纯牛奶菌落总数的测定方法

       优质生鲜奶的分为特优级、优级、良级和合格级四个等级，而分级的依据主要是检测判断鲜奶是否品质高的4个核心指标数值，即乳脂率、乳蛋白率、菌落总数和体细胞数。在奶业发达国家的标准里，上述四个核心指标的数值基本要达到牛奶中的乳脂肪含量不低于3.3%，乳蛋白含量不低于3.0%，体细胞数不超过75万个/ML，菌落总数不超过10万CFU/ML。以下是使用恒温恒湿培养箱测定纯牛奶菌落总数的一般步骤：

       1. 取样：取10ml纯牛奶置盛有90ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1-2分钟，制成1:10的样品匀液。

       2. 配制浓度梯度：用1ml无菌吸管或移液枪吸取1:10样品匀液1ml，沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），用漩涡震荡器混合均匀，制成10-2的样品匀液。按上述操作程序，制备10-3、10-4系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1ml无菌吸管或吸头。

       3. 接种：取一定量的稀释液，使用无菌技术将其接种到适当的培养基上。常见的培养基包括营养琼脂或平板计数琼脂。

       4. 培养：将接种后的培养基放入恒温恒湿培养箱中，设置适宜的温度和湿度条件。一般培养温度为 37°C，培养时间根据培养基和检测要求而定，通常为 24-48 小时。

       5. 计数：培养结束后，观察培养基上生长的菌落数量。可以使用计数器或手动计数方法，记录每个稀释度的菌落数。

       6. 计算：根据记录的菌落数，计算出原始样品中的菌落总数。通常使用菌落计数公式进行计算，如平板计数法或稀释倍数法。

       7. 结果报告：将计算得到的菌落总数报告为每毫升或每克样品中的菌落数量。

      需要注意的是，在进行菌落总数测定时，要严格遵守无菌操作规程，以避免外部污染对结果的影响。此外，恒温恒湿培养箱的条件应根据具体的实验要求进行设置和控制，以确保培养环境的稳定性和准确性。