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使用 Agilent Captiva EMR―Lipid 样品净化产品和 LC/MS/MS 分析奶酪中的多种真菌毒素
2018/05/20 12:42
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 6470 三重四极杆液质联用系统
型号： 6470
产地： 新加坡
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
本研究使用脂质去除产品 Agilent Captiva EMR―Lipid 成功净化了含有多种真菌毒素的蓝纹奶酪和帕尔玛奶酪提取物。奶酪中所含的大量脂质给准确定量低浓度真菌毒素带来了挑战。Captiva EMR―Lipid 将体积排阻与疏水相互作用两种净化机制相结合，能够选择性地捕获脂类烃链，以及保留非目标干扰成分。这款小柱有 3 mL 和6 mL 两种规格，可对多脂样品提取物进行直通式净化。净化后的提取物可直接进样至 LC/MS 进行分析，也可根据分析方法要求进行后处理。本研究依次采用QuEChERS 工作流程和 Captiva EMR―Lipid 小柱进行样品净化，成功验证了蓝纹奶酪和帕尔玛奶酪中的 13 种真菌毒素。该方法可检测奶酪中浓度低至 0.5 ng/g 的真菌毒素，且回收率达 70.7%-111.8%，RSD 小于 20%。此外，本研究还通过残留物重量分析、GC/MS 全扫描、磷脂 LC/MS 检测和脂质冻析法评估了基质去除率。
前言
真菌毒素是多种农作物上真菌物种的次级代谢物，与致突变、致癌、致畸作用以及免疫影响有一定关联1。奶酪中的真菌毒素污染可能由原料污染引起，也可能由真菌菌株污染奶酪之后
天然合成的毒素引起。奶酪极易发霉，并且易受储存条件和化学防腐剂含量的影响2,3。检测和定量复杂样品中低浓度有害真菌毒素的方法不仅包括各种免疫分析法，还包括将 LC/MS与样品前处理技术（如免疫亲和、SPE、QuEChERS4 或稳定同位素稀释5）相结合的方法。高脂肪含量样品的分析尤为棘手，许多样品净化产品（如基于免疫原理的小柱）都价格昂
贵，且只能用于特定的分析物、化合物类别或样品类型。其他净化产品致力于高效且高选择性地去除基质共萃取物（尤其是脂质），这种物质会导致分析重现性差、基质效应明显，并会
在仪器中聚集引起污染。
结论
本研究证明 Agilent Captiva EMR―Lipid 提供了一种简便有效的净化方法，适用于多种真菌毒素的分析。采用蓝纹奶酪和帕尔玛奶酪进行方法验证，结果表明该方法具有优异的回收率 (70.7%-111.8%) 和精度 (< 20%)，且灵敏度可达 0.5 ng/g 奶酪。重量分析、GC/MS 全扫描、磷脂分析和脂质冻析比较的结果均表明该方法可实现高效净化。蓝纹奶酪比帕尔玛奶酪更复杂（如文中所述），而得益于 2 g 的样品量，本研究的各项分析均顺利完成。若奶酪分析需要达到更低的检测限，这个经过验证的方案可使用多达 5 g 的帕尔玛奶酪样品。产品比较
结果表明，Captiva EMR―Lipid 的回收率远优于其他市售净化产品。该方法在多种应用中都具有较高的基质脂质去除率以及分析物回收率，但其中一些应用不在本研究的范围之内6。Captiva EMR―Lipid 代表了用于多类别、多残留分析的新一代选择性脂质净化产品，对于需要简化样品前处理并改善方法性能的实验室而言，该产品是理想之选。
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