径范围 150μm – 4mm 可选,重现性好,粒径分布窄(满足 GMP 要求配备频闪灯,方便过程参数调节选配同心喷嘴套组,流体振动喷嘴套组等,满足多种不用应用

企业动态

2024.05.20

【瑞士步琦】天然化妆品创新成分开发知多少?

瑞士步琦天然化妆品创新成分开发知多少化妆品应用”1介绍多年来,世界化妆品市场一直在不断发展,法国凭借其所传达的品牌形象和质量成为该领域的主要参与者[1]。尽管有这种营销优势,但化妆品公司必须创新,适应消费者的新期望,势必要转向更“天然”的化妆品[2]。消费者越来越关注他们购买产品的成分,并逐渐拒绝合成物质的添加,在他们心目中,合成成分是危害健康和污染的代名词。为了满足这些新兴趋势的需求,全球化妆品行业一直在寻找传统合成成分的天然替代品,为了实现这一目标,他们倾向于使用更尊重环境的可持续工艺进行生产[3]。在这场“绿色优化”的竞赛中,技术进步是一项不可否认的资产。步琦开发的设备可以在开发天然化妆品活性成分的经典过程中实现几个阶段的自动化和可持续优化(图1)。▲ 图1:天然来源的化妆品活性成分的开发过程[4]2化妆品活性成分的研发过程天然活性成分的开发是一个漫长而微妙的过程,通常需要几个阶段。2.1   原料供应这个过程的第一阶段是为化妆品工业寻找有潜在价值的蔬菜原料。原料的预选是根据几个标准进行的:创新方面(存在从该物种或相关物种开发的化妆品成分等),立法(受保护物种,名古屋议定书等),相应提取物的生物活性或建立可持续和有利可图的供应链的可能性,严格来说,所有参数都是考虑到上游研发阶段。筛选众多原料是必要的,以便选择那些可能是创新化妆品活性物质发展的起源物质。2.2   提取预先选定的原料筛选大量预先选定的植物必然需要进行多次提取。迄今为止最常用的提取技术是冷浸或热浸,索氏萃取设备被广泛使用,而且产量更高,使用该系统也更经济和环保的。为了优化萃取步骤,可以使用步琦全频固液萃取仪 E-800(图2)。该技术基于索氏原理,可以在完美控制的温度条件下进行 6 次平行萃取,从而加速萃取步骤。该系统的各种特点是可以使用具有广泛极性的溶剂,并且通过调整液位传感器的高度,可以根据要工作的萃取物的体积轻松调整萃取腔体的体积。由于该系统是由玻璃制成的,因此可以直观地跟踪提取过程(图3),这有利于提取后的清洁阶段。加热功率控制的精度,以及系统达到这个设定点的速度,使得温度控制非常严格。▲ 图2:步琦全频固液萃取仪 E-800▲ 图3:平行萃取 3 种不同原料物质表1:黑加仑皮在热浸过程中所使用的参数参数热浸法原料/溶剂比例1/10 (20g/200g)溶剂EtOH时间(h)2H温度(℃)80-85 ℃压力(KPa)常压表2:全频固液萃取仪 E-800 参数参数E-800原料/溶剂比例1/10 (20g/200g)方法索氏萃取溶剂EtOH循环数5加热等级-萃取10阀门开启时间Long淋洗(min)10加热等级-淋洗10干燥时间(min)-加热等级-干燥-萃取完成后,溶剂或溶剂混合物的去除是必要的,最常用的技术是使用旋转蒸发仪对溶剂进行真空蒸馏。高性能冷凝器的表面积更大,可以同时冷凝更多的蒸汽,因此可以在最佳蒸馏参数下实现更快的蒸馏速度。当 Rotavapor® R-300 配备 B-305 水浴锅、F-314 冷水机、I-300 Pro 控制器、V-300 真空泵和泡沫传感器干燥没药水醇提取物时,得到以下结果(表4)。表3:没药提取物蒸发参数_标准冷凝器高效冷凝器表面积 [cm2]15003000水浴温度 [℃]45冷水温度 [℃]5压力 [mbar]10转速 [rpm]250总体积 [mL]50蒸发时间 [min]47.5832.28蒸发速率 [mL/h]6393当高性能冷凝器与没药的最佳温度条件下使用时,观察到 50mL 没药提取物体积的蒸发显著节省时间。▲ 图4:Rotavapor®R-300▲ 图5:Rotavapor®R-300的泡沫传感器2.3   植物化学特性和生物活性研究这些提取物的生物活性是通过测试来评估的,通常是在体外,根据所寻求的活性类型进行选择。美容学中最常见的测试是酶或化学还原测试,用于测量提取物的抗氧化性(铁还原-抗氧化能力测试,ORAC [氧自由基吸收能力]抗氧化指数等),美白(左旋多巴),抗炎,抗透明质酸酶或抗胶原酶活性。其中有部分非常具体的测试,也可以在体外或体内模型上进行。2.4   活性分子/活性分子家族的鉴定一旦选定了感兴趣的物质种类,下一步就是分子/活性分子家族的特征确定。在新开发的方法中,步琦开发了一种功能齐全且具有双重功能的 C-850 快速制备系统(图6),其软件界面非常容易操作。在系统内集成紫外和 LED 双检测器对于控制化合物的分离也是一个相当大的优势。C-850 快速制备系统结构非常紧凑,馏分收集器是一个封闭系统,能够节省实验室空间,并且可以在没有特定的工作台的情况下使用。系统各部分方便维护也是该设备的一大优点。▲ 图6:Pure Flash-prep C-850这样分离的组分可以从植物化学的角度进行表征,并可以对其生物活性进行评估。这样就有可能确定产生活性的化合物或化合物家族。2.5   萃取优化鉴定活性分子家族对于优化植物的提取条件至关重要,全频固液萃取仪 E-800 提供了同时测试不同萃取方法(包括不同溶剂)的可能性,因此通过促进萃取优化的这一阶段,再次支持化妆品成分开发的选择。随后,通过 Rotavapor®R-300 浓缩获得的不同提取物的化学特征和产量,允许选择最佳提取条件。2.6   提取物变色和/或除臭根据所使用的原料、溶剂和/或提取条件的不同,所获得的提取物在配制成成品时可能具有未知的颜色和/或气味。事实上,这种成分的掺入可能会引起成品化妆品带有强烈着色或显著气味,这将特别取决于配方成分的浓度。为了满足配方研究者和最终消费者的期望,需要对提取物进行脱色和/或除臭阶段。分子蒸馏或活性炭吸附等不同技术可用于此阶段的脱色(图3)和脱臭[5]。▲ 图7:对 3% 浓度配方的李子提取物进行优化脱色对比,未脱色(左)和脱色(右)2.7 成分配方制备获得的植物提取物通常呈现糊状,无法配制,因此有必要对其进行加工。应配方研究者的要求,同时为方便将成分并入化妆品配方中,化妆品成分有液体和固体两种形式。液体成分是通过在与化妆品配方,如乙二醇或植物油相容的溶剂中直接浸渍目标植物,或通过在适当的液体中稀释活性提取物而获得的。此外,固体状态的活性成分,是通过例如干燥或雾化处理进行制备。喷雾使提取物沉积在载体材料上,如麦芽糊精,以获得均匀、稳定的粉末,可以很容易地加入到化妆品配方中。这步处理和条件优化(图7)可以很容易地使用小型喷雾干燥仪 S-300 进行(图8)。雾化条件的优化使 S-300 的产量可以超过 70%,这对于工业转换来说是非常鼓舞人心的。▲ 图8:步琦小型喷雾干燥仪 S-3003结论开发天然来源的化妆品活性成分的传统方法不断受到质疑,我们需要优化方法并确保其符合当前的可持续发展政策。活性物质开发阶段必须适应所使用的原材料,同时支持“绿色”生态提取和研发技术,用以开发已证实活性的成分物质。在寻找优化的过程中,步琦已被证明是首选的玩家;其仪器设备可以提供更好的实验可重复性和更高的结果精度,同时使研发者的任务更加容易,减少方法开发过程对环境的影响(节能,减少溶剂量等)。4参考文献Business France, Fiche secteur Cosmétiques 2017, 2017.A. Beyer, Benchmarking Co. 2009.Agrobiobase 2011.H. Plainfossé, P. Burger, S. Azoulay, A. Landreau, G. Verger-Dubois, X. Fernandez, Development of a Natural Anti-Age Ingredient Based on Quercus pubescens Willd. Leaves Extract A Case Study. Cosmetics. 2018, 5,15.A. Kerdudo, P. Burger, F. Merck, A. Dingas, Y. Rolland, T. Michel, X. Fernandez, Comptes Rendus Chim. 2016, 19, 1077.H. Plainfossé, P. Burger, G. Verger-Dubois, X. Fernandez, Eco-conception of an anti-age ingredient based on Quercus pubescens Willd. Leaves extract. H&PC Today. 2018, 13(4).

企业动态

2024.05.17

聚焦环境——瑞士步琦助力环境分析

聚焦环境步琦助力环境分析环境应用”溶剂萃取是环境污染物和残留物分析中重要的前处理部分。瑞士步琦提供的全频固液萃取仪 E-800 及快速溶剂萃取仪 E-914/E-916,在处理环境样品时可以提供自动快速且可靠的萃取过程。 本文介绍了废水中油脂的测定、空气过滤膜中二噁英的测定以及沉积物中多氯联苯和多环芳烃的测定方法。所有的实验结果均符合预期值。1介绍环境可持续性问题已逐渐成为科学界和民众关心的问题。人们也更加重视环境保护和人类健康免受污染这些问题。▲ 图1:良好的环境是健康和高质量生活的先决条件为了有效地预防或清除污染,用于环境分析的过程和方法必须稳定、通用且数据可靠。瑞士步琦向环境相关企业、环境检测实验室和政府部门提供可靠的样品制备和分析的先进解决方案。我们的解决方案包括空气、土壤、沉积物、淤泥、废物和废水等样品前处理和测试方案。测定环境和食品样品中的污染物需要高效的样品前处理方法,而优化样品前处理是实现环境分析的关键因素。本文将展示使用瑞士步琦公司的全频固液萃取仪E-800 萃取废水中的油脂、沉积物中的PAH 和PCBs以及大气中的 PCDD/F 等应用的实验参数和最终结果。固液萃取法通常是测定固体和半固体基质中有机污染物分析程序的一部分。萃取质量的好坏直接影响到结果的准确性和样品的输出量,是整个分析过程的瓶颈。因此有效可靠的萃取是成功测定环境污染物的先决条件。索氏萃取法作为一种公认的萃取标准方法,在环境分析领域得到了广泛的应用。在过去的二十年中,现代的萃取方法,如加压溶剂萃取、超声波萃取和微波萃取等也进入了环境分析的官方标准方法中[1, 2]。与传统索氏萃取相比,这些现代萃取方法的主要优点是萃取时间短,样品输出量高。本文主要研究使用经典的索氏萃取法提取环境样品。在其它文章中可以看到使用步琦的快速溶剂萃取仪 E-914 / E-916 高效地测定环境污染物[3-5]。▲ 图2:快速溶剂萃取仪 E-916所有的现代萃取方法都是需要与索氏萃取技术进行比较和验证。不少文献也比较了这些不同的萃取技术,例如[6-8]。传统索氏萃取方法的主要缺点是萃取时间长、溶剂消耗量大。使用萃取设备可以缓解这些问题,同时也可以优化环境分析。▲ 图3:全频固液萃取仪 E-800瑞士步琦公司的自动索氏萃取装置的应用实例包括土壤中 PAH 的测定[9],大气中 PBDEs 的测定[10],从沉积物中提取类二噁英 [11],沉积物中 PCB、PAH 和 OCP 的测定[12]以及通过测定生物体内的生物积累量获取 DDT 的污染情况[13]。以下是瑞士步琦公司部分环境应用研究。2废水中的油脂油是最常见的水污染类型和形式之一。由于油脂很容易传播,即使是少量的油也可能对水环境造成危害[14]。在大多数国家,法规会限定地表水和地下水中的油脂含量。▲ 图4:废水“油脂”被定义为可被回收的任何物质,如溶于溶剂的物质。 它包括由溶剂从酸化样品中萃取的其他物质(如硫化合物、某些 有机染料和叶绿素),并且在测试期间不挥发[15]。油脂可在溶剂萃取后采用重量法或红外吸收法测定。与红外和重量测定方法不同,GC-FID 法提供了 获取油脂馏分中不同烃类详细信息的可能性[14]。根据标准 AWWA5520 Part D 索氏萃取[15],在棉布和纸滤盘上过滤酸化的废水样品。再用正己烷萃取干燥的过滤器。然后用重量法测定正己烷萃取物中的残留物,并与废水样品的油脂含量相对照。样品中加入了经认证的参考物质(葵花籽油),其含量为 100ppm。对该样品进行了过滤、萃取,并测定回收率。提取时间为 4h,符合标准方法[15]的要求。结果如表1所示。表1:测定空白及油脂回收率(平均值,n=3,括号内 rsd %)空白4.6mg (11.3%)回收率102.4% (2.5%)3空气中的二噁英空气质量是人们日益关注的健康话题,特别是在城市地区,人类活动与污染源共存。目前人们正关注空气中的颗粒物(PM),这是一种存在于空气中由微小颗粒和液滴 组成的混合物,并可通过呼吸进入肺部和血液循环。二噁英是一种氯化芳香族碳氢化合物,是一些热力过程的副产品,可能被释放到环境中并附着在颗粒物上。空气样品被采集至 PUF 或石英纤维滤膜。依据 EPA 纲要 TO-9 [16] 和 EPA 方法1613 [17] 的二噁英测定方法,分析前采用索氏萃取法提取含有污染物的滤膜。提取前先用索氏提取仪预萃取作为清洗步骤。以甲苯为溶剂,在索式热萃取模式下对加标的滤膜萃取约 13h, QFF 在索氏萃取模式下以二氯甲烷为溶剂萃取约 12h。浓缩后的萃取液通过 GC-MS 进行分析。测定的回收率达到 50-150%,在 EPA 1613 [17]规定的范围内(见表2)。表2: 测定二噁英在加标 PUF 过滤器上的回收率[%],n=4。空白样品中无可定量分析物回收率 (rsd%)回收率 (rsd%)13C 2,3,7,8 TCDF94.6 (16.7%)13C 2,3,7,8 TCDD115 (14.7%)13C 2,3,4,7,8 PeCDF88.1 (7.00%)13C 1,2,3,7,8 PeCDD60.0 (28.3%)13C 1,2,3,4,7,8 HxCDF60.4 (10.3%)13C 1,2,3,6,7,8 HxCDF55.1 (8.47%)13C 2,3,4,6,7,8 HxCDF119 (8.65%)13C 1,2,3,4,7,8 HxCDD99.6 (4.19%)13C 1,2,3,6,7,8 HxCDD99.6 (7.13%)13C 1,2,3,4,6,7,8 HpCDF95.7 (3.89%)13C 1,2,3,4,6,7,8 HpCDD88.9 (3.62%)13C OCDF80.2 (3.30%)13C OCDD92.0 (4.86%)4沉积物中的PCBs多氯联苯(PCBs)是指以 1-10 个氯原子取代联苯为基础的 一类有机化合物。有 209 种不同的同系物。为了简化描述,通常使用从 1 到 209 的数字指代它们。▲ 图 5: 多氯联苯分子式多氯联苯具有毒性、持久性,可在陆生和水生生物系统中积累,广泛存在于环境中。在全世界范围内已经被禁止生产和使用。根据 EPA 3541[19]方法采用索式热萃取模式提取 SETOC沉积物样品[18]。使用丙酮:正己烷(1:1)为溶剂。使用BUCHI Syncore® Analyst将提取物浓缩至1mL。从沉积物样品中提取多氯联苯的时间为 3h,测定结果与实际值一致。达到3h萃取时长后,再延长提取时间也不会提高回收率 (见图5)。▲ 图5: 提取 2h、3h 和 4h 后 PCBs 的回收率,误差条表示 SETOC 样品测定值的可接受误差范围(+/-标准差).5沉积物中的PAHsPAHs 存在于煤碳化生产的石油、煤和焦油中。它们也 存在于烤肉、香烟和汽车尾气中。多环芳烃是一种具有持久的并普遍存在的污染物,其中一些具有致癌性、诱变性和致畸性。目前发现的有 100 多种不同的多环芳烃,但通常只分析美国环境保护局(EPA)定义的 16 种多环芳烃。采用索式热萃取模式,按 EPA 3541 方法[19]提取 SETOC 沉积物样品[18]。以正己烷:丙酮 1:1 为溶剂, 总萃取时间为 3h,最终测定结果在 SETOC 样品所示的参考值范围内(见图6)▲ 图6: 用全频固液萃取仪 E-800 测定沉积物样品中多环芳烃的含量。误差条表示 SETOC 样本的标准 s 值的可接受范围(+/-标准差)6结论BUCHI 针对环境样品提供了一个完整的前处理解决方案。即使对于复杂及较难分析的样品,也能实现快速高效率的提取,保证了较高的回收率和较低的结果偏差。环境4参考文献EPA 3545A Test Methods for Evaluating Solid Waste:SW-846. Pressurized Fluid ExtractionLeBlanc, G. 2001. A review on EPA sample prepara- tion techniques for organic compound analysis of liquid and solid samples. LCGC 19(11), 1120-1130.BUCHI Labortechnik. 2008. Determination of PAHs in soil. Best@BUCHI 51/2008.BUCHI Labortechnik. 2016. High throughput ex- traction for dioxin determination. BUCHI Labortechnik. 2015. Improved workflow in dioxin and PCB analysis.Sporring, S. et al. 2005. Comprehensive compari- son of classic Soxhlet extraction with Soxtec extraction, ultrasonication extraction, supercritical fluid extraction, microwave assisted extraction and accelerated solvent extraction for the determination of polychlorinated biphe- nyls in soil Journal of Chromatography A, 1090, 1-9.Camel, V. 2001. Recent extraction techniques for solid matrices-supercritical fluid extraction, pressurized fluid extraction and microwave-assisted extraction: their potential and pitfalls. Analyst, 126, 1182–1193Itoh, N. et al. 2008. Comparison of low-level polycy- clic aromatic hydrocarbons in sediment revealed by Sox- hlet extraction, microwave-assisted extraction, and pres- surized liquid extraction. Anal. Chim. Acta. 612, 44–52.Khan, Z.; Troquet J., and Vachelard, C. 2005. Sample preparation and analytical techniques for determination of polyaromatic hydrocarbons in soils-review paper. Int. J. Environm., 2(3), 275-286.Degrendele, C. et al. 2018. Are atmospheric PBDE levels declining in central Europe? Examination of the seasonal and semi-long-term variations, gas–particle partitioning and implications for long-range atmospheric transport. Atmos. Chem. Phys., 18, 12877–12890Macikova, P. et al. 2014. Longer-term and short- term variability in pollution of fluvial sediments by diox- in-like and endocrine disruptive compounds. Environ Sci Pollut Res 21, 5007–5022.Mitra, S. et al. 2019. Characterization, source iden- tification and risk associated with polyaromatic and chlo- rinated organic contaminants (PAHs, PCBs, PCBzs and OCPs) in the surface sediments of Hooghly estuary, In- dia, Chemosphere. 221, 154-165.Cotronell, S. et al. 2018. Contamination Profile of DDTs in the Shark Somniosus microcephalus from Greenland Seawaters. Bulletin of Environmental Con- tamination and Toxicology. 101, 7–13.Ming, Y. 2016. Oil in water analysis, AWE Interna- tional, published 6th Sept. 2016AWWA (American Water Works Association) Stan- dard method 5520, Part D Soxhlet.EPA Compendium TO-9A. 1999. Compendium of Methods for the Determination of Toxic Organic Com- pounds in Ambient Air.EPA 1613 1994. Tetra-through Octa-Chlorinated Dioxins and Furans by Isotope Dilution HRGC/HRMSSETOC Round Robin, sample 777EPA 3541 Test Methods for Evaluating Solid Waste: SW-846. Automated Soxhlet

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2024.05.14

瑞士步琦参加第五届乳及乳制品检测与控制技术交流会

第五届乳及乳制品检测与控制技术交流会将于 2024年5月9日至5月11日 在 上海星河湾酒店 盛大召开。该会议于 2019 年首次举办,几年间已成为乳品企业、政府机构、高等院校、乳品行业协会、仪器设备厂商、第三方检测机构的高效交流平台。本次会议围绕乳及乳制品产业链上技术重难点展开讨论,分享最新的研究成果,分析未来的发展趋势。届时步琦公司将携带近红外光谱仪 ProxiMate,在线近红外 NIR-Online X-One 以及凯氏定氮仪为大家带来完整的乳制品解决方案。✦  ++上海星河湾酒店2024年5月9日~11日展台号V03参展仪器1近红外光谱仪 ProxiMate特点:Flux Console 联网功能可在线管理仪器,不必亲临现场便能了解生产状态ProxiMate 是专为旁线检测而设计的稳定且易用的近红外光谱仪触控式的交互界面方便用户操作AutoCal 自动建模功能极大降低模型管理门槛IP69 认证更能适应各种复杂生产环境的检测适用领域:乳制品食品饲料农产品2在线近红外 NIR-Online X-One特点:气体及粉尘防爆设计,无需其他防爆柜密切监控关键参数,校正生产偏差实时快速扫描光谱,并持续反馈至中控系统,稳定监测生产状况安装简便,稳定耐用,可应对室外恶劣天气适用领域:乳品粮油饲料农产品3凯氏定氮仪特点:自动蒸馏 AutoDist 功能蒸汽梯度设置,降低特殊样品的反应剧烈性OnLevel 传感器,确定蒸馏体积、停止蒸馏进程、结果可重复安全传感器,实时监测运行仪器状态、保证实验安全适用领域:食品、饮品农产品、饲料化学品环境样品测试

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2024.05.08

【精彩回顾】2024 瑞士步琦新品发布会圆满落幕!

在这春意盎然的四月,我们相聚在充满活力和现代化的城市——上海,共同见证瑞士步琦全新一代旋转蒸发仪R-80。感谢各位合作伙伴在百忙之中莅临本次新品发布会,与我们共襄盛举,共鉴未来!步琦数十年来始终保持市场领军地位。多年来,推出了诸多创新产品,R-80 是其众多革新仪器中的最新产品。R-80 承袭了许多已成为 BUCHI 品牌代名词的先进功能,同时还具有占用空间更小、能耗更低、更加经济实惠的优点。发布会在步琦中国总经理刘育林的致辞中拉开帷幕。旋转蒸发产品经理奚若阳、干燥造粒产品经理杨祎晨进行了精彩的分享。现场直击▲签到现场▲步琦中国总经理刘育林先生致辞▲ 新产品揭开神秘面纱▲ 产品经理奚若阳介绍新品 R-80▲ 产品经理杨祎晨介绍 L-250 新品,冻干解决方案▲ 发布会集体照下午我们分成三组进行 Workshop。主题分别为 R-80/V-80/I-80、R-80/V-180/I-180 安装、R-80 配置,冷冻干燥应用解决方案。晚宴上,步琦员工和合作伙伴们强强联手完成各种游戏:Emoji 猜成语、听歌猜歌名、超级猜猜猜等。更有伙伴们高歌一曲,把整个活动又推上了高潮。此次新品发布会圆满成功,在此预祝步琦新产品大卖,希望日后步琦为科研工作者提供更多智能化、自动化的产品。

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2024.05.08

【瑞士步琦】利用喷雾干燥实现mRNA-LNP的气管内递送

利用喷雾干燥实现 mRNA-LNP 的气管内递送喷干应用”1介绍mRNA 疫苗是指将含有编码抗原蛋白的 mRNA 导入人体,直接进行翻译,形成相应的抗原蛋白,从而诱导机体产生特异性免疫应答,达到预防免疫的作用(图1)。mRNA 疫苗的优势主要有:研发周期短、抗原选择范围广,任何可成蛋白的抗原序列均可被选择mRNA 疫苗的半衰期与免疫原性可通过修饰和递送系统来人工调节,由于不进入细胞核,无感染或插入突变的风险,安全性更高多种修饰后的 mRNA 更稳定,在细胞质中被高效摄取和表达;mRNA 疫苗具备自我佐剂特点,因此表现更强的免疫原性,有效性更高可通过体外转录技术快速、廉价地大规模生产 RNA 疫苗,在掌了病毒基因序列后即可在 40 天内完成疫苗样品的生产制备                                                                       ▲ 图1. mRNA 疫苗通过转染抗原呈递细胞引起免疫注射的 mRNA 疫苗被抗原呈递细胞内吞。mRNA 脱离核内体进入细胞质后,被核糖体翻译成蛋白质。翻译的抗原蛋白可以通过几种方式刺激免疫系统。细胞内抗原被蛋白酶体复合物分解成更小的片段,片段通过主要组织相容性复合体(MHC) I类蛋白在细胞表面展示给细胞毒性T细胞。活化的细胞毒性T细胞通过分泌细胞溶解分子,如穿孔素和颗粒酶,杀死被感染的细胞。此外,分泌的抗原可以被细胞摄取,在核内体内降解,并通过 MHC II 类蛋白在细胞表面呈递给辅助性T细胞。辅助性T细胞通过刺激 B 细胞产生中和抗体,并通过炎症因子激活吞噬细胞,如巨噬细胞,促进循环病原体的清除。BCR:B 细胞受体;ER:内质网;TCR:T 细胞受体。随着 COVID-19 的全球大流行,mRNA 疫苗已经作为一种新兴的疫苗技术进入市场,LNPs 是目前 mRNA 递送时克服体内给药时的许多胞外和胞内屏障的首选载体。然而大多数 LNP mRNA 疫苗需要严格控制的冷链基础设施。喷雾干燥是一种快速、可扩展且连续的过程,可生产室温稳定且适合吸入的细粉,并可以通过喷雾干燥工艺参数来控制粉末的物理性质。但喷雾干燥过程中,LNP 也要承受剪切应力、液体界面膨胀和收集过程中热脱水引起的应力。以下分享阿斯利康应用 BUCHI 小型喷雾干燥仪 B-290 实现脂质纳米颗粒实现对 mRNA 的气管内递送。小型喷雾干燥仪 B-290                                                                                ▲ 小型喷雾干燥仪 B-290干燥参数_入口温度90℃出口温度54℃抽气机效率100%雾化气流1850 L/h进料速率2mL/min2方法该团队首先关注了磷脂和缓冲液对 LNP 本身温度敏感性的影响。由于 DSPC 的相变温度(Tm)为 55℃,接近喷雾干燥器的出口温度,而 DOPE 是一种不饱和磷脂,Tm 为 -16℃,可改善LNP的温度敏感性,并有研究发现 DOPE 替代 DSPC 可以提高 mRNA 递送效率[1]。LNP 中可电离脂质的 pKa=7,因此 pH 值的大幅变化可能会导致颗粒结构和稳定性的变化,该团队测试了广泛使用的 PBS 和 20 mM Tris 缓冲液的影响。该团队将四种不同的 LNP 配方(DSPC PBS;DSPC Tris;DOPE PBS;DOPE Tris)在不同温度范围孵育以模拟LNP配方和喷雾干燥过程的温度跨度。发现 DOPE Tris 组在高达 75℃ 的温度下仍保持稳定,并且在 80℃ 时仅损失约 20% 的 RNA。在喷雾干燥的温度条件下更稳定不等于能更好地承受喷雾干燥过程,因此该团队还验证了 DOPE Tris LNP 能更好地承受喷雾干燥过程。DOPE Tris 组在喷雾干燥和复溶 306Oi10 和 MC3 LNP 时均增强了颗粒稳定性。 Tris 缓冲液在喷雾干燥方面优于PBS,虽然两种缓冲液的 pH 值都会随着温度的升高而降低,但 Tris 的变化率比 PBS 快 10 倍,这意味着Tris缓冲液从 25°C 升至 37°C 时 pH 将减少 0.3 个单位,而 PBS 仅减少 0.025 个单位,pH 值的降低可能会确保RNA仍被封装在LNP中。作者还发现优化的LNP配方(DOPE Tris)显著提高了评估了 LNP 在肝细胞癌细胞系 HepG2 和肺支气管细胞系 16HBE 中的摄取,与 4°C 下储存的液体 LNP 制剂相比,通过喷雾干燥处理并在室温下储存的 LNP 具有更好的稳定性、更高的颗粒封装效率以及更显著的蛋白质表达(图2)。                        ▲ 图2. 通过修改配方,以 DOPE 代替 DSPC、Tris 缓冲液代替 PBS,可以提高喷雾干燥后 LNP 的稳定性(A) 使用 DSPC 和 PBS 生产的 LNP 制剂对温度升高敏感(B) 当 DSPC 替换为 DOPE、PBS 替换为 Tris 时,喷雾干燥和重新分散后LNP颗粒的稳定性显著提高。(C) LNP 制剂在喷雾干燥(SD)后稳定性提高,导致  mRNA 对 HepG2 和 16HBE 细胞具有良好转染效率。比例尺=100μm。**P该团队发现,当喷雾干燥 LNP 制剂时,在干燥塔内可观察到均匀的薄膜,在旋风分离器中可观察到薄膜沉积物,这是因为在无赋形剂的情况下,喷雾干燥 LNP 制剂中每种成分的固化机制将根据其扩散速率和溶解度而有所不同,引起各组分分离。因此该团队优化了 LNP、海藻糖、三亮氨酸的比例[2]。发现 LNP 与三亮氨酸的比例为 1:4 至 1:5 时,可以减少旋风分离器中的粉末损失,并进一步提高复溶后的 mRNA 封装效率,将 LNP 负载从 1.5% 增加到 5%。喷雾干燥后,通过 SEM 分析粉末粒径和表面结构,通过 CryoTEM 分析复溶的颗粒。发现喷雾干燥后复溶的 LNP 样品为尺寸范围变化更大的致密小囊泡(图3)。                                                                            ▲ 图3. 喷雾干燥配方的优化(A) 粉末配方中三亮氨酸(LLL):LNP 比例的优化可将旋风分离器中的损失降至最低,并随着重构后 RNA 封装效率 (%EE) 的增加而实现产量最大化。(B) 喷雾干燥产生 LNP 的扫描电镜照片。当三亮氨酸(LLL)的浓度从 3% 增加到 15% 时,颗粒的形态逐渐从光滑的表面变成高度波纹状的表面。(C) 新制 LNP 和喷雾干燥 LNP 代表性冷冻透射电子显微镜图片。与新鲜 LNP 相比,喷雾干燥 LNP 复溶后被包裹在致密的衬里。比例尺 =200nm。 接下来,该团队验证了 mRNA LNP 粉末制剂在体内的功能性递送。使用 Penn-Century Dry Powder Insufflator™-4 装置对动物进行给药,该装置可以将粉末直接输送到大鼠的肺部。肺组织切片上的免疫组化(IHC)显示出强烈的 eGFP 阳性细胞染色。这些细胞根据其定位、形态和免疫荧光标记被鉴定为细支气管上皮细胞、II 型肺细胞和/或巨噬细胞。尽管仅识别出少数 eGFP 阳性细胞,但这些阳性细胞的染色强烈、且无背景噪点,表明 eGFP mRNA LNP 在喷雾干燥后吸入给药,可在肺部产生清晰的 eGFP 表达。                                                                  ▲ 图4. 肺中的体内摄取和蛋白质表达(A) 大鼠肺示意图(B) 研究设计的示意图。单次给药后 24 小时或连续3天每日给药后 24 小时处死大鼠。给药方式包括气管内(IT)滴注含有 eGFP mRNA LNP 的喷雾干燥制剂或安慰剂。(C) 在右肺叶的肺匀浆中测量的 eGFP 蛋白水平(D) 显示 eGFP 阳性细胞(紫色)的图像(E) IT 滴注单次(I和III)和 3 天重复(II和IV)给药后 24 小时在大鼠左肺叶中检测到的 eGFP(棕色)。eGFP 阳性细胞(紫色)形态学上鉴定为细支气管上皮细胞 (D I) 和 II 型肺细胞和巨噬细胞 (D II)。在细支气管上皮细胞(E I)和 II 型肺细胞和巨噬细胞(E II)中鉴定出 eGFP mRNA (棕色)。(F) eGFP 的免疫荧光标记与 II 型肺细胞或巨噬细胞标记物结合,证实两种细胞类型都表达 eGFP。(G) 左肺叶的组织病理学分析结果。左上:来自对照大鼠的肺组织,显示没有病变。左下:治疗 3 天的大鼠肺组织,显示肺泡实质中的实变区域,代表炎症病变(箭头)。中图:混合炎症细胞浸润区域的较高放大倍数,以较小的气道和描绘肺泡管为中心。右图:代表次级细支气管上皮变化的图像。3结论总的来说,该研究团队进行了一项概念验证研究,并成功通过配方优化,设计出了用于吸入的 mRNA LNP 喷雾干燥制剂。该制剂在经过喷雾干燥和复溶后仍保持功能,并可在体外和体内有效递送 mRNA,能够以临床相关剂量水平实现 LNP 的肺部给药,在吸入式 mRNA 疫苗领域开辟了新道路,具有巨大前景。小型喷雾干燥仪 S-300                       ▲ 小型喷雾干燥仪 S-300                                                                ▲ 惰性气体循环装置 S-395BUCHI 小型喷雾干燥仪 S-300 搭配惰性气体循环装置 S-395,构建完美闭环体系,创造低氧环境,轻松处理您的 mRNA 样品。4参考文献Chaudhary, N., Weissman, D. & Whitehead, K.A. mRNA vaccines for infectious diseases: principles, delivery and clinical translation. Nat Rev Drug Discov 20, 817–838 (2021).Friis K P, Gracin S, Oag S, et al. Spray dried lipid nanoparticle formulations enable intratracheal delivery of mRNA[J]. Journal of Controlled Release, 2023, 363: 389-401.

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2024.04.23

瑞士步琦参加NPB天然产物前沿学术交流会

由中国科学院昆明植物研究所NPB编辑部联合云南省植物学会植物化学与植物天然药物专业委员会主办“NPB天然产物前沿学术交流会(第一届)暨编委会议”将于 2024年4月19日-21日 在云南丽江召开。本次论坛的主题为“天然产物研究前沿与创新”,交流近年来我国学者在天然产物化学及其相关领域的研究成果,就天然产物的发现新策略与新方法研究、重要活性天然产物的发现、合成与功能研究、创新天然药物研发、智能化时代天然产物创新研究的方向探索等研究动态与最新成果进行广泛的交流。届时步琦公司将携带旋转蒸发仪、制备色谱亮相展会现场,同时还有合成生物学整体解决方案,为大家带来相关最新技术与产品。✦  ++丽江复华丽朗酒店2024年4月19日~21日展台号07参展仪器1旋转蒸发仪 R-300业界最高的自动化配置(自动消泡功能、自动蒸馏功能)自动记录实验参数自定义 SOP 方法高性能的气密性可有效缩短高沸点溶剂的蒸馏时间方便、高效的旋转蒸发,智能蒸馏高度灵活性,极大便利性2制备色谱紧凑型色谱系统,内置双检测器,UV 和 ELSD 检测器ELSD 可以检测紫外检测器无法检出的天然产物、天然高分子化合物、脂质、脂肪酸、糖等样品ELSD 分流量(30uL/分钟),很少的样品损失节省空间、安全性高、使用简单合成生物学解决方案▲ 点击查看大图

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2024.04.18

【瑞士步琦】利用Pure C-850双模式进行辣椒素纯化分离

利用 Pure C-850 双模式辣椒素纯化分离Pure 应用”1介绍辣椒素主要来源于辣椒属植物,不同种类的辣椒含有不同量的辣椒素,通常辣椒的辣度与其中辣椒素的含量有关。此外,一些其他植物也可能含有少量的辣椒素,例如胡椒、姜等。▲ 辣椒素结构式辣椒素因其抗菌活性可用于生物膜和防污涂料,使其在食品包装、食品保鲜、海洋环境和牙科治疗等方面具有广阔的应用前景。辣椒素在代谢紊乱中也起着至关重要的作用,包括减肥、降压和降低胰岛素的作用。此外,辣椒素通过诱导细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖,对预防肺癌、胃癌、结肠癌和乳腺癌等人类癌症有效。先前的研究还表明辣椒素对缓解疼痛和认知障碍有积极作用。辣椒素是瞬时受体电位香草素 1 型 (TRPV1) 的激动剂,可选择性激活 TRPV1,诱导 Ca2+ 流入和相关的信号通路。最近,肠道菌群也参与了一些疾病的治疗,但其对辣椒素作用的影响仍有待深入研究。在天然辣椒中同时存在辣椒素与二氢辣椒素,用硅胶柱层析或正相薄层色谱法(TLC)等传统方法分离这两个结构相似的化合物十分困难。即使用中压快速制备色谱(FLASH)分离纯辣椒素也非常困难,因此往往需要使用中压制备色谱法和高压制备色谱法进行两步纯化。在本次的应用文章中,我们将会展示如何利用两步分离从红辣椒原料中提取 HPLC 峰面积达 95% 以上的辣椒素。2仪器、耗材与试剂仪器:步琦 Pure C-850 中高压一体纯化分离系统步琦 E-800 索氏萃取系统Agilent 1260 Infinity II 液相色谱分析系统▲ Pure C-850 制备色谱系统▲ E-800 索氏萃取系统耗材:VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mmFlashPure Ecoflex Silica 12gBUCHI PrepPure C18 100 Å, 10 µm, 250 x 20 mm试剂与样品:市售红辣椒 10g去离子水 4L乙腈(HPLC 级)4L甲醇(AR 级)4L二氯甲烷(AR 级)4L乙醇(AR 级)1L辣椒素标样 99.5% 100mg3实验部分样品准备:将市售红辣椒皮碾碎成粉状,取 5g 置于 E-800 索氏提取器的萃取腔内,溶剂杯内加入 100mL 乙醇,加热等级设定为 13 级,整个提取过程持续 4 小时,制成辣椒皮萃取液。确认辣椒素峰位置:HPLC 条件色谱柱VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mm流速1.5mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度,6 分钟紫外波长227nm▲ 辣椒素标样出峰图▲ 辣椒皮萃取液出峰图根据辣椒素标样,我们可以确定辣椒素的出峰位置为 3.884 min,通过这一参数我们可以确认之后每一步分离的馏分位置。辣椒素粗分离:色谱条件(C-850 FLASH 模式)色谱柱FlashPure Ecoflex Silica 12g平衡时间6 分钟流速10 mL/min溶剂 A二氯甲烷溶剂 B甲醇梯度10% 等度,40 分钟紫外波长254nm; 227nm; 280nm检测器灵敏度高上样量600mg 红辣椒皮粉末上样模式干法上样将 600mg 红辣椒皮粉末与 3g 硅胶拌匀,放入干法上样柱内进行上样,在 C-850 的中压模式下进行初步纯化分离。▲ C-850 中压模式下分离红辣椒皮内的化合物根据之前 HPLC 上辣椒素的出峰位置,我们大致判定目标化合物被收集在 9-11 管内,将这几管馏分合并后浓缩,进行 HPLC 检测。▲ 9-11 管馏分并管后 HPLC 检测图通过 HPLC 分离后,可以看到除了 3.882 min 的辣椒素,在 5.365 min 还有一个化合物,这是与辣椒素结构相似的二氢辣椒素。▲ 二氢辣椒素结构式中压模式下的色谱柱填料粒径通常为 30-50μm,很难将辣椒素与二氢辣椒素拆分开,因此我们需要将 C-850 切换至高压模式,利用粒径更小的高压不锈钢色谱柱分离这两个化合物。获取高纯度辣椒素:色谱条件(C-850 高压模式)色谱柱BUCHI PrepPure C18 100 Å, 10 µm, 250 x 20 mm平衡时间10 分钟流速15mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度,45 分钟紫外波长254nm; 227nm; 280nm检测器灵敏度高将之前获取的 9-11 管馏分浓缩后,在 C-850 的高压模式下进行分离。▲ 样品粗分后 9-11 管馏分高压分离图根据之前 HPLC 的出峰顺序,我们可以推测 21-26 管馏分为辣椒素,31-33 管馏分为二氢辣椒素,取 21-26 管分别进行 HPLC 检测。▲ 高压模式下 21-26 管馏分 HPLC 检测图4结论辣椒皮中含有多种化合物,仅通过柱层析色谱或中压制备色谱很难获得高纯度的单一化合物。步琦 Pure C-850 纯化分离系统支持中压和高压双模式,一台仪器就能完成大量样品的中压粗分富集与高压高纯度纯化,分离天然产物时具有明显的优势。在本次应用中,通过中压和高压的两次分离,最终 24 与 25 管馏分的峰面积能达到 95% 以上,可以进行下一步的生物活性测试。

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2024.04.12

【Conference】瑞士步琦参加IBQC2024第三届国际生物药质量大会

IBQC 2024 第三届国际生物药质量大会将于 2024 年 4 月 11 日至 12 日于 苏州举行。本届会议以“聚焦生物药工艺,探究生物药质量”为会议主题,在质量控制领域提供助力。大会由主场与专场(抗体药物专场—细胞治疗专场—基因治疗专场)组成,演讲报告涵盖生产物料、生产工艺、产品开发、分析方法、质量标准、GMP 管理等质量生命周期全过程。届时步琦公司将携带制备色谱、旋转蒸发仪以及熔点仪亮相现场,同时还有药物研发整体解决方案,为大家带来相关最新技术与产品。✦  +                                                                       +苏州石湖金陵花园酒店2024年4月11日~12日 展台号C1参展仪器1旋转蒸发仪 R-300业界最高的自动化配置(自动消泡功能、自动蒸馏功能)自动记录实验参数自定义 SOP 方法高性能的气密性可有效缩短高沸点溶剂的蒸馏时间方便、高效的旋转蒸发,智能蒸馏高度灵活性,极大便利性2制备色谱紧凑型色谱系统,内置双检测器,UV 和 ELSD 检测器ELSD 可以检测紫外检测器无法检出的天然产物、天然高分子化合物、脂质、脂肪酸、糖等样品ELSD 分流量(30uL/分钟),很少的样品损失节省空间、安全性高、使用简单3熔点仪符合 20 版中国药典,日本药局方,EP (欧洲药典),UPS (美国药典)可见放大视窗,可直接观察样品(放大 2.5 倍)配有高清晰摄像头,彩色视频可放大 6 倍,输出视频速度可调,可回放(M-565)药物研发整体解决方案

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2024.04.10

“按质论价”——步琦在线近红外分析帮助企业轻松收购玉米

按质论价在线近红外帮助企业轻松收购玉米在线近红外”玉米通过深加工生产出高附加值的终端产品是玉米工业发展的趋势,也是解决农民卖粮难及增收的有效途径。随着国内玉米深加工企业的规模经营和持续成长,作为玉米的需求量激增,玉米收购的按质定价便成为企业工艺管理成本的重要内容。根据 GB/T8613-99《淀粉发酵工业用玉米标准》,淀粉及水分含量是判定原料玉米等级的主要质量指标。淀粉是玉米的主要成分,也是进一步转化成果葡糖浆、山梨醇、燃料酒精等产品的原料;而玉米中的蛋白质含量也是确定工艺参数的重要指标。若在收购现场对玉米中的水分、淀粉、蛋白质采用常规化学分析方法进行检验,从时间上严重滞后,不能及时为等级判定及生产提供所需的分析数据。在线近红外光谱仪(NIR-online)是目前最新发展的光谱分析技术,每 3s 可同时分析样品中的多个组分且玉米样品不需制备,可直接整粒测试。在线近红外光谱(NIR-online) 用于玉米的现场收购可显著提高分析速度,彻底改变玉米检验的分析面貌,而且采用仪器分析尚可获得原料供应商及农民散户的高度认可,避免质量等级判定过程的纠纷及暗箱操作造成的资金流失,真正体现“按质定价”。步琦在线近红外玉米收购仪▲ Buchi NIR-Online® 在线近红外光谱仪主要特征:根据客户需求量身配置。选项包括:更宽的 NIR 波长范围可见光范围高分辨率 CCD 摄像头无线传输技术集成超高速探头主要特点:二极管阵列技术-高速测量快速移动的产品久经考验的设计-稳固耐用的设计,不带移动部件,可应对诸如振动、极端温度、大风或潮湿等恶劣条件多种测量选项-获取更多样品信息,近红外,可见光 和高分辨率 CCD 摄像头集成于同一个探头ATEX 认证-经认证可用于气体和粉尘爆炸环境。时时刻刻确保安全。双灯源-双灯源配置,可保证运行不间断。软件一体化-多种类型的行业标准接口,能够将所获得的数据方便地传输至各个过程控制系统,例如从模拟 I/O 经由 Modbus 和 Profibus 传输至 TCP/IP。硬件一体化-我们拥有坚实耐用的安装附件组合,用于玉米收购扦样装置可在各种压力和温度条件下使用,并适用于固体、液体、黏稠或腐蚀性的样品。硬件的一体化确保了投资快速回收。主要定标:ParameterNo. SpectraRangeSECSEPFat [%]9141.28-15.050.230.23Starch [%]88931.9-85.40.91Moisture [%]9127-22.540.220.22Protein [%]9096.3-21.450.260.261应用实例视频2结论关注步琦在线近红外光谱应用于“玉米深加工”企业原料玉米的现场收购,可真正实现“按质定价”的动态控制。步琦近红外光谱技术在“玉米深加工行业”应用中如玉米淀粉,玉米胚芽,玉米蛋白粉及乳酸,赖氨酸,果葡糖浆、山梨醇、燃料酒精,DDGS 有更多应用和客户如有需求请联系我们,步琦将提供优质的解决方案帮你解决痛点,实现利益最大化。

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2024.03.25

【瑞士步琦】冷冻干燥含酵母菌的微球应用

瑞士步琦冷冻干燥含酵母菌的微球应用冷冻干燥应用”益生菌是一种有益于人体健康的微生物,常被用于改善肠道菌群。微胶囊包埋技术可以帮助保护菌株,延长其在体内的存活时间,不易受外界环境的影响而失活。因此,在生产益生菌产品时,需要考虑选择合适的微胶囊技术,以确保益生菌的稳定性和活性。下面这篇应用非常好的结合了微胶囊包埋和冷冻干燥技术,证明菌种经过包埋干燥后仍具有生物活性,为发酵工艺和食品转化等领域开辟新的可能性。1介绍冷冻干燥,也称为冻干是一种非常通用的脱水方法,常用于保存微生物、食物或药物,如蛋白质类药物。它将冷冻和干燥结合在一个独特的操作中,可以创造出高质量的干燥终产品。冷冻干燥通常用于保存微生物培养物,因为它具有不可忽视的优点:储存的方便性和增加邮寄微生物的可能性。此外,制得的产品只需要少量维护,培养基在储存过程中不会受到污染,微生物可以长时间保持活力。然而,众所周知,冷冻干燥技术对微生物至关重要,因为它对微生物的生存能力和生理状态都有负面影响。根据方法和生物体的不同,微生物存活率也各有不同;然而,活力水平明显低于液氮储存 2。观察到的活力下降主要是由于一些不良副作用引起的,例如细胞内冰晶的形成1、敏感蛋白的变性或在此过程中膜脂质的物理状态发生一些不可逆的变化 3,5。为了防止这种影响,通常在冷冻或冷冻干燥前使用脱脂牛奶、蔗糖、甘油、 DMSO 或海藻糖等作为冻干保护物质1,3。据报道,海藻糖在干燥、冷冻、渗透胁迫和热休克等极端环境下对酵母和细菌具有保护作用。这些保护效果与膜的稳定和酶活性的保存有关。关于海藻糖的保护作用,已经报道了几种假设。一些报道认为它的作用是通过多个外部氢键取代参与维持蛋白质三级结构的水分子,另一些报道认为它形成玻璃态结构以确保物理稳定性。除了发酵过程或食品转化,酿酒酵母或乳酸菌等微生物在益生菌膳食食品和饲料补充剂领域具有重要的经济意义。然而,这些应用需要在储存过程中保持细胞活力。通过造粒和冷冻干燥技术相结合,可以得到大小和组成均匀的无尘颗粒。由于具有更高的颗粒表面积,这使得产品将具有良好的颗粒流动性,更容易掌握的剂量和更快的产品复原性。尽管存在上述挑战,冷冻干燥仍然是一种酵母、孢子真菌和细菌的方便保存方法,因为它们的长期生存能力通常保持得相当好,而且菌株的储存和分发要求也很简单。因此,本应用旨在生产酿酒酵母颗粒作为模型微生物,使用微胶囊造粒仪 Encapsulator B-390 作为造粒机,将酵母悬浮液挤压进入液氮中形成单分散球体,然后使用冷冻干燥机 Lyovapor™ L – 200 进行冷冻干燥处理。2仪器,试剂和器材仪器:ESCO NordicSafe, Biosafety Cabinet Class IIBUCHI 微胶囊造粒仪 Encapsulator B-390BUCHI 冷冻干燥机 LyovaporTM L-200 Pro,干燥腔体搭配可加热搁板BUCHI LyovaporTM Software试剂:YPD 培养基, Sigma Aldrich海藻糖, Sigma Aldrich脱脂奶粉琼脂去离子水液氮器材:玻璃培养皿液氮杜瓦瓶3实验本应用中描述的工作是在无菌条件下进行的。将 84g 市售面包酵母悬浮溶解在 50mL 无菌 YPD 培养基(Sigma Aldrich)中。在酵母悬浮液中加入 50mL 无菌冻干保护剂培养基(5g 海藻糖(Sigma Aldrich)和 5g 脱脂牛奶溶于去离子水中),然后用微胶囊造粒仪 B-390 进行制粒(表1)。将挤压后的液滴收集在液氮浴中冷冻,然后转移到不锈钢托盘中,保存在 -25°C 的冰箱中进行冷冻干燥。表1:微胶囊包埋参数_300μm 喷嘴1mm 喷嘴频率[Hz]68060电压[V]7502500压力[mbar]500500冷冻干燥步骤(初级干燥和次级干燥)使用 LyovaporTM 编程软件,如表 2 所示。使用 LyovaporTM L-200 Pro 干燥腔体、可加热的搁板和环境空气。表2:初级干燥和次级干燥冻干参数无酵母菌微球采用与含酵母菌微球相同成分培养基和参数进行制备。冷冻干燥后,将 1mL 无菌水加入 1mL 微球中,用以复原样品。对于含有酵母菌的菌珠,对每个重组溶液进行10倍、100 倍和 1000 倍的连续稀释。将复原后的溶液和稀释液分别涂于 YPD 琼脂平板上,如图 1 所示。琼脂板在 28℃ 培养 24h,评价细胞活力。▲ 图1:琼脂平板上的酵母活力测试4结果与讨论含有酵母的微球可以通过使用微胶囊造粒仪 B-390 进行包埋制备,结果表明:用微胶囊造粒仪 B-390 将酵母滴入液氮中,可使酵母迅速颗粒化;用 300μm 的喷嘴和 1mm 的喷嘴分别制备了 700μm 和 1500μm 左右的微球。仅使用含冻干保护剂介质的溶液也得到了类似的结果。如图 2 所示,冻干后的微球在形状和大小上与湿冻微球保持相似。▲ 图2:用微胶囊造粒仪 B-390 制得的 300μm 酵母微球,在冻干前(左)后(右)的对比通过扫描电镜对其结构进行分析。在图 3 中,可以观察到含有酵母的球珠(下两图)和仅由冻干保护剂培养基制成的球珠(上两图)在形态上的差异。含有酵母菌的微球具有由 5μm 颗粒组成的粗糙结构,可以认为是微生物,而只含有冻干保护剂的微球具有更光滑的结构。▲ 图3:含酵母菌的冻干微球(下)和不含酵母菌冻干微球(上)的结构对比当冷冻干燥时,考虑到膜中脂质物理状态的变化或由于某些蛋白质结构的变化,生物系统可能受到破坏3,9。为了验证酵母菌的活力,将酵母菌重新水合,稀释,并在 28°C 的 YPD 琼脂板上培养 24 小时。图 4 证实了文献报道的内容,即便失去了部分活力,酵母在冻干后仍然可以生长2,4,6,10。▲ 图4:在 28℃ 琼脂板中培养 24 小时后的酵母菌活力5结论含有酵母菌的微粒可以很容易地用微胶囊造粒仪 B-390 进行制备,并使用冻干机 LyovaporTM L-200 进行冷冻干燥处理。B-390 的喷嘴直径分别为300 μm和1000 μm,制得的微粒直径分别为 700μm 和 1500μm。冷冻干燥后,珠粒的大小和形状没有变化。该颗粒流动性好,容易掌握使用剂量,且与水混合后溶解速度快。冻干后的微生物在贮藏过程中仍能保持良好的活力,并能在复水化后成功生长。在本应用中,造粒包埋和冷冻干燥的结合显示出了非常好的实验结果。它可以在发酵工艺和食品转化等领域开辟新的可能性,有利于生产制备剂量易控制和重组的培养发酵剂;另外,在益生菌和食品补充剂领域中获得无尘且可自由流动的粉末,同时保证产品颗粒大小和组成的均匀度。6参考文献N’Guessan, F. K.; Coulibaly, H. W.; Alloue-Boraud, M. W. A.; Cot, M.; Djè, K. M. Production of Freeze-Dried Yeast Culture for the Brewing of Traditional Sorghum Beer, Tchapalo. Food Sci. Nutr. 2016, 4 (1), 34–41.Bond, C. Freeze-Drying of Yeast Cultures. In Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols; Day, J., Stacey, G., Eds.; Methods in Molecular BiologyTM; Humana Press, 2007; pp 99–107.Leslie, S. B.; Israeli, E.; Lighthart, B.; Crowe, J. H.; Crowe, L. M. Trehalose and Sucrose Protect Both Membranes and Proteins in Intact Bacteria during Drying. Appl. Environ.Microbiol. 1995, 61 (10), 3592–3597.Miyamoto-Shinohara, Y.; Imaizumi, T.; Sukenobe, J.; Murakami, Y.; Kawamura, S.;Komatsu, Y. Survival Rate of Microbes after Freeze-Drying and Long-Term Storage.Cryobiology 2000, 41 (3), 251–255.Wolkers, W. F.; Tablin, F.; Crowe, J. H. From Anhydrobiosis to Freeze-Drying of Eukaryotic Cells. Comp. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol. 2002, 131 (3), 535–543.Lodato, P.; Huergo, M. S. de; Buera, M. P. Viability and Thermal Stability of a Strain of Saccharomyces Cerevisiae Freeze-Dried in Different Sugar and Polymer Matrices. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1999, 52 (2), 215–220.Strasser, S.; Neureiter, M.; Geppl, M.; Braun, R.; Danner, H. Influence of Lyophilization,Fluidized Bed Drying, Addition of Protectants, and Storage on the Viability of Lactic Acid Bacteria. J. Appl. Microbiol. 2009, 107 (1), 167–177.Miyamoto, T. (Kyushu U.; Kawabata, K.; Honjoh, K.; Hatano, S. Effects of Trehalose on Freeze Tolerance of Baker’s Yeast. J. Fac. Agric. - Kyushu Univ. Jpn. 1996.Giulio, B. D.; Orlando, P.; Barba, G.; Coppola, R.; Rosa, M. D.; Sada, A.; Prisco, P. P. D.;Nazzaro, F. Use of Alginate and Cryo-Protective Sugars to Improve the Viability of Lactic Acid Bacteria after Freezing and Freeze-Drying. World J. Microbiol. Biotechnol. 2005, 21 (5), 739–746.Cerrutti, P.; Huergo, M. S. de; Galvagno, M.; Schebor, C.; Buera, M. del P. Commercial Baker’s Yeast Stability as Affected by Intracellular Content of Trehalose, Dehydration Procedure and the Physical Properties of External Matrices. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2000, 54 (4), 575–580.

应用实例

2024.03.19

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