沃特世发售已经验证可支持Windows 7和Empower 3 CDS的NuGenesis SDMS 7.1 　　米尔福德, 马萨诸塞州, - 2011年1月27日 　　沃特世公司(纽约证劵交易所代码：WAT)今天宣布开始发售NuGenesis®科学数据管理系统7.1 Service Release 7(SR-7);经结构性验证，本产品同时支持32位的微软Windows 7专业版和企业版操作系统，以及沃特世的Empower™ 3色谱数据系统(CDS)。 　　此外，NuGenesis SDMS 7.1 Service Release还具有以下全新特点：增强的SOP管理、新的仪器列表管理能力，以及用于Vision Publisher和SAP-QM或其它LIMS系统间的接口程序的新技术基础。 　　“不论是为了提高效率还是法规遵从性的要求，我们的客户正在越来越多地将需要将一系列仪器使用的标准操作规程(SOP)整合至其实验室的信息技术环境中，”沃特世公司信息科学部高级产品经理Maren Fiege博士说，“在促进工作流程的简化方面，SDMS 7.1是已推出的可支持Windows 7和沃特世全新Empower 3色谱数据系统的首款产品。客户可通过使用基于先进平台的SDMS和Vision Publisher而取得进展，并受益于QA/QC工作流程的精简，从而使产能和效率得到优化并可对精益六西格玛计划提供支持。” 　　NuGenesis SDMS是一种自动化的电子仓库，可将各类科学数据存储至中心数据库并对其进行管理，从而提供了整合大量研究应用的能力。 　　制药、生物技术和化学/工业领域内领先公司的科研人员已将SDMS视为一个标准，因为它能加快研究速度、提高科研协作水平，长期保存研究数据，并能提供知识产权保护和美国联邦法规21章第11款(21 CFR Part11)法规遵从性所要求的文本记录。通过使用自动化的“文件和打印采集”技术，SDMS可采集并存储任何仪器或应用所产生的特定科研数据。所有数据均使用高级函数设置，从而自动具备可检索性。 　　关于NuGenesis SDMS 7.1的更多信息，请点击此处. 　　关于沃特世公司(www.waters.com) 　　沃特世通过提供实用、可持续的科学创新为那些基于实验室工作的机构建立了商业优势，能使他们在提供健康、环境保护、食品安全和水质量方面取得杰出成就。 　　五十年来，沃特世已帮助客户进行意义深远的研究探索、优化操作、提供产品性能、及保证法规遵从等。 　　沃特世是上市公司(NYSE:WAT)，总部设在马萨诸塞州的米尔福德市。它还是标准普尔500指数成员单位之一。现有近4,700 名雇员人。其生产企业位于马萨诸塞州米尔福德和陶顿，以及爱尔兰的维克斯福德，新加坡和英国的曼彻斯特。 　　在大多数国家，沃特世采取直接销售的方式，以便能与使用其产品的客户保持最紧密的联系。 　　### 　　Waters, NuGenesis和Empower是沃特世公司商标. 　　联系人： 　　张林海 　　沃特世公司市场部 　　86(21) 61562642 　　lin_hai__zhang@waters.com 　　周瑞琳 (Grace Chow) 　　泰信策略(PMC) 　　020-83569288 　　grace.chow@pmc.com.cn

中国，上海– 2011年1月14日 –由加拿大液相质谱（LC-MS）协会主办的“首届亚太国际生物分析培训及最新进展研讨会”（The 1st Workshop on Recent Issues in Regulated Bioanalysis – Asia Pacific ）于2011年1月11日-14日在上海淳大万丽酒店隆重举行。来自北美、欧洲和亚洲地区法规监管部门的权威专家和全球领先制药企业的总裁应邀出席了此次会议。沃特世公司作为此次会议的金牌赞助单位携带着在该领域的最新解决方案在本次会议上亮相。 此次会议集中围绕四个方面的论题展开：:(1)与亚太、北美和欧洲国家药品管理机构讨论临床前和临床研究生物样品分析指导原则全球化的重要性。(2)听取中国、日本、韩国、印度、澳大利来和马来西亚国家药品管理机构的最新法规。(3)比较北美、欧洲和中国的生物样品分析指导原则。(4)向国际知名专家学习在生物样品分析方法 历时3天的培训及研讨会(生物分析科学与法规)，来自北美、欧洲和亚洲地区的法规部门和研究机构的专家以及学者围绕生物分析中LC-MS/MS 前沿技术及挑战、生物分析研究质量标准GLP认证等进行重点探讨，并且还开展生物样品分析方法确证和样品分析会前培训课程,使从事生物分析人员在GLP生物分析标准作业程序、样品分析方法开发和验证等方面获得很大的提高。 会议其间，众多专家学者莅临沃特世展位，了解沃特世最新的生物分析解决方案。沃特世利用世界上最佳性能的系统解决方案，为生物分析实验室带来革命性的变化。Oasis®和OstroTM产品提供了目前最快速、最方便及最洁净的样品前处理工具。ACQUITY UPLC® 已经为分离技术带来了永久性的变革。MassLynxTM 质谱软件提供了一个非常直观的界面和强大的功能。而现在XevoTM TQ-S 则提供了无与伦比的质谱灵敏度。沃特世利用质谱灵敏度的飞跃提升，加速解决生物分析的挑战。   沃特世公司的展位 关于沃特世公司（www.waters.com）  50年来，沃特世公司（NYSE:WAT）通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2009年的总收入达15.8亿美元，员工人数达5000人；公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。 #   #   # Waters, ACQUITY, UltraPerformance Liquid Chromatography和UPLC均为沃特世公司的商标   联系人： 张林海  沃特世公司市场部 86(21) 68794588 lin_hai_zhang@waters.com   周瑞琳（Grace Chow） 泰信策略（PMC） 020-83569288 13602845427 grace.chow@pmc.com.cn

　　据外媒报道，2011年1月25日，沃特世公布了2010年第四季度财报。报告显示，沃特世2010年第四季度营收4.836亿美元，与2009年同期相比增长13%，并且超越了分析师预期的4.6483亿美元。 　　“第四季度营收增长的驱动力来源于公司新系统的推出、在亚洲市场的持续扩张以及整体经济的改善，”沃特世主席兼CEO Douglas Berthiaume在一份声明中说到。 　　“新技术平台促进了最强劲的销售增长，ACQUITY UPLC和Xevo质谱仪出货量创造了新的纪录，” Berthiaume在一个会议中说到，“Xevo TQS 自2010年6月推出以来，创造了骄人的季度销售业绩。” 　　“同时， ACQUITY UPLC H-Class的推出也推动了沃特世液相色谱的销售，尤其是在药品质量控制领域销售更为强劲”，Berthiaume说。 “虽然我们非常满意H-Class在2010年迅速崛，但是UPLC将取代HPLC技术的趋势正在确立，这将带来一个多年的市场增长机会，我们正被这种趋势所鼓舞。” 　　Berthiaume还指出，“在医药终端市场，沃特世看到很多实验室从HPLC系统升级到UPLC系统，并且看到了与生物研发相关的新的业务机会。” 　　较去年同期，沃特世仪器销售增长16% ;就地区而言，亚洲地区销售增长32%，美国增长10%，欧洲增长5%，日本增长4%。 　　根据沃特世公布的数据，2010年公司年营收16.4亿美元，较2009年15亿美元增长了10%。2010年利润3.818亿美元，较2009年3.233亿美元增长18%。 　　据沃特世首席财务官说，随着终端市场的稳定和公司新产品的被接受，沃特世预计2011年还将有2位数的增长。

　　据外媒报道，2011年1月20日，沃特世公司今天宣布与苏格兰皇家银行达成了一项土地购买协议，沃特世将在英国威尔姆斯洛建造一个新的质谱总部。 　　新工厂占地面积37英亩。据悉，届时沃特世公司分布在南曼彻斯特和奥尔特灵厄姆的四个质谱工厂都将迁移至此。该工厂将包括最先进的客户演示实验室、研发能力和扩大制造生产的能力。 　　“新总部建设的目的是为了促进技术的革新，为世界上有想法的科学家提供更多的先进技术，”沃特世质谱业务运营副总裁Brian Smith在一份声明中说到。 　　最终销售土地的规划和建设要得到东柴郡议会的许可。沃特世新质谱总部预计2013年开业。

背景 　　2011年1月11日-13日，第29届摩根大通医疗卫生年会在美国旧金山举行，会议吸引约300家医疗卫生相关公司参与。会议上，各大公司总裁及CEO分别向投资者阐述各自公司新一年的发展计划及上市新产品。在今年的会议上，赛默飞世尔、沃特世、安捷伦、丹纳赫、布鲁克、Bio-rad的代表也纷纷展望各自公司2011年的发展战略。 　　沃特世公司在第一天摩根大通医疗保健年会上表示，在专注于高端质谱市场之后，未来一年公司将把注意力转向更低端质谱仪器市场。 沃特世公司总裁兼首席执行官Douglas Berthiaume 　　据沃特世公司总裁兼首席执行官Douglas Berthiaume介绍，“更低端质谱仪器近几年来相对低增长，但我们已经预见到此类质谱仪会有更强劲的增长。”他还表示，目前，沃特世公司没有足够的新技术给研究人员提供一个理由，从该公司购买此类仪器。 　　然而，在2011年或以后，沃特世公司将推出单四极杆质谱系统和以四极杆技术为基础的其他系统;对于Q-TOF技术，近几年沃特世公司的战略是追逐高端质谱用户，2006年推出Synapt，2008年推出Xevo，未来开发的重点则是台式系统。 　　根据这一战略，沃特世公司周一(2011年1月10日)宣布推出Xevo G2飞行时间台式质谱仪，对于Xevo全系产品而言，该系统是一个“大哥哥”，Douglas Berthiaume说。 　　Douglas Berthiaume还提到了“美国食品安全现代化法案”，国会在圣诞节前通过该法案，以确保在美国生产的和从其他地方进口的食品是安全的。上周，奥巴马总统签署为正式立法。 　　Douglas Berthiaume说，沃特世公司是食品安全检测的先锋，该法案对于沃特世公司而言意味着收入的增加。他补充说，沃特世公司已经被来自食品加工行业对于法规遵循的要求所“淹没”。 　　最后，关于赛默飞世尔待收购戴安对沃特世的影响，Douglas Berthiaume说，在短期内“很难想象该收购会对市场有很大改变。赛默飞世尔毫不隐晦其试图在液相色谱领域开拓新的空间，但戴安在液相色谱市场上只占有‘适当的位置’”， Douglas Berthiaume说。

电池的分类 电池大致可分以下几类：我们日常生活中经常使用的化学电池，利用半导体将光能直接转换成电力的诸如太阳能电池的物理电池，利用酶和微生物的诸如燃料电池的生物电池。锂离子二次电池属于化学电池中的二次电池。一次电池有普遍使用的锰电池、碱性电池、汞电池等。相对一次性使用的一次电池（Primary Battery）， 二次电池（Secondary Battery/Rechargeable Battery ）可反复充电后使用。最常见的二次电池是汽车使用的铅酸蓄电池，下面就介绍一下作为充电式干电池使用的镍镉电池（NiCd ），从环保的角度出发，不断开发出了镍氢（NiMH ）电池、锂离子（Li-ion ）二次电池。   锂离子二次电池的特点 二次电池的铅酸蓄电池已有近百年的历史，现在还广泛用于汽车、不间断电源等中。铅酸蓄电池相对其他的二次电池，单位电容量的成本绝对要低，且能够大电流放电，但铅酸蓄电池的设置空间（大容量）要求高，重量较重，耐低温性能差，缺点很多。镍镉电池、镍氢电池、锂离子二次电池各有所长，我们认为未来将会向锂离子二次电池方向靠拢。 镍镉电池是可以进行大电流放电的二次电池，且已经用于剃须刀、电钻等电动工具中。但镉是一种环境污染物质，形象不佳，欧洲要求企业有回收的义务，亟待解决。之后开发的镍氢电池和锂离子二次电池，单位容量的重量较重，存在记忆效应等问题，影响了推广。然而随着手机、笔记本电脑的普及，20 世纪90 年代出现的锂离子电池具有优越的重量容量密度。而且，没有浅层放电和反复充电导致的放电容量下降（记忆效应），从而具有可补充充电的特点。   能量密度高 ■     相比镍氢（NI-MH ）电池，镍镉（NiCd ）电池在相同容积条件下 ■     重量能量密度增至2.0 至5倍 ■     体积能量密度增至1.5 至3倍   工作电压高 ■     约是镍镉电池、镍氢电池3倍的高电压 ■     可为串联电池使用数量的1/3 ■     电池使用设备可轻易实现小巧轻灵   无记忆效应 ■     可补充充电   环保且高度安全 ■     不使用镉、铅、水银等不利于环保的物质 ■     耐过度充电 ■     耐热稳定性高   可快速充电、具有随充放电的高度循环特性   锂离子二次电池的工作机理 通过锂离子二次电池的充电放电机理，借助充放电，锂离子通过隔板只是在正负极间来回移动。因此，阴、阳极材料基本上是形态的变化。     电解流劣化机理分析案例 通过QTof MS 推测在充放电后电解液中生成的成分以及电极附着有机物的结构   加速劣化试验和劣化机理分析 通过新材料新物质的稳定性评价和性能变化等试验，进行变化因素分的解析。对劣化样本中杂质的结构分析是搞清主要成分的分解和聚合等的劣化过程，以制定有效稳定添加剂的选择标准。劣化前后用MarkarLynx 软件的多变量分析（OPLS 模式）进行比较分析是有效的。它可以很容易地从多种成分信息中提取和特定出有差异的成分。   锂离子二次电池的组件 部件 部位 材料组成 分析项目/分析方法 正极 活性物质 钴酸锂（LiCoO2） 锰酸锂（LiMn2O4） 镍酸锂（LiNiO2） 电极、隔板表面附着有机物的鉴定ASAP/Xevo QTof MS 电极、隔板表面附着有机物的定量/鉴定有机溶剂的超声波提取UPLC/Xevo QTof MS 粘结剂 四氟塑料（PVDF） 导电助剂 碳黑、石墨等 负极 活性物质 碳黑、石墨等 微量添加剂 Li 、P、Cu 、Na 、Co 、Ca 、K等 粘结剂 SBR （ 丁苯乳胶）CMC （ 羧甲基纤维素） 隔板   多孔性高分子膜（ 高密度聚乙烯） 电解液 溶剂 羰基酯、碳酸酯 伴随充放电电解液的劣化分析（ 多变量分析的劣化生成物峰提取和结构预测）UPLC/Xevo QTof MS 电解质 LiPFe 、LiBF4 添加剂 碳酸丙烯酯 电池壳（ 外装壳筒）   钢制、铝制筒壳       参考文献 Journal of The Electrochemical Society,151（8） A1202-A1209 （2004）, “Identification of Li-Based Electrolyte Degradation Products Through DEI and ESI High- Resolution Mass Spectrometry” , S.Laruelle, S.Pilard, P.Grugeon, S.Grugeon, and J.-M. Tarascon. 通过加速劣化试验和劣化机理分析工作中的工作流程机理分析，对加速劣化或者随时间变化前后的样品采用UPLC®/飞行时间质谱计进行n≥3 检测，对全面检测出的成分信息（保留时间、精度质量、峰面积）自动进行制表。采用OPLS 模式分析该成分，得到S-Plot 。通过S-Plot， 可以轻松地提取出直观的劣化前后的增减成分。S-Plot 各连线对应精密质量、保留时间所特定的各成分（峰）。红色覆盖的两条连线表示劣化前后增减最多的成分。单击该连线后，可以显示趋势连线，还可以确认劣化前后该成分的增减情况。预测这两种成分在劣化中存在的氧化、还原、分解和聚合等关系。     电解液劣化机理分析的系统解决方案UPLC/Xevo QTof MS（UPLC/ 四极杆_飞行时间质谱仪） ■ IntelliStart 的自动校准功能 ■ 具备LockSpray 功能的高精度精密质量测定 ■ 高精度i-Fit 组成分析 ■ 最适合超速高度分离LC ■ 支持ESCi 、APCI/APPI、ASAP 、APGC   UPLC/SYNAPT G2 HDMS（UPLC/ 四极杆IMS 飞行时间质谱仪） ■ 配置离子迁移功能 ■ TAP 碎片功能（碎片离子间的归属） ■ IntelliStart 的自动校准功能 ■ 高精度LockSpray 功能的精密质量测定 ■ 高精度i-Fit 组成分析 ■ 最适合超速高度分离LC ■ 支持ESCi 、APCI/APPI、ASAP 、APGC 、MALDI   UPLC/LCT Premier XE（UPLC/ 飞行时间质谱仪） ■ 向导式校准辅助功能 ■ 高精度LockSpray 功能的精密质量测定 ■ 高精度i-Fit 组成分析 ■ 同时测定正负对照 ■ 支持ESCi 、APCI/APPI、ASAP   GC/GCT Premier（GC/ 飞行时间质谱仪） ■ 向导式校准辅助功能 ■ 高精度精密质量测定 ■ 高精度i-Fit 组成分析 ■ 附件直接导入探针 ■ 支持EI、CI、FI

Gaud Pinel1 ，Sandrine Roulet-Rochereau1 ，Marie-Hélène Le Breton1,2 ， Sylvain Chéreau1 ，Fabrice Monteau1 ，Paul Silcock3，与Bruno Le Bizec1 1Laboratoire d' Etude des Résidus et Contaminants dans les Aliments (LABERCA)，ONIRIS，Nantes，France 法国LABERCA 化学实验室 2瑞士洛桑雀巢公司，雀巢研究中心 3 英国曼彻斯特沃特世公司 应用优势 牛注射了重组牛生长激素，过几天后检测药物在牛体内的残留。首次得到了明确的检测结果，可用于此类药物的使用监控。 ■    Xevo TQ MS 的高灵敏度可准确检测生物基质中的重组牛生长激素（rbST ），符合2002/657/EC 要求。 ■    方法的灵敏度高，非常适合用于在给药几天后检测动物血液中痕量的残留激素药物。 ■    Xevo TQ MS 提供重复性好的结果，且基质效应很低，这对于药物监控计划实施中的常规分析来说是十分重要的。   沃特世解决方案 ■    ACQUITY UPLC，Xevo TQ MS 关键词 ■    rbST，reST ，生长激素，食品安全   简介 动物性食品安全控制是政府、国际法规机构与组织的重要任务，应该在食品进入消费环节之前就对食品安全进行有效的检测和控制。因为上市后的食品安全事件可能影响消费者信心与国际贸易。 重组牛生长激素（rbST ），又称为生长激素，在一些国家通常作为猪或牛的生长促进剂，将其用于乳牛可以增加牛奶产量1,2 。然而，生长激素的使用有严格的法律规范，在欧盟国家是完全禁用的3,4 。但是，这项法规的执行面临着很大的困难，主要是因为缺乏有效的分析工具来检测是否存在滥用该激素的情况。此分析的困难在于生长激素本身是蛋白质，且在生物基质中浓度较低，而样品基质组成又十分复杂。至今为止，分析方法仅仅局限为酶联免疫检测，这个方法不能将天然存在的激素与重组激素分离开来；尽管也有其它应用报导，但都不能专属性很强地检测生理水平的重组牛生长激素（rbST）5,6 。 直到最近才开发出了一项直接检测生物基质中重组牛生长激素（rbST ）的方法7,8 ，这个方法是将重组生长激素用胰蛋白酶进行水解，然后分析生长激素专有的N-端肽链。事实上，天然激素的N-端氨基酸是丙氨酸，而重组激素的N-端氨基酸是甲硫氨酸。 此应用文章展示了使用Waters® XevoTM TQ MS 分析注射了重组激素的动物血浆样品中的药物。在注射后几天进行检测，可清晰检测出结果，展示了一流水平。   实验部分 重组激素标准品 重组牛生长激素（rbST ）标准品与重组马生长激素（reST ）分别购自哈勃UCLA 医学中心国家激素与垂体项目（美国托兰斯）以及Bresagen 有限公司（澳大利亚T hebarton ）。   样本制备 重组牛生长激素在血浆中的样本提取、纯化步骤依照文献进行。7,8 LC 条件 LC 系统： ACQUITY UPLC®系统 运行时间： 8.00 min 色谱柱： ACQUITY® BEH C18   1.7µm，2.1 x 100 mm 孔径： 130 A 流动相A： 0.1% 甲酸水溶液 流动相B： 0.1% 甲酸乙腈溶液 流速： 0.6 mL/min 进样体积： 8.0µL 流动相梯度详见表1。   MS条件 MS系统：XEVO TQ MS 离子化模式：ESI+ 毛细管电压：3 kV 源温度：150℃ 脱溶剂温度：550℃ 脱溶剂气速：800 L/小时 碰撞气流速：0.15 mL/分   表1 ACQUITY UPLC流动相梯度   时间（分钟） 流速 %A %B 1 起始 0.600 95 5 2 0.6 0.600 95 5 3 1 0.600 95 5 4 4 0.600 5 95 5 6.5 0.600 5 95 6 7 0.600 95 5 7 8 0.600 95 5   MRM方法参数 MRM通道通过Masslynx软件中的IntelliStartTM行独立的参数优化，详见表2。 表2 Xevo TQ MS MRM模式的质谱参数 化合物 电荷数(z) 母离子 子离子 锥孔电压(V) 碰撞能量(V) N-端rbST 2 913 774 34 26 913 1047 34 25 N-端reST(I.S) 3 623 795 20 13 623 530 20 14   结果与讨论 LC/MS/MS条件优化 ACQUITY UPLC系统对胰蛋白酶水解的N-端肽片段又很好的保留和分离效果，总运行时间8分钟，重组牛生长激素（rbST ）与重组马生长激素（reST ）的N-端保留时间分别为2.74和2.79分钟（图1）。 重组牛生长激素（rbST）N-端肽链在电喷雾正离子模式产生双电荷的离子[M+2H]2+=913 ，将此离子作为母离子。根据2002/657/EC欧盟委员会决议10 ，MRM方法中选择了两个子离子用于确证；重组马生长激素（reST ）作内标物，在样品中的浓度为100 ng/mL ，其N-端肽链在电喷雾正离子模式产生三价电荷的离子[M+3H]3+= 623 ，将其作为母离子。   动物注射生长激素后体内rbST的检测 此方法用于检测注射生长激素后的动物样品。对奶牛一次性皮下注射500mg Lactatropin®药物，然后取样分析。 图1 对10 ng/mL的rbST和reST标准品进样，UPLC(ESI+)/MS/MS 的MRM特征离子信号分别为rbST 的N-端碎片离子为913>774和913>1047；reST的N-端碎片离子为623 >795和623 >530 图2 使用UPLC（ESI+）/MS/MS分析注射药物前（D0）与注射后两天（D2）采集到的血浆样本的的MRM特征离子信号图谱   图2显示了注射药物前采集到的血浆样本得到的谱图（D0）以及注射药物两天后血浆样本的谱图（D2）。 图2的结果表明：可以在给动物注射生长激素两天后在奶牛的血浆中检测到rbST 。对采集到的特征信号分析表明此方法可以对生长激素这个蛋白进行明确的确证，符合2002/657/EC 的要求，同时确认了检测方法的灵敏度。 与预计的动物血浆蛋白水平一致。基质干扰几乎检测不到，在实际血浆样本中的良好线性可保证对rbST 的进一步相对定量结果，在注射生长激素两天后还可以检测到血浆中50 ppb 的药物，与以往实验结果一致7,11 。表3显示了平行进样10 次得到的分析结果，这充分说明Xevo TQ MS 在检测低含量复杂样品时能够提供重复性好的数据。   表3 空白血浆中添加10-ppb 生长激素，得到的数据重复性结果 进样# 面积 高度_ 1 394 11865 2 374 12323 3 376 12471 4 365 12848 5 373 11824 6 364 12012 7 311 10105 8 428 13203 9 393 11965 10 347 10667 均值 372.5 11928.3 标准差 30.8 934.5 %RSD 8.3 7.8   结论 ■    Xevo TQ MS 的高灵敏度可准确检测生物基质中的重组牛生长激素（rbST ），符合2002/657/EC 要求 ■    方法的灵敏度高，非常适合用于在给药几天后检测动物血液中痕量的残留激素药物 ■    Xevo TQ MS 提供重复性好的结果，且基质效应很低，这对于药物监控计划实施中的常规分析来说是十分重要的   参考文献 [1] Burton JL, McBride BW, Block E, Glimm DR and Kennelly JJ. A review of bovine growth hormone. Canadian Journal of Animal Science. 1994; 74: 167-201. [2] Bauman DE and Vernon RG. Effects of exogenous bovine somatotropin on lactation. Annual review of Nutrition. 1993, 13: 437-461. [3] Council Decision of 20 December 1994 amending Decision 90/218/ EEC concerning t he placing on t he market and administration of bovine somatotropin (BST). Official Journal of the European Communities. 1994/936/EC [4] Council Decision of 17 December 1999 concerning the placing on the market and administration of bovine somatotropin (BST) and repealing Decision 90/218/EEC. Official Journal of the European Communities. 1999, 1999/879/EC. [5] Blokland MH, Sterk SS, Van Ginkel LA, Stephany RW, and Heck AJR. Analysis for endogenous and recombinant porcine somatotropine in serum. Analytica Chimica Acta 2003, 438, 201-206. [6] Pinel G, Buon R, Aviat F, Larre C, André-Fontaine G, André F, and Le Bizec B. Recombinant bovine somatotropin misuse in cattle. Evaluation of western blotting and 2D electrophoresis methods on biological samples for the demonstration of its administration. Analytica Chimica Acta 2005, 529, 41-46. [7] Le Breton M H, Rochereau-Roulet S, Pinel G, Bailly-Chouriberry L, Ryc hen G, Jurjanz S, Goldmann T, and Le Bizec B. Direct determination of recombinant bovine somatotropin in plasma from a treated goat. Rapid Communication in Mass Spectrometry. 2008; 22: 3130-3136. [8] Le Breton M H, Rochereau-Roulet S, Pinel G, Cesbron N and Le Bizec B. Elimination kinetic of recombinant somatotropin in bovine. Analytica Chimica Acta. 2009; 637: 121-127. [9] Monteau F, Antignac JP, Pinel G, Silcock P, Hancock P, Le Bizec B. Xevo TQ MS:Adressing new challenges in the field of growth promoters in biological samples. Waters Application Note 2009. [10] Commission Decision of 12 August 2002 implementing Council Directive 96/23/EC concerning the performance of analytical methods and the interpretation of results. Official Journal of the European Communities. 2002, 2002/657/EC. [11] Le Breton M H, Rochereau-Roulet S, Chereau S, Pinel G, Delatour T and Le Bizec. Identification of cows treated with recombinant bovine somatotropine. Journal of Agricultural and Food Chemistry, DOI:10.1021/jf903032q.  

  利用沃特世UPLC-Xevo TQ 系统一次性检测奶粉中13 种激素类物质 王冰，袁汉成，王少珍，耿霞 沃特世科技（上海）有限公司   2010 年7月，一则“乳制品致婴儿性早熟”的新闻报道引起了社会广泛的关注。这是至08 年“三鹿奶粉”事件之后，又一起有关乳制品食品安全事件。事件一出，农业部立即出台检测方法，对相关奶粉中的激素进行检测，检测结果为：该乳品中激素含量水平均在国家限定范围内。此次事件中人们对婴儿食用奶粉中的雌激素和孕激素水平是否超标的问题引起了广泛的讨论，同时对激素类物质检测的相关指标提出了更高的要求。曾有专家指出目前在我国还没有专门针对奶粉中激素检测的专门的国家标准检测方法，所采用的是动物性食品中激素检测方法。针对这一问题，沃特世最新推出了UPLC®质谱系统，专门针对奶粉中雌激素和孕激素物质进行快速检测与定量分析。-XevoTM TQ   沃特世UPLC-Xevo TQ 系统对奶粉中性激素快速检测的原理 首先利用UPLC （超高效液相色谱）的超高效分离能力实现对被检测的奶粉的有效分离，并采用Xevo TQ 的IntelliStartTM 功能快速方便建立质谱，PICS （子离子确认扫描）功能辅助定性，以及应用Quanpedia （方法库）自动导入和导出生成MRM 方法及液相方法，最后通过利用UPLC/Xevo TQ 的正负电离模式快速切换功能,实现一次进样，同时检测多种激素（7种雌激素，6种孕激素），明显缩短检测周期,提高检测通量。   分析条件与步骤 本试验适用于分析外源性激素类物质，如果分析内源性物质可对检测样品进行酶解，酶解后的处理方法相同。 样品前处理 ■    精确称取1g 奶粉样品于8ml 水中，充分混匀，超声5min ■    在混匀液中加入1ml 冰醋酸，酸化后再添加16ml 乙腈进一步沉淀水溶性蛋白。7500rpm 离心10min ，取上清液于氮气流下吹至乙腈含量 ■    分别用6ml 甲醇、6ml 水活化平衡Oasis HLB（200mg/6cc） 小柱 ■    上样，流速控制在3-4ml/min ■    清洗：分别用6ml 酸洗（5% 甲醇、2% 冰醋酸）、6ml 碱洗（5% 甲醇、2% 氨水）、6ml 甲醇水溶液（10% 甲醇）进行清洗 ■    将清洗后的Oasis HLB 小柱抽干10min ■    乙酸乙酯/甲醇（9/1 v/v ）活化氨基小柱（Sep-pak NH2 500mg/6cc ），活化平衡后与Oasis HLB 柱串联 ■    洗脱: 分别用6ml 乙酸乙酯/甲醇（9/1 v/v ）、6ml5% 氨水甲醇溶液洗脱串联后的两根柱子，收集洗脱液 ■    氮气流下吹干洗脱液至0.2ml ■    依次加入0.4ml 乙腈、0.4ml 水溶液，分别涡旋，使最终体积为1ml ，其中乙腈与水的比例为1:1 ■    7000rpm 离心10min 或过膜，收集上清液于UPLC/MS/MS 分析   LC 条件 LC 系统：ACQUITY UPLC®系统 色谱柱：ACQUITY UPLC HSS T3，2.1×50mm，1.8µm 柱温：40℃ 样品室温度：10℃ 流速：0.6mL/min 流动相A： 乙腈 流动相B：水 梯度： 弱洗针溶液：10% 乙腈水溶液 强洗针溶液：90% 乙腈水溶 总运行时间：6min 进样体积：5µL ，不充满定量环（针溢出） MS 条件 MS 系统：Xevo TQ MS 电离模式：ESI+/ESI ­喷雾电压：3.2kv（ESI+）/2.8kv（ESI-） 脱溶剂气：氮气，1000L/Hr，450℃ 锥孔气：氮气，50L/Hr 源温度：150℃ 采集模式：多反应监测（MRM） 其他质谱参数：   电离模式 MS(m/z) m/z 椎孔电压(v) 碰撞能量(v) 雌二醇 ESI- 287.22 142.46 50 50 170.97 50 32 雌酮 ESI- 269.16 144.9 50 40 158.0 50 42 雌三醇 ESI- 271.1 145.2 60 35 183.1 60 33 炔雌醇 ESI- 295.2 145.1 54 44 159.1 54 40 己烯雌酚 ESI- 267.2 237.2 42 30 251.2 42 24 己烷雌酚 ESI­ 269.2 119.1 30 30 134 30 20 17a-羟基孕酮 ESI+ 331.4 96.9 28 22 109.0 28 30 孕酮 ESI+ 315.35 96.9 24 22 108.9 24 26 炔诺酮 ESI+ 299.4 97.05 28 20 109.07 28 32 双烯雌酚 ESI­ 264.98 92.95 38 22 249 38 24 醋酸甲基孕酮 ESI+ 385.2 325.1 26 14 267.11 26 18 乙酸氯地孕酮 ESI+ 405 309.7 21 16 345.7 21 12 甲羟孕酮乙酸酯 ESI+ 387.1 327.3 23 16 285.5 23 16   数据采集与处理 本试验数据处理系统为Waters® MassLynxTM 4.1 SCN729，质谱方法开发用此软件的IntelliStart功能，不需要有经验的质谱操作人员进行方法开发与优化，同时配合TargetLynx®软件，只需设置几个参数即可得到完整的报告。IntelliStart功能可同时开发正负离子质谱参数，并实现一次进样正负离子同时扫描，如图1，图2所示。 图1   图2   图2 13 种激素类物质提取离子色谱图 图3 奶粉基质中8种激素类物质提取离子色谱图   结果与讨论 图2和图3分别为13 种激素类物质提取离子色谱图和奶粉基质中8种激素类物质提取离子色谱图。 通过使用UPLC/Xevo TQ MS 对13 种激素类物质进行分析，6min 时间即可得到分析结果，同时在灵敏度和分离度等方面都能得到满意的结果。沃特世ACQUITY UPLC 系统高效的分离度使质谱在多物质采集过程中对每一种物质都有足够的驻留时间进行分析，提高灵敏度的同时增加10 了定性的可靠性。Xevo TQ MS 快速的正负离子切换功能使得实现一次进样，同时检测多种激素（7种雌激素，6种孕激素），明显缩短检测周期，提高检测通量。 Xevo TQ 系统应用MassLynx 4.1 的IntelliStart 功能，可自动、方便、快速的进行样品质谱条件的自动优化。本试验质谱方法开发全部使用了IntelliStart 功能自动优化的质谱参数，试验结果均能令人满意。同时因该系统不需要有经验的质谱操作人员进行方法开发与优化，所以很大程度上节省了人力和物力。

Claude R. Mallet, Dimple D. Shah Waters Corporation, Milford, MA, U.S.   简介 在1938年，美国政府通过了联邦食品、药物和化妆品法令（FFDCA，FDCA，或FDA），赋予美国食品和药品监督管理局（FDA）督察食品、药品和化妆品的权利。如今，美国FDA管理着除了美国农业部管理的肉类、家禽肉和某些奶制品之外的国内和进口的所有食品。现在，所有的牛奶都要由FDA、美国政府和牛奶生产商共同努力监控药物残留。在2007年的财政年报1中，有超过400万的样品都要分析广大范围的抗生素，如内酰胺、大环内酯和四环素。例如，美国FDA建议牛奶中某种大环内酯类抗生素替米考星的最大残留量（MRL）50ug/kg，这个标准也被欧盟接受。许多国家都遵从美国食品和农业联合组织/世界卫生组织（WHO）的40μg/kg的最大残留量，而不是为每种药物设置各自的最大残留量。 大环内酯类是一组药物，它的活性来源于大环内酯环的存在，而大环内酯环上有可能有一个或多个脱氧糖，经常为二脱氧甲基已糖和脱氧糖胺。内酯经常是14-、15-或16-环的。大环内酯类抗生素被广泛应用于兽医药物，以治疗许多疾病，例如哺乳期奶牛的呼吸道疾病、临床症状不显的乳腺炎，或者它们可以被作为饲料添加剂以促进生长。如果牛奶提取期太短，抗生素残留可能仍然存在，可对消费者带来直接的毒副作用（过敏反应）2。 图1 大环内酯类抗生素   离线的SPE萃取方案 传统上，微生物检测3被用来监测食品基质中的抗生素。这些方案都有很好的定量结果，但越来越缺乏高度的专属性。随着现代实验室LC/MS或LC/MS/MS系统的普遍使用，多残留方法是更被常规工作所认可的方法。 包含食品基质的分析方案通常是很复杂的，需要数个小时的手动操作。例如，饮用水方案（较低的样品复杂度）由下列步骤组成：直接上样到SPE小柱、少量的清洗步骤、洗脱，以及最后的蒸干和用流动相复溶。象食品样品之类的固体基质（较高的样品复杂度）必须先用水溶液或有机提取缓冲液均质提取，然后是一些离心步骤、液液萃取（可选项），最后在实施SPE萃取方案前用水溶液稀释。关于牛奶分析，最常用的萃取方案是用乙腈沉淀蛋白4。混合物然后离心数分钟。上清液可以用其它的萃取技术进一步提纯。   离线的SPE牛奶方案 步骤1： 加入5mL的牛奶到50-mL的离心管中 步骤2： 加入15mL的乙腈 步骤3： 涡旋并在3200RPM转速下离心15min 步骤4： 转移上清液到50-mL的离心管中 步骤5： 加入20mL的正己烷 步骤6： 涡旋15min 步骤7： 在3200RPM转速下离心15min 步骤8： 移去正己烷层 步骤9： 蒸发乙腈/牛奶上清液到3mL 步骤10： 加入15mL 0.1M、PH为8.0的硫酸盐缓冲液 步骤11： 用10mL的甲醇活化Oasis® HLB（6cc） 步骤12： 用10mL的水活化Oasis® HLB（6cc） 步骤13： 用10mL2%的NaCl活化Oasis® HLB（6cc） 步骤14： 用2mL 0.1M、PH值为8.0的磷酸盐活化Oasis®HLB（6cc） 步骤15： 上载复溶的样品（步骤10） 步骤16： 用5mL的水清洗 步骤17： 用5mL40%的甲醇水溶液清洗 步骤18： 使Oasis HLB流干5min 步骤19： 用5mL95%的甲醇水溶液洗脱 步骤20： 蒸发近干（45min） 步骤21： 用1mL的初始条件流动相复溶 步骤22： 用0.45μm的聚偏二乙烯氟化物（PVDF）过滤萃取物   在线的SPE萃取方案 以前的出版物（在线SPE/LC/MS/MS部分Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ）介绍了新颖的自动化萃取/分析技术：Waters AquaAnalysis系统。总体解决平台带来了多种好处：减少手工操作、减少溶剂消耗和减少样品体积。使用在线的SPE/LC/MS/MS技术平台省去了消耗时间的蒸干/复溶步骤。 在线的SPE/LC/MS/MS技术不仅仅适合于饮用水分析。饮用水样品可直接上样到自动进样器，然后就是完全自动化的电脑控制的萃取/分析步骤。对于食品分析，固体样品要先转变成液体形式。分析开始于均质化以释放被束缚的分析物到液相萃取缓冲液。均质化需要经过离心步骤，然后上清液被转移出来。在这时，目标分析物以合适的形式存在，以便于其它的净化、浓缩或萃取步骤，例如，液液提取（LLE）和SPE。通过使用软件控制下的在线SPE方案，食品样品的萃取/分析过程现在仅需要均质化、离心和稀释步骤。   在线的SPE牛奶方案 步骤1： 加入1mL牛奶到50mL的离心管中 步骤2： 加入20ul一定浓度的氨水 步骤3： 加入2ml的乙腈（2:1的比例） 步骤4： 涡旋并在3500RPM的转速下离心15min 步骤5： 转移2mL的上清液到20ml的进样瓶 步骤6： 加入18mL的水 步骤7： 进样5mL   实验 大环内酯所用的MRM条件都列在了表1中。使用的SPE萃取柱是Waters® Oasia HLB 2.1x20 mm，25μm，中性pH值上样，流动相（无添加物)）。使用的分析柱是XBridgeTMC18 2.1x50 mm 3.5μm，低pH值流动相洗脱。清洗和再活化参数都列在了下面。   表1 大环内酯的MRM条件 大环内酯 母离子(m/z) 子离子(m/z) 红霉素 734.4 158.2 克拉霉素 748.5 158.2 罗红霉素 837.5 679.4 阿齐红霉素 749.6 591.3 螺旋霉素 843.6 174.2 替米考星 869.6 174.2   SPE和LC工作条件 载样泵： 管路A:100%水 管路B： 100%甲醇 载样流速： 4.0 mL/min 清洗液： 20%的甲醇/乙腈（30/70）+0.5%甲酸 再平衡泵： A：50/50的甲醇/丙酮 B：80/20的乙酸乙酯/丙酮 C：80/20的正己烷/丙酮 再平衡流速： 4.0 mL/min 萃取柱： Oasis HLB 2.1x2 mm，25.0μm 分析柱： XBridge C18 2.1x50 mm，3.5μm     结果和讨论 图2为添加了0.5ppb每种抗生素的牛奶样品的具有代表性的提取离子色谱图。抗生素在微量水平都具有良好的信号和峰形。对于食品样品，样品的复杂度要高于饮用水样品，而且清洗步骤需要优化以最大程度的清除干扰物质，而不洗脱掉所感兴趣的分析物。图3为添加了100ppb红霉素，分别用5%、10%、20%、30%和40%甲醇清洗的色谱图。在图2中，20%甲醇清洗与5%甲醇清洗相比，会产生更高的信号。5%甲醇的弱信号可归因于离子抑制效应。可是，当清洗步骤中的有机相比例增加的过多时，信号的灵敏度由于部分洗脱而有下降趋势。 图4为红霉素浓度从1.0ppb到500.0ppb、线性系数为0.9902的校正曲线图。表2是在线和离线SPE萃取方案肩并肩的对比，从文献到处理天然的牛奶样品到适于LC/MS或GC/MS分析的理想形态。当评价在线SPE/LC/MS/MS和离线方案时，通常的萃取程序和溶剂、实验室人员和时间的整体应用都是很重要的。其它的食品样品有各种各样的结构，在SPE萃取前可能需要其它的处理程序。例如，牛奶样品在用SPE装置进一步净化前需要简单的蛋白沉淀和离心。对于像   图2 添加了0.5ppb的牛奶的提取离子色谱图   图3 牛奶提取的优化清洗   图4 红霉素的校正曲线 水果和蔬菜这样的固体样品，使用萃取缓冲液的低温碾磨或均质化步骤是优先考虑的方法。对于通常的萃取程序，很容易找到每个萃取步骤都使用广大范围的体积和时间的文献报道。通常，使用SPE方案，上样、清洗和洗脱体积都根据SPE装置的床台尺寸估量。这可以首先保证在每个步骤中SP E吸附剂的整体润湿。一旦这个数值定下来，这可以增加数倍(依赖于化合物)确保多个体积置换以使清洗步骤最小化清除干扰和洗脱步骤最大化回收率。在实际的操作中，柱床上样量诱捕能力的增加需要SPE程序中体积的增加；这最终会增加样品制备时间和溶剂消耗量。   结论 在过去的这些年里，许多国家已经尽了很大努力来进一步提高他们的国内和进口的食品供应的安全性，以使消费者能够享受安全的食品供应。正因为这样，许多分析方法都可以得到，并在常规的分析中被使用。随着最小化溶剂使用量和最大化实验室人员使用的需求增 加，自动化平台的使用绝对会满足这些要求。这篇应用文献描述了牛奶样品中抗生素的自动化萃取和分析。传统的萃取前处理步骤是极其消耗时间的；他们需要更大数量的化学品和各种各样的试剂。使用Waters AquaAnalysis系统处理牛奶样品的时间大约为20min，这与离线方案相比可以减少70-90%的时间。   表2 牛奶样品的离线和在线萃取方案的溶剂消耗量和处理时间 参考文献 [1] U.S. FDA National Milk Drug Residue Database. Food and Drug Administration, Center for Food Safety and Drug Administration, 2007. Available online: http://www.cfsan.fda.gov/~ear/p-mis.html [2] W A Moats, M B Medina. Veterinary Drug Residues, ACS Symposium Series 636, American Chemical Society, Washington, DC, 1996, p.5. [3] 43rd Meeting of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives. Evaluation of Certain Veterinary Drug Residues in Food, WHO Tech. Rep Ser., No 855, 1995, p.85. [4] J Wang, D Leung, S P Lenz. J. Agric. Food Chem. 54: 2873, 2006. [5] M Dubois, D Fluchard, E Sior, P H Delahaut. J. Chromatogr. B.753: 189, 2001. [6] S B Turnipseed, W C Andersen, C M Karbiwnyk, M R Madson, K E Miller. Rapid Commun. Mass Spectrom. 22: 1467, 2008.

Oasis HLB 净化和aCQUiTY UPLC/TQD 快速分析动物性食品中糖皮质类激素兴奋剂的含量 李建中，金琦芸，Yap Swee Lee 沃特世公司，上海，中国   概要 本文应用沃特世(Waters®)Oasis® HLB 固相提取技术和ACQUITY UPLC® 超高效液相色谱/TQD 串联四极杆质谱系统测定分析动物性食品中糖皮质类激素兴奋剂。   前言 糖皮质激素(Glucocorticoids )的化学结构属于类固醇类化合物，具有调节糖代谢，促进蛋白转化为糖，提升血糖浓度，抗炎症、抗过敏作用，调节水盐代谢等作用。从体外大量摄入糖皮质类激素会造成体内激素比例失调，糖代谢和无机盐代谢紊乱；长期大量使用糖皮质类激素还会诱发或加重感染，出现心血管系统并发症、骨质疏松、肌肉萎缩、伤口愈合迟缓以及出现消化系统并发症，例如使胃酸、胃蛋白酶分泌增加，抑制胃粘液分泌，降低胃肠粘膜的抵抗力，甚至造成消化道出血或穿孔。糖皮质类激素对人体健康除了具有很多副作用外，也会影响运动员参加比赛时的身体状态，违背了体育比赛公平竞争的原则，所以此类药物属于国际奥委会宣布禁用合成类固醇类兴奋剂。近年来在一些供运动动员食用的保健类食品、营养补充剂及部分动物性食品中检出含有糖皮质类激素类的事件屡有发生，由于误食此类被污染的食品，使很多运动员出现不必要的阳性结果。2008 年北京奥运会除对参赛运动员进行严格的兴奋剂检测外，同样要对供运动员食用的各类食品进行严格的监测。本文采用沃特世HLB 固相提取净化技术和UPLC®/TQD 系统建立动物性食品中糖皮质类激素的快速、高通量筛查及确证技术，为此类食品的兴奋剂监测提供了全方案的技术支持。   实验方法   试剂和材料 20 孔真空提取装置，旋转蒸发仪，Oasis HLB(500 mg，6 cc )；乙腈，甲醇，甲酸，乙酸乙酯均为色谱纯，实验用水为超纯水，无水硫酸钠。糖皮质类激素标准品：泼尼松，泼尼松龙，氢化可的松，可的松，甲基泼尼松，倍他米松，地塞米松，倍氯米松，氟氢可的松，纯度≥98% 。   液相色谱条件 液相系统：     沃特世 ACQUITY UPLC 色谱柱：       ACQUITY UPLC BEH C18                   2.1mm x 50mm，1.7 μm 柱温：      30˚C 流速：       500 μL/min 流动相 A：    水 流动相 B：    乙腈 梯度：       时间0 min 20% B 时间         5 min 25% B 时间         5.3 min 50% B 时间         5.5 min 60% B 时间         5.6 min 20% B 时间         6.5 min 20% B 总分析时间     6.5 min 进样量： 10 μL   质谱条件 质谱系统：     沃特世 ACQUITY® TQD 检测器 电离模式：     ESI(-) 毛细管电压：     2.8 kV 去溶剂气温度：     400˚C 去溶剂流速：     800 L/h 离子源温度：     130˚C 数据采集：     多反应监测(MRM) 碰撞气体：     氩气3.2 x 10-3 mba 调节ACQUITY TQD 使得母离子和子离子在半峰宽的分辨率为0.7 Da 以内。本实验的多反应监测(MRM )、驻留时间、锥孔电压和碰撞能量列表参见表 1。标注下划线的离子对用于定量分析。   数据采集和处理方法 沃特世公司MassLynx™4.1 操作软件用于数据采集，TargetLynx™ 应用管理软件用于数据处理。   样品前处理 称取5 g 的处理均匀的猪肉样品，依次加入10 g 无水硫酸钠，   20 mL 乙酸乙酯，混合均匀后均质 1 min ，振荡提取 10 min ，在10000 转/min 下离心 5 min 。上清液转移至浓缩瓶中，再向残渣中加入 10 mL 乙酸乙酯重复上述操作一次，合并两次提取液，在40 ˚C 下旋转蒸发至干。浓缩后样品用5 mL 30% 甲醇水溶液溶解。Oasis HLB 预先依次用     3 mL 甲醇，6 mL 水活化。将上述提取液全部通过柱，依次用5 mL 水，5 mL 50% 甲醇水溶液淋洗后抽干。用 10 mL 甲醇/乙腈(1:1 )洗脱并接收，洗脱液在40˚C 下氮气吹干后，用乙腈/水（2:8 ）溶解定容至 1 mL ，过0.2 μm 滤膜后上机分析测定。   结果与讨论   样品前处理条件的确定 糖皮质类激素属于一类脂溶性激素，在结构上都是环戊烷多氢菲衍生物。所以选择采用乙酸乙酯作为提取溶剂能够实现从动物组织中有效的提取此类药物。由于此类化合物具有较强的非极性，在HLB 柱上有较强的非极性保留作用，所以实验采用低洗脱强度的甲醇/水溶解样品提取物转移上HLB 柱，依次用水和50% 甲醇水溶液洗除极性、中等极性的样品基质杂质，再用甲醇/乙腈混合溶剂把糖皮质类激素药物洗脱下来，而部分动物油脂等非极性杂质保留在 HLB 上，从而实现了糖皮质类激素的有效净化富集。 表 1. ACQUITY TQD MRM 参数。   色谱条件的优化 由于 9 种糖皮质类激素化合物极性上存在一定差异，所以采用梯度方法在乙腈/水的流动相体系下实现分离，结果见图1。其中泼尼松龙和可的松(405.2﹥329.2，405.2﹥359.2 )，倍他米松和地塞米松(437.2﹥361.2，437.2﹥391.2 )两组化合物的母离子和子离子完全一样，只是在结构上空间异构，在质谱上无法区分，所以必须通过色谱实现分离后定量定性分析，实验优化了梯度程序、色谱柱温及流速，使两组化合物实现了基线分离，从而能够准确定性和定量测定。 质谱条件的优化 在ESI(-)模式下，糖皮质类激素化合物形成[M-H+HCOOH]-形式的分子离子峰，通过碰撞处理，子离子扫描进一步得到定量和辅助定性子离子碎片峰，进而采用MRM 模式进行监测，MRM 条件参见表 1。实验分别对毛细管电压、锥孔电压、碰撞能量等参数进行了优化，使方法灵敏度和分辨率满足检测需要。   方法的线性范围、准确度和精密度 9 种糖皮质类激素混合标准品在1 ng/mL ~ 100 ng/mL 浓度范围内进样分析，得到线性方程和相关系数。采用空白样品添加10μg/kg 水平下，平行6 次，计算添加回收率及RSD， 结果参见表 2 和图 2。 图 2. 糖皮质类激素标准品、空白样品、添加样品总离子流(TIC )色谱图。 表 2. 糖皮质类兴奋剂测定方法线性方程、相关系数、相对标准偏差和回收率。   结论 本文采用HLB 净化和UPLC/TQD 系统建立了快速有效的监测动物性食品中9 种糖皮质类激素的全分析方案。Oasis HLB 能够有效地对动物性样品进行净化和富集，除去油脂、蛋白等基质干扰，提高了方法灵敏度，降低了基质效应；UPLC/TQD 系统在6.5 min 内实现了高效分离和快速测定，同时实现了准确定量和确证的目的。为奥运动物性食品中糖皮质类激素的监测提供了有力的技术支持和参考，也对其它类型食品的监测提供有意义的借鉴   参考文献 1.         Vaerie A.Frerichs,Kathleen M.Tornatore. Journal of ChromatographyB,802(2004) 329-338. 2.         Van den hauwe,F.Dumoulin,J.P.Antignac,M.P.Bouche,C.Elliott,C.Van Peteghem. Analytica Chimica Acta,473(2002)127-134. 3.         Olivia Van den hauwe,Manuela Schneider,Ali Sahin,Carlos H.Van Peteghem. J.Agric. Food Chem,51(2003)326-330.  

  米尔福德, 马萨诸塞州 - 2010年11月8日 沃特世公司（WAT:NYSE）今天推出了Waters® NuGenesis ®科学数据管理系统（SDMS）Form Designer 2.1。其作为SDMS Vision PublisherTM中的一个模块，能将几种分析技术的SOP（标准作业程序）转化成一个电子表格，为指定的分析工作流程提供支持。 由于SDMS Vision Publisher可作为其它实验室应用的连接端口，如LIMS（实验室信息管理系统）、小型实验室设备、仪器及消耗品库存、色谱数据系统以及SDMS库，因此Form Designer 2.1模块可创建一个综合性的电子工作流程，实现无缝信息传输。 "SDMS Form Designer的开发旨在减少人工SOP的抄写错误，提高工作流程效率，尤其是质量控制（QC）实验室中的复杂流程，"沃特世信息科学高级产品经理Thomas Schmidt说。"Form Designer 2.1是一种可以整合各种实验仪器和系统的配置工具，使用方便，支持大部分生命科学公司内采用的精益六西格玛措施。" 新型SDMS Vision Publisher Form Designer 2.1包含全新功能并对原有功能进行升级，包括简化的配置功能、增强的外部代码集成工具，以及添加自定义任务按钮。 欲了解更多关于SDMS Intelligent Procedure Manager的信息，请点击这里。   关于沃特世公司（www.waters.com） 50年来，沃特世公司（NYSE:WAT）通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2009年的总收入达15.8亿美元，员工人数达5000人；公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。 #   #   # Waters, ACQUITY, Ultra Performance Liquid Chromatography和UPLC均为沃特世公司的商标   联系人： Allen Zhang                                    周瑞琳（Grace Chow） 沃特世公司市场部                               PMC Communications Lin_Hai_Zhang@waters.com                       grace.chow@pmc.com.cn 020-83569288

目标 使用TOF/MS大范围筛检环境用水中的农药时，成功识别天然河水里的非标靶不明污染物。 背景 TOF筛检常用于目标筛检活动，筛检时庞大的数据库被用于测定目标分析物的主要成分。在分析环境用水时，农药污染物筛检是其中一项最为重要的分析。然而，其他污染物，如兽药或人用药品及其代谢物，也可能出现与农药相似的超痕量水平，并对水生态系统造成同样的危害。 非标靶化合物的发现可确定和识别该化合物。TOF测试设备必须具有足够的敏感度和准确性，确保未知物质得到正确检测和识别，同时保持极低浓度化合物精确质量的精准度。低能量先驱离子和MSE高能量碎片离子正确的精确质量数据，以及窄色谱提取窗口使得识别非标靶物越来越可靠。 方法 沃特世Xevo™ G2 QTof配合ACQUITY UPLC®和ChromaLynx™XS软件数据处理用于快速筛检用Oasis® HLB Cartridges提取的河水。使用UPLC®通用筛检梯度，运行时间为5分钟。使用的流动相为10mM溶于水的醋酸铵溶液和10mM溶于甲醇的醋酸铵。对河水空白基体进行了筛检，检查任何可能出现的背景污染物。通过ChromaLynx XS软件去卷积后，在第2.44分钟发现了明显高峰，如图1所示，离子质荷比(m/z)为237.1031。 当使用MassLynx™应用管理软件的化学元素构成分析该精确质量离子时，发现最可能的分子式为C15H13N2O，用i-FIT™选定为最适合分子式。此分子式与质子化卡马西平(Carbamazepine)相吻合，是一种人用抗痉挛和稳定情绪药物。随后用MassFragment™工具对第2.44分钟获取的低能量MS和高能量MSE光谱进行处理，如图2所示，结果与卡马西平母体分子以及其主要碎片离子相符。 最后，通过和卡马西平标准溶剂进行对比，确定了结果。如图3所示，溶剂标准数据与非标靶污染物数据相匹配，这明确说明该非预期化合物为卡马西平。 总结 Oasis HLB SPE提取，快速ACQUITY UPLC分离，Xevo G2 QTof探测以及随后ChromaLynxMS软件进行的数据处理成功筛检了天然河水。 非标靶筛检法的使用检测和识别了非预期污染物，药物分子卡马西平。 Xevo G2 QTof获取的准确和可重现的精准质量数据明确了先驱离子和碎片离子的结构。此方法为分析员提供了飞镖靶筛检和发现的方案，最终结果可信度高。

  北京-2010年11月26日-历时三天的"第三届中国国际环境监测仪器展览会"今天降下帷幕。此次展会由中国环境保护产业协会主办、中国环境监测总站承办，是我国最具权威的环境监测仪器专项展览。展会以交流新技术、展示新成果为主题，宗旨在于推进环境监测装备能力建设，提高环境监测仪器现代化水平。 来自国内外的近100家参展厂商纷纷展出其在环境监测领域的新产品和新技术，其中包括环境水质连续自动监测系统、废水自动在线监测系统、环境空气连续自动监测系统、废气自动在线监测系统、放射性、噪声、振动、光、热测定仪和连续自动监测系统、实验室分析仪器设备、环境污染事故应急与便携监测仪器设备、水质污染物采样和监测专用仪器设备、气体污染物采样和监测专用仪器设备、数据处理与传输及其它特殊监测仪器和设备、监测分析所用的标准物质、化学试剂及玻璃器皿等实验用器材。而沃特世公司将携其在线固相萃取（On-line SPE）系统在展会受到众多来宾的关注。 沃特世展位   总站领导参观沃特世展位 沃特世公司造型简洁、充满科技时尚感的展位，吸引了许多业内人士的驻足、观摩。无论是在线固相萃取（On-line SPE）系统实验设备的讲解，还是化学消耗品的展示，都给参观者留下了深刻的印象。沃特世的On-line SPE系统包括从自动样品制备、在线超高效液相色谱/串联四级杆质谱分析和科学数据管理（SDMS），到最后的检测质量保证控制的ERA标准样品和水平测试（PT）服务与技术支持，可以充分解决和帮助用户轻松满足环境监测的严格要求。 沃特世在线固相萃取（On-line SPE）系统实验室            关于沃特世公司（www.waters.com） 50年来，沃特世公司（NYSE:WAT）通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2009年的总收入达15.8亿美元，员工人数达5000人；公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。 #   #   # Waters, ACQUITY, UltraPerformance Liquid Chromatography和UPLC均为沃特世公司的商标   联系人： Tian Zheng                                      周瑞琳（Grace Chow） 沃特世公司市场部                                PMC Communications Tian_zheng@waters.com                           grace.chow@pmc.com.cn 020-83569288

引言 北美地区最近出现的宠物食品污染事件突出了对宠物食品、动物饲料以及组织样品中的三聚氰胺及其代谢物（三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸）进行快速、确定性分析的必要性。如2007年5月7日的《华盛顿邮报》所述，在美国，未知数量的猫狗因食用了某些品牌的宠物食品而患病或死亡。这导致了数百万磅宠物食品的召回。在食用了受污染宠物食品的动物肾脏内，发现三聚氰胺-三聚氰酸的结晶体迅速形成；这很可能是动物患病甚至死亡的原因。最近，公众强烈要求制造商和政府监管机构采用更准确、快速的分析方法进行食品安全性检测；而此次疾病的突发使这一呼声更加高涨。 在证实了此次污染的广泛性之后，美国食品药品管理局（FDA）报告称美国的三聚氰胺存在于面筋和稻米蛋白浓缩物中；这些产品均从中国进口，作为宠物食品使用1。动物饲料中也受到了三聚氰胺的污染2，这引起了关于受污染产品可能转移至人类食品供应的担忧。 本文介绍两种方法：第一种方法是用于分析高浓度目标物质的沃特世® ACQUITY®超高效液相色谱（UPLC®）光电二极管阵列法（PDA）；第二种方法是用于分析ppb级浓度的ACQUITY UPLC®/MS/MS法。撰写本文时，其中的一种目标物质“三聚氰酸一酰胺”在市面上买不到；因此，未用上述方法对其进行分析。目前认为该化合物与毒性效应无关，因此对分析过程不重要。两种方法均可用不到两分钟的时间给出结果。     结果和讨论 在含水混合液中，三聚氰胺和三聚氰酸可通过氢键形成晶格结构。这阻碍了对包含这两种化合物的样品进行同步萃取和分析。三聚氰胺不与三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸一酰胺反应；因此可在一次检测中，同时对这些化合物进行萃取和分析。结果表明：试验部分所述的萃取步骤适用于三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺。最近，美国食品药品管理局公布了使用SPE萃取组织样品中的三聚氰酸的详细方法3。   试验 萃取宠物食品中的三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的预备程序 称量0.10 -1 g宠物食品 在5-10 mL、2%的氢氧化铵溶液中进行萃取 用一个0.45微米的注射器式滤器进行过滤 将100 μL滤液与900 μL流动相混合后进样 三聚氰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸由美国TCI公司提供。干狗粮从当地的一家超市中购得。三聚氰酸的标准储备液通过加水溶解而制得。三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的标准储备液通过溶解于0.1%的氢氧化钠水溶液而制得。标准储备液用溶于90/10乙腈／水的混合溶剂中10 mM醋酸铵进行进一步的稀释，以配制出所需的浓度水平。   UPLC的条件 液相色谱系统：    沃特世ACQUITY UPLC 色谱柱：              ACQUITY UPLC BEH HILIC 2.1 x 100 mm、1.7 μm 柱温：                  35℃ 流速：                  700 μL/分钟 流动相：              溶于90/10乙腈／水的10 mM醋酸铵 进样量：              5 μL ACQUITY PDA： 200 -300 nm    质谱条件 质谱系统：           沃特世ACQUITY TQD 软件：                  沃特世MassLynx™第4.1版 电离模式：           ESI正离子（三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺） ESI负离子（三聚氰酸） 毛细管电压：       3 kV 脱溶剂气：           氮气，900 L／小时 锥孔气：              氮气，50 L／小时 源温度：              150 ˚C 脱溶剂气温度：    400 ˚C 采集：                  多反应监测（MRM） 碰撞气：              氩气，3.5 x 10-3毫巴 对每种化合物采集两种多反应监测（MRM）的跃迁数据。主要跃迁用于定量分析，次要跃迁用于确认。MRM的跃迁、停顿时间、优化后的碰撞能量以及锥孔电压见表1。   第1部分：UPLC /MS/MS分析 ACQUITY UPLC-TQD 台顶式串联四极杆质谱仪可用不到1.5分钟的时间完成对三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的分离和确认。参见图3。ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱可给出清晰的峰形，从而可对宠物食品和面筋型样品进行可信的定量分析。为实现准确定量，组织样品的分析通常需要使用一种同位素标记型内标。本文未对组织样品的分析进行说明，这是因为目前没有适用于这些化合物的同位素标记型内标。   三聚氰酸在另一次检测中进行分析，所用的色谱条件与三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的分析条件相同。图4给出了氰尿酸的一幅UPLC/MS/MS色谱图。 图5给出了萃取得到的一种三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺加标型干狗粮样品。沃特世TargetLynx™应用管理软件可自动处理数据并报告定量分析结果；该软件通过计算每种化合物的主要和次要MRM跃迁之间的离子比，可确定是否存在三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺。图6给出了关于三聚氰酸二酰胺的TargetLynx浏览器界面。      第2部分：UPLC/PDA分析 图7给出了使用PDA检测型ACQUITY UPLC分离三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的加标型宠物食品的典型过程，该分离过程需时不到1.5分钟。该分离使用相同的ACQUITY BEH HILIC 2.1 x 100 mm色谱柱，所用的流动相构成也与串联四极杆质谱法相同。结果表明这两种化合物的校准曲线在1-25 ppm的范围内呈线性。   三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的色谱峰可根据保留时间而轻松鉴定，并可通过积分进行定量分析。在图7中，1分钟处的未知峰在221 nm下出现λ最大值。检测三聚氰酸二酰胺的纯标准品时，观察到一个具有相近保留时间和λ最大值的色谱峰；因此认定其为三聚氰酸二酰胺的一种杂质。紧邻三聚氰酸二酰胺峰的第二个未知峰在236 nm下出现λ最大值，与未加标型狗粮的色谱峰相近。 除了保留时间的完全匹配之外，通过使用PDA和Empower™软件的UV光谱库功能，也能提高成分鉴别的可信度。图8和图9分别给出了10 ppm三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺标准品以及10 ppm三聚氰酸标准品的光谱指数图。图10给出了一幅用以确认三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺加标型宠物食物样品的光谱匹配情况的光谱指数图。   结论 ACQUITY UPLC - 台顶式串联四极杆质谱仪（TQD）可提供更高的灵敏度和质量特异度，从而可用不到2分钟的时间定量检出ppb水平的三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺。使用次要的MRM离子跃迁可对加标型狗粮中是否存在三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺进行确认。由于存在形成三聚氰胺-三聚氰酸结晶体的风险，因此三聚氰酸在另一次色谱检测中进行分析。 当不需要较高的灵敏度和质量特异度时，ACQUITY UPLC PDA检测可作为UPLC/MS/MS的一种快速而划算的替代方法。快速分析三聚氰胺及其代谢物的能力可简化与质控或产品合规相关的工作流程。   参考文献 1.     《华盛顿邮报》的网址： http://www.washingtonpost.com/wp-dyn/content/article/2007/05/06/AR2007050601034.html 2.     FDA的网址： http://www.fda.gov/oc/opacom/hottopics/petfood.html 3.     在线文章：http://www.flworkshop.com/ ，“用LC-MS/MS测定组织中的三聚氰胺和三聚氰酸的简化方法”，由FDA 方法开发分部的Alexander J. Krynitsky撰写

北京-2010年11月8日-"第三届中国国际环境监测仪器展览会"将在2010年11月24日-26日在北京的中国国际展览中心举办。这次展览会将以交流新技术，展示新成果为主题，推进环境监测装备能力建设，提高环境监测仪器现代化水平。沃特世公司将携其在线固相萃取（On-line SPE）系统在展会上亮相。 本次展会适逢中国环境监测总站30周年站庆，正值环境监测能力大发展之际，将广邀国内外环境监测仪器专家、学者进行技术讲座，集中展现中国环境监测仪器装备技术水平，全面展示30年来中国环境监测的成果和发展历程。展览期间将举办"环境监测技术论坛"，环境保护部和中国环境监测总站将就我国环境监测的能力建设和技术需求进行专题讲座，各环境监测仪器厂商将现场交流技术和经验。我们相信，这次展览将进一步密切国内外环境监测仪器的研制、生产、使用者之间的联系，环境监测仪器的国产化、现代化水平也将进一步提高。 沃特世公司将在展会上面向国内用户公开展示其在线固相萃取（On-line SPE）系统。该解决方案包括从自动样品制备、在线超高效液相色谱/串联四级杆质谱分析和科学数据管理（SDMS），到最后的检测质量保证控制的ERA标准样品和水平测试（PT）服务与技术支持，可以充分解决和帮助用户轻松满足环境监测的苛刻要求，无疑将为中国的环境监测事业作出贡献。 沃特世展台信息：中国国际展览中心  Hall 1-B，B157-161、B176-180   关于沃特世公司（ www.waters.com ） 50年来，沃特世公司（NYSE:WAT）通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2008年的总收入达15.8亿美元，员工人数达5000人；公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。 #   #   # Waters, ACQUITY, UltraPerformance Liquid Chromatography和UPLC均为沃特世公司的商标   联系人： Tian Zheng                           沃特世公司市场部 Tian_zheng@waters.com   周瑞琳（Grace Chow） PMC Communications 020-83569288  13602845427 grace.chow@pmc.com.cn

摘要 一种α-牛乳清蛋白和两种β-牛乳清蛋白标准分别用超纯水稀释配制，采用ACQUITY UPLC BEH300 C18色谱柱分离，ACQUITY UPLC-TUV超高效液相色谱检测。Bα-La、Bβb-Lg和Bβa-Lg三种乳清蛋白可达基线分离，线性范围为1.000-100.000mg/kg，复相关系数R2≥0.999，方法的检出限为1.000 mg/kg。 关键词：超高效液相色谱 奶粉 牛奶 牛乳清蛋白 Bα-La Bβb-Lg Bβa-Lg 前言 乳清蛋白是牛奶中的主要蛋白质，乳清蛋白主要包括α-牛乳白蛋白(Bα-Lactalbumin，Bα-La)、β-牛乳球蛋白(Bβ-Lactoglbulin，Bβ-Lg)、蛋白酶-胨和牛血清白蛋白等，前两者是乳清蛋白的主要成分，分别占其总量的10-20%和40-50%，β-牛乳球蛋白包括Bβb-Lg和Bβa-Lg两个遗传变异体[1-2]。 乳清蛋白具有营养价值高、易消化吸收、含有多种活性成分等特点，已经被越来越多地应用于食品工业，市场上同时出现了不同种类和品牌的乳清蛋白保健品，如儿童营养蛋白粉、婴儿配方奶粉等[3]。但有报道乳清蛋白又是一种常见的过敏原，β-乳球蛋白是最主要的过敏原，α-乳白蛋白紧随其后[4]。UPLC以其1.7μm超细填料色谱柱和15000psi的超高效液相色谱系统，可以完美实现Bα-La、Bβb-Lg和Bβa-Lg三种乳清蛋白分离；尤其对于Bβb-Lg和Bβa-Lg两个遗传变异体可实现完全分离。以及配备高灵敏度Waters ACQUITY TUV紫外检测器，整个系统检测三种乳清蛋白检出限达到1ppm。该检测方法可应用于牛奶或奶粉中α-牛乳白蛋白和β-牛乳球蛋白的定量检测。 实验方法 材料、试剂和仪器 乙腈为色谱纯，三氟乙酸为优级纯，Triton X-100，氯化钠（优级纯），实验用水为超纯水(18MΩ,TOC 3ppb)，牛乳清蛋白标准品Bα-La、Bβb-Lg和Bβa-Lg；ACQUITY UPLC®超高效液相色谱系统，配Acquity TUV检测器、FILTER MIXER (425μl,P/N 205000403）。 色谱条件 液相系统： Waters ACQUITY UPLC®            配ACQUITY TUV紫外检测器 色谱柱：  ACQUITY UPLC BEH300 C18           2.1mm x 100mm，1.7 μm 柱温：    35˚C 流动相：   A：0.1%TFA乙腈溶液           B：0.2%TFA水溶液;梯度洗脱 检测波长： 280nm 分析时间： 15 min 进样量：  10μl(样品进样2ul) 梯度方法见下表： 时间/(min)     流量/(ml/min)         A%             B%             曲线 0              0.20                  39             61             初始 3              0.20                  41             59                6 4              0.20                  44             56                6 8              0.20                  46             54                6 10             0.20                  70             30                1 15             0.2                   39              61               1 数据处理系统 Empower 2 中文版 前处理方法 称取0.20 g奶粉样品或2ml液态奶样品，添加8mL(对于液态奶添加6ml)0.3M 的氯化钠(含0.2%的Triton X-100)溶液溶解，震荡混匀；然后用0.3%的TFA水溶液调节pH至4.4-4.6之间(以沉淀酪蛋白，其等电点为4.6，需要认真控制pH，因为乳清蛋白的等电点为4.8），定容至10 mL，均质5分钟，室温静置1个小时左后，2500转离心10分钟，取上清液过0.2um滤膜 结果与讨论 标准配制 三种乳清蛋白标准均用超纯水稀释，配制成不同浓度的标样进行检测，可得到较好色谱峰形，并且配制简单。 检测波长的选择 应用Waters PDA检测器扫描得到三种乳清蛋白的紫外吸收光谱图，如图1至3所示。 乳清蛋白在220nm和280nm下都有紫外吸收，本文选择两种波长对三种乳清蛋白(浓度均为5ppm)进行检测，结果发现虽然分析物在220nm下具有最大的紫外吸收，同时在该波长下其也具有较高的基线噪音和干扰，因此本文选择280nm作为检测波长，减少流动相中的基线干扰，如图4所示5ppm的标准色谱图。 流速、流动相优化 如图4三种牛乳清蛋白混合标准的色谱图，按照保留时间依次是Bα-La、Bβb-Lg和Bβa-Lg，对于高分子量的蛋白分析，采用Waters孔径为300À的ACQUITY UPLC BEH300 C18色谱柱进行分离，此外,考虑到大分子蛋白的传质特性，需要使用较小的流速，方能实现较好的分离。本文试验了0.1ml/min、0.2ml/min和0.3ml/min三种流速，0.1ml/min死时间达到2.5min，整体出峰时间较晚，峰宽加大，最终综合峰形、快速和分离度考虑选择0.2ml/min流速，如图4所示。 在当前的分析条件下Bα-La具有较好的保留，然后改变流动相配比，得到标准品的四种配比色谱图(如图5)，由图可以看出，1号色谱峰图中Bβb-Lg和Bβa-Lg两种遗传变异体达到完美的分离(分离度=2.79)；随着梯度的变化，在保持Bα-La保留时间不变的情况下，逐渐加快Bβb-Lg和Bβa-Lg的出峰时间，两种化合物的分离度逐渐变化为1.97(4号色谱图)，灵敏度也稍有增加。但是考虑在分析实际样品时，减少可能存在的杂质对分析物的干扰，本文采用1号色谱图梯度方法进行检测。 实际样品检测发现，样品的Bα-La前面有较多的杂质峰存在，因此为防止实际样品中低保留杂质对Bα-La的干扰，对图5的液相方法Bα-La保留时间进行了调整(如图4所示)，Bβb-Lg和Bβa-Lg仍具有2.22的分离度。 方法的线性相关性及检出限 浓度分别为1.000、5.000、50.000、100.000 mg/L的三种乳清蛋白标准依次进样，进样量均为10μL，外标法定量。以峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标进行线性回归，分别得到Bα-La线性方程A=2.34e3×C-2.36e3，复相关系数R2=0.9997；Bβb-Lg线性方程A=1.32e3×C-1.30e3，复相关系数R2=0.9995；Bβa-Lg线性方程A=1.24e3×C-1.36e3，复相关系数R2=0.9987。三种乳清蛋白在1.000-100.000 mg/L范围有良好的线性关系(如图6-图8所示）。 并且经实验测定，方法检测限为1.000 mg/kg，图9为1.000 mg/L三种乳清蛋白标准色谱图，此浓度下Bα-La、Bβb-Lg、Bβa-Lg信噪比分别达到8、3和3，其中Bα-La可实现定量要求。 前处理方法讨论 前处理中有几个注意点，首先就是使用含0.2% Triton X-100的0.3M NaCl提取液，尽量不要超过3天，因为实验发现3天以后该溶液对乳清蛋白的提取和稳定效果会下降。其次样品加入提取液,调整pH后需要放置50分钟以上，因为发现放置和未经放置的样品，在离心后过滤膜时过滤的难易程度有较大差别，未经放置的虽较易过滤膜，但乳清蛋白提取率较低。 其关键点还在于提取液pH值的掌握，本文对同一奶粉产品在不同pH下的提取情况进行了比较，如下图所示，pH在4.4-4.6之间没有太大差别，但是pH达到4.8和5.0时，Bβb-Lg和Bβa-Lg的峰形变差，尤其是Bα-La的的出峰位置完全被杂质所淹没，因此实验中需要控制pH值不要超过4.6。 实际样品检测结果 图11-13分别为两种奶粉和一种液态奶实际样品分析色谱图及结果。 由图14，三种乳清蛋白的标准品、实际样品和样品提取液的空白溶液的重叠色谱图，可以看到，在奶粉和牛奶的提取溶剂中，不存在对样品中乳清蛋白分析物的干扰。另外参见下图15，是牛奶样品和牛奶样品最后添加标准品的色谱图，可以进一步定性牛奶提取样品中三种乳清蛋白的存在。 同时发现，乳清蛋白标准品用水或样品提取液(含Triton X-100的NaCl溶液)定容，进样检测对三种乳清蛋白的峰面积基本没有影响，图16是两种定溶液标准品的重叠色谱图。   重现性 5ppm标准品八次进样的重叠色谱图及重现性结果如下: 结论 本文建立了用Waters UPLC-TUV系统检测奶粉和牛奶实际样品中Bα-La、Bβb-Lg和Bβa-Lg三种牛乳清蛋白的定量分析方法。方法的检出限为1μg/g。使用Waters ACQUITY UPLC BEH300 C18色谱柱和三氟乙酸添加剂流动相，使Bβb-Lg和Bβa-Lg两种遗传变异体可达到基线分离；采用280nm检测波长，有效降低了低波长检测下的流动相干扰，可以用于奶粉和牛奶中三种牛乳清蛋白的含量测定。 参考文献： [1] Kinghorn N M, Norris C S, Paterson G R. Chromatogr A, 1995，700:111 [2] 蔡增轩,储小军等. 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集,KB02:23-24 [3] 李慧,陈敏等.色谱.2007.1,25:116-117 [4] Ena J M, van Beresteijn E C H, Robben A J P M, Schmidt D G. J Food Sci, 1995，60(1):104

ACQUIT Y UPLC-ELSD测定奶粉和牛奶中八种糖的含量 赵淑军 沃特世公司，上海，中国 关键词： 超高效液相色谱 奶粉 牛奶 Fructose(果糖)Sorbose（山梨糖) Glucose(葡萄糖)Sucrose(蔗糖)Maltose(麦芽糖)Lactose(乳糖) Maltotriose(麦芽三糖) Maltotetraose(麦芽四糖)   实验方法 材料、试剂和仪器 乙腈为色谱纯，三乙胺为优级纯，实验用水为超纯水 (18MΩ,TOC3ppb)，ACQUITY UPLC®超高效液相色谱系统，Acquity ELSD检测器,(FILTER MIXER (425μl,P/N 205000403),可不用)。 色谱条件 液相系统： Waters ACQUITY UPLC® 配ACQUITY ELSD 蒸发光散射检测器 色谱柱： AACQUITY UPLC BEH Amide 2.1mm x 100mm， 1.7 μm, P/N:186004801 柱温： 35˚C 分析时间 ： 18 min 进样量： 5ul(样品进样2ul) 流动相： A:水 B:0.2%TEA乙腈溶液;梯度洗脱 弱洗溶剂： 乙腈/水=90/10，800μl 强洗溶剂： 乙腈/水=10/90，500μl 进样方式： 不充满定量环（使用针溢出） ELSD条件： 增益： 500 数据率： 10pps 喷雾器模式： 冷却 漂移管温度： 55˚C 气体压力： 30psi 实验室试验温度： 20˚C 实验室试验湿度： 45% 工作电源： 220V稳定电源 梯度方法见下表： 时间/(min) 流量/(ml/min) A% B% 曲线 0 0.15 15 85 初始 2 0.15 22 78 6 11 0.15 50 50 4 18 0.15 15 85 1 数据处理系统 Empower 2 前处理方法 称取2.0 g奶粉样品或5ml液态奶样品，加入20mL(对于液态奶添加15ml)1/1的乙腈水溶液溶解，手摇震荡混匀，然后涡旋混匀2分钟，室温下8000r/min离心15分钟，取上清液过0.2μm滤膜；对于某些样品由于糖含量很高，所以过滤后的样品可能需要用乙腈/水=70/30的溶液稀释一定倍数后，进样检测。 结果与讨论 标准配制 八种糖标准分别称取10mg，用1/1的乙腈水定容至1ml，然后用乙腈/水=70/30的溶液稀释配制各个浓度的标准品，进行实验。 八种糖UPLC分离检测色谱图及数据   图 1. 八种糖UPLC分离检测色谱图 图1是八种糖50ppm混合标准品用UPLC(ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱)分离，ELSD检测的色谱图，按照保留时间顺序分别是：Fructose(果糖)、Sorbose(山梨糖)、Glucose(葡萄糖)、Sucrose(蔗糖)、Maltose(麦芽糖)、Lactose(乳糖)、Maltotriose(麦芽三糖)、Maltotetraose(麦芽四糖)；包括5种单糖和3种多糖。有关数据见下表。 其中较难分离的Fructose(果糖)和Sorbose(山梨糖)、Maltose(麦芽糖)和Lactose(乳糖)均分别达到1.6、1.5的分离度。 方法的检出限 如图2所示，为5ppm的混标色谱图，此浓度下按保留时间顺序八种糖的信噪比分别达到3、5、5、24、6、12、5和3，(进样量10ul）： 可见，八种糖中Fructose(果糖)、Sorbose(山梨糖)、Glucose(葡萄糖)、Maltose(麦芽糖)、Maltotriose(麦芽三糖)和Maltotetraose(麦芽四糖)的检测限为5ppm；此浓度下Lactose(乳糖)可达到定量限，而Sucrose(蔗糖)的定量限可以到达2ppm。 方法的线性相关性 浓度分别为5.000、10.000、20.000、50.000、100.000、150.000mg/L的八种糖标准品依次进样，进样量均为5μL，外标法定量。以峰面积A的lg值为纵坐标，浓度C的lg值为横坐标进行线性回归，得到8种糖的线性方程、复相关系数和线性曲线图如图3-图10所示，在5.000-150.000 mg/L范围8种糖均具有良好的lg-lg线性关系。 实际样品检测结果 从市场取某一奶粉样品，进行实际提取实验，进样检测，色谱图及结果数据见图11所示，可以看出此样品中含有蔗糖、乳糖、麦芽三糖和麦芽四糖四种糖成分，同时发现蔗糖和乳糖的含量相当高，已经超出检测器的响应范围；因此将此样品稀释100倍后再次进样检测，结果数据见图12。 由图11和12的数据可以知道此奶粉中含有蔗糖16.8mg/g、乳糖140.1 mg/g、麦芽三糖和麦芽四糖的含量分别只有1.9 mg/g、1.3mg/g。某液态奶提取后，稀释100倍检测结果见图13。 重现性 首先用50ppm混合标准6次连续重复进样，考察标准品在本方法下的稳定性，见图14所示重叠色谱图，重复数据见表3、表4。 提取奶粉实际样品，由于乳糖含量较高，将其稀释了100倍，然后在不同天次连续3天进样检测，考察本方法对于实际样品日间的重现性情况，如图15所示是该实际样品3天内3次进样的重叠色谱图，由图可见该方法对实际样品在日间具有较好的重现性。 结论 本方法建立了用Waters UPLC-ELSD系统检测奶粉和牛奶实际样品中Fructose(果糖)、Sorbose(山梨糖)、Glucose(葡萄糖)、Sucrose(蔗糖)、Maltose(麦芽糖)、Lactose(乳糖)、Maltotriose(麦芽三糖)、Maltotetraose(麦芽四糖)8种常见糖的的定量分析方法。方法的检出限:有6种糖达到5μg/g，另外两种糖Sucrose和Lactose在5μg/g下的信噪比可达到24和12。使用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱和三乙胺流动相体系，8种糖均实现基线分离，可以用于奶粉和牛奶中常见这8种糖的含量测定。 参考文献： Waters ACQUITY UPLC BEH Amide Columns Care & Use，P/N:715001371

- 广州市进一步强化亚运期间水质保障工作   中国, 广州 - 2010年10月13日   2010年广州亚运会暨第16届亚运会将于2010年11月12日至27日在中国广州举行，这是亚运会历史上比赛项目最多的一届。广州还将在亚运会后举办第十届残疾人亚运会。 为了保障城市供水安全、从容应对水质突发事件，喜迎亚运会的到来。近日，广州地区的水质监测技术人员与Waters®公司合作，运用代表着当代世界先进分析水平的超高效液相色谱/质谱联用技术，开发、验证出一些分析更为快捷、数据更为精确的水中有机污染物分析方法，一些项目的监测水平达到国际最高水准。 关于沃特世公司（www.waters.com） 50年来，沃特世公司（NYSE:WAT）通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2008年的总收入达15.8亿美元，员工人数达5000人；公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。

Vera B. Ivleva、Ying Qing Yu和Martin Gilar 美国马萨诸塞州米尔福德沃特世公司   简介 RNA干涉（RNAi）机制在转录后基因沉默中有根本性的作用，在已知序列的情况下，基因沉默常规实验可通过使用~21个核苷酸（nt）长度的合成RNAi探针进行，此法也用于研发药物。 合成RNAi寡核苷酸须纯化以防靶点外的基因沉默。RNAi药物需要良好的实验描述，以达到法规要求，将可能的安全有效性的不良作用降低到最小。 沃特世超高效液相色谱（UPLC®）技术的高分离度色谱能力与质谱联用分析是分析siRNA寡核苷酸等生物药物的有力手段。作为寡核苷酸确证的一部分，可通过选择性酶或化学物进行测序。二级质谱碎片分析方法为快速通用方法，可用于修饰后的寡核苷酸（通常对酶切有抵抗力）。为获得完整的21核苷酸RNAi的结构信息，二级质谱分析中其分子须有效离子化并产生与序列相关的离子，质量精确性与分离度也需适当。 本应用手册提供了精确UPLC/MS/MS分析方法用于21核苷酸RNA结构确证的流程。该法对确认siRNA碱基药物的序列是非常有用的。   实验条件 样品制备 21核苷酸长度的互补RNA链（上游序列5' -UCG UCA AGC GAU UAC AAG GTT -3'，下游序列5' -CCU UGU AAU CGC UUG ACG ATT -3'）在0.1 M乙酸三乙胺（TEAA）中分别重组。 合成副产物的分布与上下游序列一并通过UPLC/MS检测。用于UPLC/MS分析的样品浓度为30 pmol/μL。 方法 UPLC/MS分析与前述一致。1沃特世 ACQUITY UPLC®系统适配了ACQUITY UPLC寡核苷酸分离技术（OST）C18柱（1.7 μm，2.1 x 50 mm ；PN 186003949），质谱参数的选择旨在达到最佳TEA加合物的去聚集效果，而不影响先导离子强度。沃特世SYNAPT™ HDMS™质谱在飞行时间TOF）模式下操作。 选择离子的诱导解离碰撞能量梯度为25 -55 V。MS/MS碎片程度通过选择合适的电荷状态（-3到-6）与不同的碰撞能梯度进行调整。产物离子谱在500 -7000 m/z范围内进行采集，采集率为1次扫描/秒。负离子模式的外部校正使用了碘化铯。使用了MaxEnt™3软件进行了数据分析前的图谱去卷积。 LC条件 LC 体系：     沃特世ACQUITY UPLC 系统 色谱柱：       ACQUITY UPLC OST C18 1.7 μm，2.1 x 50 mm 柱温：           60 °C 进样量：       5 μL 流速：           0.2 mL/min 流动相A：    15 mM TEA，400 mM HFIP 流动相B：    50% A，50% 甲醇 梯度：           10分钟内B液含量从20-40%   MS条件 MS系统：            沃特世SYNAPT HDMS 系统 毛细管电压：       2.7 V 样品锥孔电压：    31 V 提取锥孔电压：    3 V 源温度：              120 °C 脱溶剂气温度：    300 °C 脱溶剂气流流速：500 L/h 碰撞阱能量：       6 V 传输碰撞能量：    4 V 质量分辨率：       V 模式下~ 9000（FWHH） LockMass：         CsI 10 mg/mL（水-异丙醇，1：1），流速为5 μL/分钟，扫描时间1秒，频率30 秒，设定质量1685.765 m/z（Cs6I7-） 结果与讨论 互补RNA21核苷酸链分别进样至UPLC/MS/MS系统，色谱显示了较短的寡核苷酸峰（5'水解产物），它们可以根据原目标21核苷酸得到很好的解析（图1）。成分峰的归属是根据其精确质量测量进行的，可确证部分序列。   为鉴定全核苷酸结构，21核苷酸下游链的先导离子[M-4H]4-进行了分离与碎裂（图2）。主要的特征碎片是互补的c与y离子和低强度[a-B]以及w离子（命名见图3）。上述5'-P-O断裂序列的离子是RNA寡核苷酸MS/MS分析的主要碎片，与DNA产生的产物（主要是3'-C-O断裂的[a-B]与w离子）不同。这是因为DNA分子缺乏2'-羟基。2 双链骨架断裂产生的内部碎片与c离子的胞嘧啶中性缺失（表1）显著较少，且对结构鉴定有意义的峰归属没有贡献。上游21核苷酸RNA的MS/MS分析，碰撞能梯度（30-50 V）产生的结果近似（图2）。   MS/MS的[M-4H]4-图谱中所有的碎片离子中，21个核苷酸的RNA通过几种电荷状态表示（表1）。MS/MS图谱的多电荷离子去卷积通过MaxEnt 3软件进行，显著降低了图谱复杂性，简化了MS/MS数据解读。 去卷积图谱已足够用于解读整个siRNA序列（图2），还检测到了几个代表了21核苷酸分子离子的A，G与C气相核碱基损失的峰。LockMass校正后质量精确度达到了10 ppm以下，对手工数据解析是很有用的（表1）。三重四级杆质谱的质量分辨率与离子阱仪器可能不能足以进行特征碎片归属以区别多电荷峰与其他寡核苷酸复杂碎片产物。   结论 开发了通过精确质量UPLC/MS/MS进行可靠的测序，以用于siRNA寡核苷酸结构确证的方法。 ■    SYNAPT HDMS系统的高质量精确性与分辨率可达到清晰碎片离子归属要求。 ■    可靠的MS/MS方法可产生特征离子碎片，覆盖了较广的质量范围，足以用于21个核苷酸的siRNA 序列的解析。 ■    MaxEnt 3去卷积软件极大地降低了MS/MS图谱的复杂性，简化了序列解析过程。 本高效确证性测序法对依照美国FDA生物药物化合物规定测定药用寡核苷酸序列十分有用。本法还可能用于计算机测定未知杂质序列。可预计，本MS/MS方法可用于外切酶难以切断的化学修饰寡核苷酸（阶梯测序）。 自动化的MS/MS可减少数小时乃至几天的分析时间，降低样品分析成本。另外，UPLC还可快速分离目标RNA类群，多种寡核苷酸链可同时进行MS与MS/MS分析。UPLC分离目标寡核苷酸与其被剪切产物的能力对于siRNA代谢研究是十分有利的。 参考文献 1. UPLC/MS Analysts of Interfering RNA Oligonucleotides. Waterrs Application Note.2008：720002412en. 2. Kirperkar F，Krogh TN. Rapid Commun。Mass Spectrom。2001；15（1）：8-14. 3. Adopted from McLuckey SA, et al. J. Am. Soc. Mass Spectrom。1992；3（1）60-70. 碰撞能量模式影响了MS/MS碎片产生的程度，能量值须根据对应分析物进行调整。一般来说，用于21核苷酸长度分析物MS/MS碎片化最广的带电状态是-5与-3（1500 -2000 m/z范围内）。25-45 V的碰撞能梯度对21核苷酸RNA产生结构可用的碎片是合适的。 总体上，为获得MS/MS碎片的合理的信噪比（S/N），总离子色谱图（TIC）中主成分或污染物须具有最低500离子数的信号。

帮助拓宽理解重要色谱技术实际应用的最新系列指南 　　马萨诸塞州米尔福德——2010年9月13日——沃特世公司(WAT:NYSE)今天发布了专为有经验的色谱分离科研人员编写的最新亲水作用色谱技术综合指南，共有72页，旨在帮助他们拓宽对这一重要色谱技术的了解。这一带有图例的实用指南有助于他们了解HILIC如何工作，提高其在分离和量化各种不同样品基质中的极性化合物时的成功率。每份入门读本(编号715002531)价格为23.50美元，可在沃特世网站在线订购：www.waters.com/primers 　　这一最新入门读本是由沃特世科学专家授权编写的“入门指导”系列的第四本，是对高效液相色谱法(2007年发布)、质谱和UltraPerformance LC®(UPLC)均于2009年发布)等入门读本 的补充。 　　沃特世系列的亲水作用色谱—— ACQUITY UPLC® BEH、XBridge™和Atlantis® HILIC柱——不仅提高了极性化合物的保留，还增强了质谱信号响应，与样品制备洗脱液[PPT蛋白沉淀法、LLE液液萃取法和SPE固相萃取法]兼容，并提供了相对于反相分离机制的正交选择性，使HILIC成为一种极具吸引力的选择分离技术。 　　关于沃特世公司(www.waters.com ) 　　50年来，沃特世(NYSE:WAT)公司通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 　　沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了持久成功的平台。 　　沃特世公司2009年的收入达15亿美元，员工人数达5,200人，公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。

　　快速去除磷脂为科学家们提供新工具以推动药物研发工作 　　马萨诸塞州米尔福德——2010年9月14日——沃特世公司(WAT:NYSE)今天推出了新的Ostro™样品制备板，为去除生物样品中的磷脂提供了创新的方法。与其它磷脂去除设备和传统的液液萃取(LLE)方法相比，Ostro能够去除高达30倍的磷脂。 　　磷脂已成为导致LC/MS生物样品分析中基质效应的一个主要因素。Ostro及其正在申请专利的独有设计专为解决这一障碍而制造，能够提供“同类最佳”解决方案，去除多种磷脂。 　　Ostro™的96孔板采用简单、快速、流过式的方式方法在96孔板内进行蛋白质沉淀，从而提供快速、可靠、可重现的解决方案。 　　“我们非常高兴和自豪地推出Ostro产品，进一步扩展我们全面的96孔样品制备板产品系列”，沃特世公司样品制备主管DianeDiehl博士评价说。“对于要努力解决磷脂干扰的研究人员而言，Ostro将是一个非常宝贵的工具，并为沃特世一流的固相萃取方案Oasis®SPE产品提供一个补充的解决方案。” 如需了解沃特世Ostro样品制备产品的更多信息，请参见： ·  手册 ·  产品信息  关于沃特世化学产品 沃特世提供了业界最广泛、最深入的产品，以技术熟练、训练有素的支持团队为后盾，满足世界一流生产厂商最高行业质量标准的要求。沃特世拥有全世界最大的同类应用数据库之一，囊括超过6万份引文、摘要、应用实例和科学文献。  关于沃特世公司（www.waters.com ） 50年来，沃特世（NYSE:WAT）公司通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了持久成功的平台。 沃特世公司2009年的收入达15亿美元，员工人数达5,200人，公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。 媒体联系： Eva Lee 沃特世公司市场部 Eva.lee@waters.com 周瑞琳（Grace Chow） PMC Communications 020-83569288 13602845427 grace.chow@pmc.com.cn

Ying Qing Yu与Martin Gilar 美国马萨诸塞州米尔福德沃特世公司 简介 本应用纪要中，我们介绍了沃特世专利RapiGest™ SF试剂的物理化学性质及其应用领域。2002年，我们首次推出RapiGest SF，这一创新产品是帮助酶消解的有利工具，可促进溶液中蛋白的消解，它能够改善样品制备过程中蛋白的溶解度。 RapiGest SF提高酶解速率与完全程度的机理详见图1。温和的蛋白变性可打开蛋白结构并暴露酶切位点，以供酶切。在RapiGest SF溶液中，酶对变性的耐受性优于普通蛋白，并能保持活性。在加入酶之前高温加热RapiGest SF溶液可使球蛋白更为完全变性，之后需将酶与样品一起进行37 °C的孵育。 图1 蛋白底物在RapiGest SF溶液中变性􀉼之后对蛋白酶切更为敏感 超过200多家行业内杂志引用了使用RapiGest SF进行样品溶解的案例，大部分为蛋白组学的应用。最近，许多制药实验室使用RapiGest SF用于蛋白药物的确证。因为酶消化的速度的提高并在LC、MS分析前极易清除，RapiGest SF已被多个应用领域广泛接受，其中包括高级序列研究的LC/UV/MS蛋白药物的肽图分析。 讨论 什么是RapiGest SF? RapiGest SF是酸性不稳定表面活性剂，在酸性条件下极易水解。1这种独特的性质，在需要的时候，可用于从溶液中清除表面活性剂。RapiGest SF的结构及其水解副产物见图2。酸性不稳定的性质可在pH2条件下，45分钟内达到完全降解。   该表面活性剂可降解为两个产物：dodeca-2-one和3-（2,3-二羟基丙基）丙磺酸钠。前者与水不能互溶，可通过离心清除。后者在水溶液中溶解度很高，而在反相LC模式下不保留。酶消解后的水溶液可直接进行HPLC、LC/MS或MALDI-TOF MS进行分析。 消解后的清除 样品分析前无需额外去清除表面活性剂（如透析）。在分析前，酶消解后通常经过酸（如甲酸、三氟乙酸（TFA）或盐酸（HCl））的酸化，降解RapiGest SF。建议降解条件pH ≤ 2。 胰蛋白酶消解的兼容性 胰蛋白酶是最常见的蛋白水解酶，可用于肽图分析和蛋白组学的应用。我们研究了在添加RapiGest SF的情况下胰蛋白酶的活性作用，并与文献中最常见的变性剂的作用做了对比。本检测基于胰蛋白酶诱导N-α-苯甲酰-L-精氨酸乙基乙酯（BAEE）在50 mM重碳酸胺（pH 7.9）中的室温水解。胰蛋白酶活性的变化通过UV 253 nm下测量BAEE水解率进行计算。在选择的变性溶液中，胰蛋白酶活性与对照样品进行对比（非变性剂）。结果见于表1。   表1中的数据说明低浓度下（0.1%） RapiGest SF不抑制胰蛋白酶的活性。这与结构上类似的表面活性剂SDS不同，SDS是很强的变性剂，可会使胰蛋白酶失活。尿素、乙腈或盐酸胍也是胰蛋白酶消化的变性剂。但是乙腈是强洗脱剂会干扰消解样品进行反相LC分析。正如我们所知，尿素可使蛋白共价修饰，盐酸胍也和SDS一样可以使酶失活。 本实验说明蛋白酶的活性受到蛋白溶液中所用变性剂的影响。RapiGest SF在从低到高的浓度下均不改变酶活性，因此，最佳的蛋白消解条件是无需过量酶即可达到酶解的结果。 快速蛋白消解 对蛋白酶解存在抗性的蛋白使用RapiGest SF试剂，可在数分钟内消解完全。完全消解球蛋白、马肌红蛋白只需要5分钟内即可完成。该试剂辅助的消解结果与对照见图3。由于肌红蛋白是球蛋白，众所周知，若没有表面活性剂将难以消解。在对照反应中，与胰蛋白酶孵育9小时后只有少量的蛋白可以消化。使用了RapiGest SF试剂，总体的消解的效率显著提升。 在蛋白药物肽图中的序列覆盖范围更大 RapiGest SF在蛋白组学的样品前处理中广泛使用，是有效的蛋白溶解变性剂。最近越来越多的生物制药实验室在肽图分析中采用了RapiGest SF。一些发表的论文记录了使用RapiGest SF进行蛋白药物消解的优势。4,5经报导的RapiGest SF浓度范围为0.05 -1%，取决于蛋白疏水性与浓度。 我们发现浓度范围为0.05 -1%的RapiGest SF足以使各种大小的蛋白变性，高浓度RapiGest SF适合全细胞蛋白提取的实验。 单抗（mAbs）肽图分析一直以来都因为难以消解这些大疏水蛋白而难以实现。肽图分析的目的是确认蛋白序列并发现所有存在后翻译修饰（PTMs）的蛋白。图4举例说明了RapiGest SF辅助的人单抗消解的实例。样品制备与分析的参数以UPLC®和四级杆Tof质谱分析的参数已列表作为指导。 图4显示实验中总序列覆盖率为98%。数据分析通过BiopharmaLynx™ v.1.2软件得到。高序列覆盖率（98%）说明单抗完全消解。LC/MS分析中没有发现错误酶切的多肽或完整未被酶切的蛋白。剩下的2%未确认的序列为少数二个氨基酸的肽或单个氨基酸（R或K），而无法在反相柱上保留。 样品制备 人单抗样品（10 μL, 21 mg/mL）在含有0.1% （w/v） RapiGest SF 的50 μL 50 mM重碳酸铵中溶解。将2 μL 0.1 M的二流苏糖醇（DTT）加入样品，样品在50 °C加热30分钟，加入4 μL 0.1 M的碘代乙酰胺，在样品冷却至室温后样品在黑暗中静至40分钟。    样品中加入8 μg胰蛋白酶（胰蛋白酶浓度= 1 μg/μL），样品在37 °C孵育过夜。消解样品与1%甲酸与10%乙腈混合（1：1，v：v）。用Milli-Q水（Millipore）稀释至5 pmol/μL后进行LC/MS分析。 LC 条件       LC 系统 沃特世 ACQUITY UPLC®系统 色谱柱 ACQUITY UPLC BEH 300 C18 肽分离专用柱, 2.1 x 100mm （P/N = 186003686） 柱温 40 °C 样品进样 2 μL （10 pmol） 溶液A 0.1% 甲酸水溶液 溶液B 0.1% 甲酸乙腈溶液 流速 200 μL/min 梯度 0-2分钟:2%B   2 – 92分钟：2 -35% B   92 -102分钟：35 - 50% B   102.1 -105 分钟：90% B   105.1-110分钟：2% B                       MS条件 MS系统 沃特世SYNAPT™ MS （V型） 毛细管电压 3.2 kV 源温度 120 °C 去溶剂温度 350 °C 去溶剂气 700 L/hr MS 扫描速率 1 秒/次 锁定质量通道 100 fmol/μL Glu-Fib多肽（m/z 785.8426, z = 2），流速20 μL/min             与其他的蛋白酶合用 我们测试了RapiGest SF与多种蛋白酶的适配性，如Asp-N, Lys-C与Glu-C。在酶解前使用RapiGest SF变性蛋白获得了有效的消解结果。  蛋白去糖基化的用途 RapiGest SF也用于测试其它酶，如PNGase F，该酶用于酶切糖蛋白N-连接的糖基。2图6说明了去糖基化鸡蛋卵清蛋白。在RapiGest SF介质中PNGase F消解2小时后观察到了完全的去糖基化反应。  结论  RapiGest SF促进了蛋白酶解的速度与完全程度，能够得到蛋白药物序列覆盖率很高的肽图分析。  RapiGest SF是适用于蛋白组学、糖蛋白与生物制药应用的领域  几乎无需消解后样品处理，简单样品酸化，足以从溶液中去除RapiGest SF。多种情况下LC/MS分析前只需简单稀释。  RapiGest SF简化了样品制备方法，可提高分析通量；使用该方法提高实验室工作效率并提高数据质量。 参考文献 1. Yu YQ, Gilar M, Lee PJ, Bouvier ES, Gebler JC. Enzyme-friendly, mass spectrom- etry-compatible surfactant for in-solution enzymatic digestion of proteins. Anal. Chem. 2003; 75: 6023-6028. 2. Yu YQ, Gilar M, Lee PJ, Bouvier ES, Gebler JC, A complete peptide mapping of membrane proteins: a novel surfactant aiding the enzymatic digestion of bacteriorhodopsin. Rapid Commun.Mass Spectrom. 2004; 18: 711-715. 3. Yu YQ, Gilar M, Kaska J, Gebler JC. A rapid sample preparation method for mass spectrometry characterization of N-linked glycans. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2005; 19: 2331-2336. 4. Bailey MJ, Hooker AD, Adams CS, Zhang S, James DC. A platform for high- throughtput molecular characterization of recombinant monoclonal antibodies, J. Chrom. B. 2005; 826: 177-187. 5. Huang HZ, Nichols A, Liu DJ. Direct identification and quantification of aspartyl succinimide in an IgG2 mAb by RapiGest SF assisted digestion. Anal. Chem. 2009; 81 (4): 1686-1692.

简介 沃特世近期推出的AccQ•Tag™ Ultra氨基酸专用分析方案有更高的分离度和灵敏度，确保用户得到精确可靠的氨基酸定性和定量分析结果。这个方案来源于已经被广泛使用和认可的AccQ•Tag柱前衍生方法，得到的衍生物用沃特世ACQUITY UPLC®（超高效液相色谱）系统进行分离，可达到最佳分离度和更高的灵敏度，分析时间更短。系统控制，数据采集、处理和报告由Empower™软件进行。这是一个整体解决方案，针对不同应用的仪器方法和数据处理方法都已经在应用光盘内预先设定好，直接调用即可获得进行分析。 UPLC氨基酸分析应用方案 设计重点与成功分析的关键 • 所有氨基酸都达到基线分离 • 对每个峰进行准确定性 • 衍生反应副产物同氨基酸衍生物可以完全分离 • 3个数量级的动态线性范围，保证对不同浓度水平的氨基酸准确定量 • 足够的电喷雾离子化灵敏度与稳定性 衍生反应过程示意图 使用AccQ•Tag Ultra衍生试剂（6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯）对氨基酸进行衍生，伯氨基酸和仲氨基酸均可快速、定量完成衍生反应，操作简便，衍生反应还可以自动化进行（batch wise）。 • 衍生反应在大量水溶液存在的条件下进行，对不同缓冲液体系和不同组成的样品均可得到可靠的结果 • 样品无需进行特殊处理，也不需要真空干燥或提取 • 样品经衍生后的产物可稳定保存几天 • 过量的衍生试剂可在一分钟内水解为不干扰测定的AMQ，因此不需要去除过量衍生试剂的操作 • 衍生反应副产物同氨基酸衍生物可以通过色谱达到完全分离 图2A 氨基酸标样的色谱图（柱上浓度10 pmol），包括稳定硫化氨基酸的一般产物，图中显示了氧化与烷基化的结果。 为监测细胞培养过程中发酵液的成分，或者对发酵用培养基进行质量控制，需要分离其它种类的氨基酸。与标准分析方法相比，分析细胞培养液中的氨基酸在分析方法的参数设置上有些不同：AccQ•Tag Ultra洗脱剂A（浓缩液）的稀释倍数不同，还需要较高的柱温。其它参数相同。 图2B 细胞培养液中氨基酸标准品的色谱图（柱上浓度10 pmol） 蛋白结构鉴定 氨基酸组成分析 本方法可用于在蛋白质结构分析中确定蛋白质的氨基酸组成，直接使用标准方法即可得到分析结果。 图3A 促卵泡刺激素（hFSH）水解产物分析 图3B经还原和烷基化处理后的促卵泡刺激素（hFSH）水解产物分析 图3C 经过氧甲酸氧化处理后的促卵泡刺激素（hFSH）分析 蛋白浓度检测 最终的分析结果可以任何常见单位表示，包括每种氨基酸的重量，每次进样的氨基酸总重量和所进样的蛋白质重量是相等的，通过已知的稀释比例即可计算出水解反应的蛋白质质量和样品中蛋白质的浓度。 细胞培养过程监控 AccQ●Tag Ultra氨基酸分析方案可用于检测细胞培养过程中氨基酸的浓度变化，这对于优化细胞生长条件至关重要。仅仅需要很少的细胞培养液，且不需要任何样品制备过程即可进行分析。   图4A &B 在第1天、第3天和第6天的细胞培养液中氨基酸分析图谱。上图为色谱图全貌，下图为部分放大图谱 对于基质复杂的样品，如细胞培养液中的氨基酸分析，通常需要经过样品前处理后才可进行分析。沃特世AccQ●Tag Ultra方法可以直接对细胞培养液或培养基进行分析，且灵敏度很高。小量样品即可得到分析结果，图中每个色谱图代表了25 nL培养液的分析结果，细胞培养液中的其它组分对氨基酸分析没有任何影响。 对氨基酸盐生物进行准确的定量分析有助于监测生物药物生产过程中的细胞代谢情况。表1显示了随着时间推移不同氨基酸在细胞培养过程中的浓度变化情况，可以看出有的氨基酸浓度增加，有的减少，有的维持不变，在第7天补加了Gln（谷氨酰胺），可以非常清楚地看出氨基酸组成变化的情况。   图表1细胞培养过程中不同氨基酸浓度随时间的变化图标   图5氨基酸衍生物分析的MS TIC谱图 UPLC®氨基酸分析方案可以与不同的检测器匹配，包括紫外、二极管阵列和荧光检测，同时，此方法使用的流动相与ESI MS检测完全兼容。如果您需要在常规分析中进行氨基酸峰的确证或者分析pmol以下浓度水平的氨基酸检测，光学检测器可以完全达到要求。但在以下应用中ESI MS检测是十分有用的： • 通过分子量对氨基酸进行确证 • 分析方法的确证 • 用于检测样品中未知或未预料到的色谱峰 结论 • UPLC氨基酸分析方案是一套可靠的交钥匙方案， 可用于蛋白质水解产物分析与细胞培养液监控，且都有预先设好的标准方法； • 可在很短时间内得出精确的分析结果，用于蛋白质结构分析，包括对含硫氨基酸的分析；同时分析结果还可用于确定蛋白质浓度； • 可监测在生物药物生产过程中，细胞培养液中氨基酸浓度随细胞生长时间的变化； • 此方案与ESI MS完全兼容。

ASAP可在短短3分钟内对各种酒水与食品的香料化学成分进行指纹分析 目的 通过简捷的技术，无需样品提取、过滤、稀释与色谱分离，即可成功分析食品香料成分 背景 香料可吸引多种感官：嗅觉、味觉与触觉，都是食品取得成功的重要因素。每个食品制造商都会创造和保留自己的香料配方，以此区别于竞争对手。不同食品的香料成分也各不相同，为保证产品质量以及标签信息的准确性，香料成分与最终产品需经过化学分析进行鉴定。但大多数化学成分分析方法需要耗时耗力的样品制备步骤，包括提取、过滤、稀释与色谱分离。因此我们迫切需要一种可以快速检测香料成分并鉴定产品质量的筛查工具。 方法 Waters®大气压固体分析探头（ASAP）联用四极质谱可达到此要求，无需样品提取、稀释与色谱分离，ASAP可快速对各种酒水与食品的香料化学成分进行指纹分析，如香草提取物、咖啡，冰激凌与曲奇。 大气压固体分析探头（ASAP） 将ASAP探头上的玻璃棒直接触及样品（冰激凌与曲奇）表面，即可完成上样。香草提取物和咖啡样品使用玻璃棒直接沾取即可完成上样。ASAP探头插入密封离子源中，去溶剂气温度快速加热到200 °C。 图1-4的数据通过ESCi正扫描模式在15V锥孔电压下采集，运行时间为3分钟。通过当前样品的总离子流图中扣除基线空白后得到质谱图。 图1-4为合成香草与纯香草提取物；法国香草风味咖啡与爱尔兰风味咖啡；两个曲奇样品（A 和B）以及两个冰激凌样品（A 和B）之间的质谱对照图。数据显示了这些食品之间的香料组成差异。  总结 在无样品提取、稀释与色谱分离的情况下，ASAP可快速对各种食品的香料成分进行指纹分析，鉴定食品质量。在没有样品制备、溶剂使用的情况下，3分钟的筛查法极大地增强了实验室产能，节约了分析时间，降低了环境污染，这也恰恰符合绿色化学的原则。结论是ASAP极大程度地降低了实验室的日常运营成本。

Claude R Mallet, Waters Corporation, Milford, MA, USA 简介 本技术说明介绍了将采用在线 SPE MS/MS 技术的 Waters® UPLC® 用于水样分析的方法。 该平台具有诸多优点：  1   简化了实验室工作流程  2   减少了手工操作，提高了工作效率  3   最大限度地减少了操作人员误差，提高了结果的置信度  4   加快了样品的周转，提高了实验室效能 本系统既可用作完整的 UPLC 在线 SPE 系统，也可用作日常的LC-MS 系统，从而加快周转速度。 传统分析方法 采用现有的 LC/MS/MS 或 GC/MS/MS 系统，必须将样品从原始形式转化为方便进样分析的适当形式。样品的制备通过各种手动萃取方法进行，实现富集或净化目的。这些萃取方法相当费时费力。萃取步骤的重复次数在很大程度上取决于样品的复杂程度和目标检测限 (LOD)。 对于痕量水平的应用，通常做法是将 1 升样品萃取为 500 微升的最终体积。 在线 SPE 方法 在在线 SPE 方法中，感兴趣的分析物首先被吸附在萃取柱上，经过清洗，然后直接洗脱到 LC/MS/MS 系统上。省略了萃取方法中的蒸发和重构步骤。该方法的样品利用率更高，因而所需的样品体积更小。 只要 20 毫升样品就可实现离线方法用 1 升样品才能实现的结果。通过耦合两根萃取柱，采用在线 SPE 技术的 Waters UPLC 还可以产生并行事件。采用这种双柱配置，可以在第一根萃取柱上完成平衡步骤的同时，在第二根萃取柱上完成加载、清洗和洗脱步骤。从而缩短总的运行时间和提高工作效率。每次进样后都会清洗 SPE 阀芯，因此可以重复使用而不会降低效率。   图 1. 采用在线 SPE 技术的 UPLC。 从有关使用离线 SPE 分析水中有机污染物的个人交流中，我们了解到，一名化学家在一个八小时的轮班中可以准备 24 个LC/MS/MS 样品。这样算来，一周就是 120 个样品。相比之下，我们的实验室中使用了采用在线 SPE 技术的 Waters UPLC，而在一周内处理的水样超过了 500 个，并且用户的干预非常少。   图 2. 采用在线 SPE 技术的 UPLC示意图。 系统说明 图 1 中所示的是采用在线 SPE 技术的 UPLC，它由切换阀、泵、萃取柱、分析柱、自动样品器和质谱仪组成。图 2 所示的是该系统的示意图。 分析过程从加载样品开始，通过 SPE 进样器端口（图 2 中的阀 A）加载样品。加载泵为 ACQUITY® 四元溶剂管理器 (QSM)，设置为 2 毫升/分的 100% 水溶液。它将样品从进样环移动到萃取柱 A 上。目标分析物被吸附后，萃取方法继续用温和的清洗液（ 即便是在 SPE 和 LC 需要不同的条件和吸附剂时，在线 SPE 系统也可以排列多种方法以进行连续操作。使用附加溶剂管路，可以在洗脱前为清洗步骤选择最佳的溶剂混合方法，并选择高效的溶剂混合方法进行残留管理，从而进一步优化萃取方法。此外，本系统还有一项独特的功能，可以旁路整个 SPE 通路（阀 C）以用作标准的 UPLC/MS/MS 系统。 在线 SPE 示意图 为使应用成功，还需要为萃取 (SPE) 和分离 (LC) 仔细选择化学物质。这种选择完全取决于目标分析物的物理和化学特性。SPE 和 LC 化学物质的选择必须要能够在萃取和分离条件之间实现无缝接合。Waters Oasis® HLB 和 XBridge™ 萃取柱以及ACQUITY UPLC BEH 分析柱可以提供最高效和最有效的性能，因为它们在较大的 pH 范围内具有非常好的重复性和稳定性。使用这些产品可以分析复杂混合物中大量类型的化合物。 结论 采用在线 SPE 技术的 Waters UPLC 在现有在线 SPE/HPLC 系统的基础上提供了更多的功能。  1   本系统可在直接 UPLC/MS/MS 或 SPE/UPLC 进样模式下进行多任务操作。  2   并行 SPE 配置让系统可以用同一组 SPE 化学物质排列多种方法，或用不同的 SPE 吸附剂进行分析物筛选。  3   可供选择的 SPE 和色谱化学物质众多，可以确保为大量应用提供最佳的解决方案。  4   进行痕量水平的分析（低 ppt）所需的样品体积很小，让实验室可以显著降低样品处理和分析的手工干预，从而提高工作效率。

Paul D. Rainville和Robert S. Plumb 美国，米尔福德，马萨诸塞州，沃特世公司 应用优势 这款新型的串联四极杆质谱系统 大大增加了低浓度组织样品的药物 化合物分析的灵敏度。 沃特世解决方案 XevoTM TQ-S MassLynxTM与TargetLynxTM的联合使用 ACQUITY UPLC® ACQUITY UPLC BEH色谱柱化学品 简介 对生物体液中的药物进行准确定量有助于准确测定药物的药代动力学参数。低暴露量组织样品中的化合物（如：吸入型药品或强代谢型药品）需要灵敏度非常高的分析，才可准确地确定药代动力学曲线的消除相。这对于现代的LC/MS/MS仪器灵敏度而言无疑是个挑战。 Xevo TQ-S是一款超高灵敏度的串联四极杆质谱仪。它具备以创新离轴离子源设计为特色的StepWave离子传输技术。这项设计显著提高了从离子源到四极杆分析器的离子传输效率，同时其离轴离子通路还可将中性污染物排除。这两个特点的结合大幅度增加了LC/MS/MS系统的灵敏度。   图-1. 分别采用StepWave离子传输技术（上图）和传统四极杆离子传输技术（下图）在MRM模式下通过UPLC®/MS/MS分析的丙酸氟替卡松的峰值响应的比较。 本应用纪要中，我们对2类药物化合物，丙酸氟替卡松和沙美特罗琥珀酸盐的分析灵敏度的增加进行了描述，这些药物均为吸入型药物，且在人体循环系统中表现为极低水平的浓度。Xevo TQ-S的数据高捕获率特性可允许快速收集大量的多反应监测（MRM）迁移离子，并同时采集全扫描/MRM数据。 实验 色谱条件 液相色谱（LC）系统： ACQUITY UPLC（二元溶剂管理系统、样品管理器、HT色谱柱恒温箱） 液相色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C18柱，1.7微米，2.1 × 50毫米 梯度： A：0.1％ 氨水（Aq）B：甲醇5 ~ 95%B洗脱1.5分钟以上 流速： 600 微升/分钟 进样量： 10 微升 质谱条件 质谱系统： Xevo TQ-S和Xevo TQ于电喷雾正离子模式下操作 MRM数据采集： 501 => 292.95 氟替卡松 416.15 => 380 沙美特罗 电压： 每个质谱仪及锥孔气流的毛细管、锥孔和碰撞电压都进行了最优化 源温度： 140 °C 脱溶剂温度： 625 °C 喷雾气体流量： 1200升/小时 数据管理 MassLynx 4.1 使用TargetLynx 应用管理系统进行定量分析 结果和讨论 凭借从背景噪声中对目标峰的识别能力，对生物体液中的药物化合物进行精确定量。Xevo TQ-S中的StepWave源专为优化这项功能而设计。它包括两个差分抽取的离子传输阶段；两个阶段均启用了T-Wave1技术（多层环RF装置）。当离子束通过源抽样孔时，离子束会进行一定程度的扩散。因StepWave的进口设计得足够大，它可以有效地捕获扩散离子云中的所有离子。第一阶段的设计确保了所有离子均有效聚集并进入第二阶段。这项离轴设计确保了进入到源抽样孔的中性物质主动从系统中排出（如图-2所示）。   图-2. StepWave离子传输技术的示意图，显示关注的带电分析物离子（左）和排出丢弃的中性化合物（右）的通路。离子抽样最大化排除中性化合物 在图-2中，我们可以看到：当离子云进入MS迁移区时是如何扩散的，而之后当其转移到四极杆分析器区时又是如何聚集为一狭窄的离子束的。不带电的中性化合物因无法穿过这个离轴通路而被排出丢弃。这大大提高了检测限，使生物分析学者们可对血浆、血清和尿液的分析组分在曾经无法达到的水平下进行定量分析。 通过这项StepWave设计，根据所分析的化合物，我们发现灵敏度竟增加了约10~25倍。例如：治疗哮喘和鼻炎的现代药物（如：β2激动剂和类固醇激素类药物）不会进入到循环系统且通常都是经吸入给药。这些药物化合物被有意使得在人体全身系统中以极低浓度水平存在，因此适合使用Xevo TQ-S系统进行分析。 用甲醇将丙酸氟替卡松和沙美特罗琥珀酸盐溶解，然后以不同的生理相关水平注入至血浆中。之后，用2：1的乙腈使血浆样品沉淀并离心分离，将离心后的上清液注入色谱系统。 图-1中所示数据显示：使用 Xevo TQ-S对丙酸氟替卡松进行分析时灵敏度增加；图-3中的数据显示：对沙美特罗琥珀酸盐分析所获取的峰值响应增加。丙酸氟替卡松的峰高增加了12倍，沙美特罗琥珀酸盐的峰值响应增加了15倍。 图-3. 分别采用StepWave离子传输技术（上图）和传统四极杆离子传输技术（下图）在MRM模式下通过UPLC/MS/ MS分析的沙美特罗琥珀酸盐的峰值响应的比较。 表-1中给出了这两类药物化合物及其它类型药物在峰值响应上的总体增加水平。这里我们可以看到，峰值响应增加了12~25倍不等。 表-1. 利用Xevo TQ-S的StepWave离子传输技术对多种药物化合物进行分析时的峰值响应增加的对比 除了增加峰灵敏度之外，还有其他优点。更大的峰值响应使所述的检测限无需复杂的方法开发即可获取，从而使方法开发速度更快。峰高的增加还能更加简化峰的积分，使一般应用情况下的分析重现性更好。 结论 Xevo TQ-S中的StepWave离子传输技术显著提高了离子源中离子抽样的效率。其创新的离轴几何学设计还可阻止您不需要的中性化合物进入仪器的分析器阶段。这项新的设计致使灵敏度显著增加，增加幅度从10至25倍不等。该分析灵敏度的增加有以下功能： 1  提高低暴露量化合物的检测限水平 2  加速方法开发  3  简化峰的积分  4  更好的分析重现性 此处描述的行波设备与美国专利5206506; 1993中Kirchner所描述的类似。

中国，沈阳 – 2010年7月9日–《药学学报》第十一届编委会会议于2010年7月8日至11日在沈阳凯宾斯基饭店举行。 此次会议主要探讨了《药学学报》未来的发展方向，由《药学学报》编委会主办，沈阳药科大学承办， 沃特世科技（上海）有限公司协办。此次会议主要探讨药学学报如何进一步提高学术水平和编辑质量，同时与会的专家在会议期间也深入探讨和交流我国药物研究现状和发展方向。参会人员主要是药学学报的编委会成员以及沈阳药科大学的老师和相关专业的博士、硕士生。会议中， 药物研发领域知名的专家和学者作了相关的报告和探讨。 沃特世作为全球最大的液相色谱、质谱及相关产品专业生产厂家之一，能够在药物研究，开发以及生产过程中提供总体的解决方案。在会议期间，来自沃特世公司的应用工程师王勇先生，向与会专家作了题为“沃特世UPLC®/QTof系统结合MetaboLynx™软件进行代谢物鉴定的解决方案”。MetaboLynx软件可快速检测LC/MS&LC/MS/MS样本分析中获得的体外或体内的生物转化的峰。采用MetaboLynx软件对UPLC®/QTof所采集的数据进行分析，结合MassFragment碎片分析软件，对数据进行自动处理，快速实现代谢物的鉴定。此次讲座结合实例介绍沃特世公司在代谢物鉴定工作中提出的整体解决方案。同时，也介绍了沃特世公司今年最新发布的液相和质谱产品，如ACQUITY UPLC H-Class，Xevo™ TQ-S，Xevo G2 QTof 在药物分离、DMPK和MetID方面的应用。 通过此次会议，与参会的重要用户建立联系，建立定期回访计划，掌握药物分析趋势，推动沃特世在药物分析领域的解决方案 沃特世公司王勇先生向与会专家作了题为“沃特世UPLC®/QTof系统结合MetaboLynx™软件进行代谢物鉴定的解决方案”的报告 关于沃特世公司（www.waters.com ） 50年来，沃特世（NYSE:WAT）公司通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2009年的收入达15亿美元，员工人数达5,200人，公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。 # # # Waters, ACQUITY, UltraPerformance Liquid Chromatography和UPLC均为沃特世公司的商标

目的 通过便捷的技术，无需样品提取、过滤、稀释或分离即可在香草提取物与食品中成功筛查香豆素。 背景 香豆素是存在于多种植物中的天然化合物，包括香豆、车叶草与某些品种的肉桂。假香草提取物中常加入香豆素，以增加香草气味。因香豆素有毒性，在美国、欧盟等国是禁用的食品添加剂，食品中最大限度的香豆素含量为2 mg/kg（EC指导准则 88/388/ECC）。近期报告显示圣诞饼干、姜饼、曲奇以及其他食品中香豆素水平升高的案例在欧盟市场有所增加。为遵照法规，食品企业须对香草提取物和食品进行分析，以确保食品质量与标签内容的准确性。液质联用（LC/MS/MS）是分析食品中香豆素最常用的技术。与其他分析技术一样，它需要耗时耗力的样品制备步骤：稀释、过滤与提取。因此我们迫切需要一种快速筛查工具，用于快速鉴定产品质量。 方法 Waters®大气压固体分析探头与ACQUITY® TQ检测器联用（ASAP/TQD）是理想的筛查工具，无需样品提取、稀释与色谱分离，ASAP/ TQD解决方案可快速检测各种食品基质中法规规定的香豆素的水平，包括香草提取物、咖啡、冰激凌与曲奇。 大气压固体分析探头（ASAP） 将ASAP探头上的玻璃棒直接触及样品（冰激凌与曲奇）表面，即可完成上样。香草提取物和咖啡样品使用玻璃棒直接沾取即可完成上样。 ASAP探头插入密封离子源中，去溶剂气温度快速加热到200 °C，由多反应监测（MRM）模式采集数据（质谱参数见表一）。 表1. 香豆素的MRM通道 加入法规要求的2 mg/kg的香豆素（黑色峰）的食品样品进行MS/MS分析，对照空白样品（红色峰），结果见图1。 图1：香草提取物（A）、咖啡（B）、曲奇（C）以及冰激凌（D）中加入2 mg/kg香豆素（黑色峰）对照空白（红色峰）MS/MS离子分析（m/z 147 → 103） 总结 在无样品提取、稀释与色谱分离的情况下，ASAP/TQD系统可在短短3分钟内检测出各种食品基质中2 mg/kg水平的香豆素。在没有样品制备和溶剂使用的情况下，该快速筛查方法节约了分析时间从而极大地提高了实验室产能，降低了环境污染，这恰恰符合绿色化学的原则。结论是ASAP/TQD系统极大程度地降低了实验室的运营成本。

中国，张家界 – 2010年7月11日–中国营养学会第七届理事会青年工作委员会第一次学术交流会于2010年7月11日至14日在湖南张家界举行。此次交流会议以“营养与慢性病”为主题，主要涉及营养基因组学、 代谢组学、 膳食营养与慢性病研究以及 功能保健食品营养等相关领域。 在此次会议上，来自于各方面的专家就增强营养学会青年工作者的学术交流、调节膳食营养与结构、预防慢性病等进行了深入探讨，并各专家学者作了专题演讲。 来自哈尔滨医科大学公共卫生学院孙长颢院长做了题为“代谢组学在营养学研究中的应用”的报告，主要讲解了代谢组学的定义，代谢组学的广泛应用领域，运用代谢组学研究膳食营养与慢性病的关系，钙缺乏儿童与正常儿童尿样的代谢组学研究与进展 来自于沃特世公司的孟颖女士，也在大会上做了题为“沃特世代谢组学解决方案”的报告，着重讲述了UPLC-SYNAPT® G2 HDMS在营养学研究及代谢组学研究中的应用，UPLC®作为常规分析仪器可以用于快速分析食品中的营养物质，如食品中维生素，氨基酸等的分析。带有离子淌度技术的SYNAPT G2 HDMS可用于营养物质在体内的代谢组学分析，全面了解营养物质在体内的代谢情况，从而推断可能的机理，以帮助解释膳食营养与慢性病的关系。  此图为孟颖女士做大会报告  此图为孙长颢院长做大会报告 关于沃特世公司（www.waters.com ） 50年来，沃特世（NYSE:WAT）公司通过提供实用且可持续的创新，实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步，为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合，为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2009年的收入达15亿美元，员工人数达5,200人，公司正在帮助全球客户推进科研进程，并为其提供绝佳的操作体验。 # # # Waters, ACQUITY, UltraPerformance Liquid Chromatography和UPLC均为沃特世公司的商标 联系人： 张立猛 沃特世公司市场部 86(21) 6156 2641 Daniel_zhang@waters.com