文章源自赛默飞
2017年8月7日关于分子间相互作用的研究手段。
你试过多少?
pull-down、co-ip、酵母双杂交?
还是fret、alpha、蛋白片段互补技术?
它们足够灵敏吗?
它们能研究活细胞内的实时互动吗?
它们能定量分析吗?
试试nanobret吧!
它的突出特点就是能够实时定量的研究活细胞内的分子间相互作用。
听到这几个关键词:活细胞、实时、定量!是不是有些激动?
nanobret什么来头?
nanobret是继bret1、bret2、bret3之后新一代的分子间相互作用检测技术,是promega公司2015年的一款力作。
在上市当年即被the scientist杂志评选为年度十大创新产品。
与大家熟悉的荧光共振能量转移技术(fret)相比,生物发光共振能量转移技术(bret)有不少优点,比如无需激发光,背景更低,也避免了光漂白和自发荧光等问题,是为数不多的能够研究细胞内分子间相互作用的技术。
但传统的bret平台使用的是海肾荧光素酶(rluc)作为能量供体,黄色荧光蛋白(yfp)作为能量受体。然而,rluc和yfp的光谱非常接近(即光谱重叠比较高),因此产生了较高的背景,这种高背景增加了检测噪音,也降低了灵敏度和动态范围。此外,传统bret的另一个应用痛点在于:rluc光输出量太低!对于一些较难转染的细胞体系,这种研究手段几乎被枪毙。
nanobret平台的出现,完美解决了传统bret实验的应用痛点,它是大幅度改良的bret 分析平台,使用nanoluc luciferase 作为能量供体和halotag蛋白标记的nanobret™ 618 荧光基团作为受体。来自nanoluc 供体的明亮的蓝移发光信号耦合到远红移的 halotag 受体上后,光谱叠加更佳、信号更强、且与传统bret 分析相比背景更低。
nanobret的出现,解决了活细胞内蛋白相互作用实时研究的重要一环!
比如在药物研发中,其基本思路是寻找到与细胞靶蛋白相互作用的小分子。但这种结合的测定往往是体外进行的生化检测,无法充分模拟细胞内的复杂环境。
有时体外测定的结果并不能如实反应体内的实际情况,但多年来这一瓶颈始终无法跨越。
2016年发表在《nature communications》上的一项研究利用nanobret平台成功检测了细胞内药物-靶点的相互作用,不仅如此,还成功测定了活细胞中的靶点停留(target residence),也就是药物与蛋白相互作用的持续时间。这让研究人员能够优化药物,以便增强作用。
英国癌症研究中心的graeme walker说:“nanobret技术在保持细胞完整的同时,采用一种简单的方法来测定化合物的停留时间。
这种能力让我们团队能够阐释探针的新作用机制。
看到这,想试试这个全新的平台吗?
如果你的实验室里能够找到
他——varioskan lux多功能读数仪
他——varioskan flash多功能读数仪
或者他——luminoskan化学发光分析仪
那么恭喜你,你将很容易搭建最新的活细胞内分子间相互作用研究平台!
作为全球第一家酶标仪生产商,赛默飞秉承了38年来的酶标仪设计生产经验,完美适配最新的nanobret技术!
不谦虚的说,化学发光功能方面是赛默飞仪器的强项哦!您只需选择供体与受体光谱对应的化学发光滤光片,即可轻松实现nanobret的全部检测。
1)摒弃了传统光纤传输光信号的仪器设计,赛默飞所有的化学发光检测功能模块都是采用透镜聚焦的光路设计,最大程度的降低光信号的损失
2)即便是多功能的酶标仪设计,也绝不降低化学发光的品质,采用独立的光路和独立的检测器
3)领先业内的自动增益调节和校准系统,让您无需费心仪器的参数设置,每一次读值都能保证最优的灵敏度和最宽广的动态范围
4)多功能酶标仪兼容化学发光光谱扫描功能
详细配置请咨询昊诺斯销售代表,或者直接在公众号,留下您的联系方式,我们会尽快与您联系。
关于昊诺斯
北京昊诺斯科技有限公司系致力于为生命科学、生物检测、生物工程、药物研发、组织病理学等领域提供先进的实验室仪器设备及多层次服务的高科技公司,也是赛默飞世尔科技实验室设备的一级代理,所销售的代理产品得到了生产厂家的大力支持,可以为在中国广大区域内的用户提供及时、有保障的售后服务。 同时我们还销售鼎昊源品牌的多种国产仪器,包括组织研磨仪、组织破碎匀浆仪、nanopro超微量紫外可见分光光度计、离心机、封板机、细胞工厂等产品,并在逐步增加品种,扩大规模。以“为了人类和地球的健康”为目标,昊诺斯将始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务。 如需了解更多信息,请咨询昊诺斯当地销售代表或致电昊诺斯服务热线(010)64842431-200,更详细信息请登录昊诺斯网站:www.herosbio.com
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