通过磷酸化技术提高纳米级抗VEGFR2结合蛋白的生物活性、理化性质和药代动力学特性
为了克服Adnectin存在的问题,本文设计了一种新型的Adnectin C,将其融合到含有Pro/Ala/Ser(PAS)重复残基的可生物降解多肽中。用标准方法比较大肠杆菌表达的重组融合蛋白和未融合蛋白的生物活性、理化性质和药代动力学特性。使用Linseis STA PT1600热分析仪器进行DSC和TG实验。动态光散射(DLS)分析表明,磷酸化Adnectin C的粒径增加了约2倍,净电荷略有变化。此外,PAS序列的融合提高了其抗热诱导聚集形式生长的稳定性。酶联免疫吸附试验(ELISA)和表面等离子体共振实验分别证实了酶联蛋白C的高受体结合和改进的结合动力学参数。药代动力学研究显示,单次静脉注射给雌性BALB/C小鼠后,Adnectin C-PAS#1(200)的最终半衰期显著增加了4.57倍。结果表明,磷酸化可以作为开发Adnectin衍生药物的一种更好的给药策略,提高患者的依从性。