Mary E. Lame,Erin E. Chambers,and Kenneth J. Fountain
Waters Corporation,Milford,MA,USA
应用优势
■ 样品量减少2倍、灵敏度提升10倍,可以方便进行样品的多次进样,更好的满足ISR重复分析需求。
■ 溶剂耗量减少50倍,节省分析成本。
■ 采用混合模式SPE,可以减少基质干扰,增强在血浆中缓激肽萃取的选择性。
■ Oasis μElution96孔板可浓缩样品,并在最大程度上减少肽损失,使血浆中缓激肽的检测限达到5 pg/mL。
■ 选择性高的快速SPE提取(<30分钟)省去了耗时的免疫亲和纯化步骤。
沃特世解决方案
ionKey/MS系统
ACQUITY UPLC M-Class
IonKey源
Xevo TQ-S
iKey 分离装置
MassLynx
Oasis WCX 96孔μElution板
ACQUITY 采集板
引言
对多肽类物质进行稳定、灵敏分析的需求是色谱分离和质谱测定的共同挑战。常见的肽通常难以通过LC-MS/MS进行分析,这是因为其不易离子化以及不易产生理想的碎片离子而导致MS灵敏度较低,从而使得LC和样品制备方法开发非常困难。之前的应用纪要(720004833ZH)详细说明了如何开发一种快速、灵活的SPE-LC-MS/MS分析方法,用于人血浆中缓激肽(图1)的定量;缓激肽是临床前或药物开发阶段重要的生物标志物1。由于缓激肽在血浆中的浓度低至pg/mL水平且代谢速度快,在采血和样品制备过程中还可通过蛋白水解人为生成,因此对其进行准确定量相当困难。
在本实验中,使用ionKey/MS系统更新了整个LC-MS平台,新系统把UPLC分析集成到质谱源中(图2)。如图3所示,iKey分离装置(150μm内径)包含流路、电子元件、ESI接口、加热器、eCord和色谱填料以发挥UPLC分离性能。此外,与2.1mm内径色谱法进行比较,这种技术可显著提高灵敏度,是肽分析的理想方法。大多数生物分析LC-MS/MS方法常常消耗大量的溶剂和样品,从而增加了分析的成本和限制了可重复分析次数。除灵敏度增加外,ionKey/MS减少溶剂和样品耗量,提供足够的样品进行重复进样,更好的满足ISR测试需求。
下载完整应用纪要请点击:http://www.waters.com/waters/library.htm?lid=134786602&cid=511436
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