在方法开发的征途中，我们总是追求更高的效率和更优的成果。然而，在这条道路上，我们却常常面临诸多挑战：创建和验证方法的时间漫长，从数月甚至可能拖至半年，这不仅影响了研究进度，还可能让科研人员身心俱疲。更关键的是，时间的紧迫往往让人难以兼顾方法的质量和合规性。      方法开发的“三座大山”：                时间成本高：传统方法开发流程繁琐，耗时长，让科研人员分身乏术。质量难保证：手动操作多，容易出错，方法质量难以稳定。合规性挑战：随着ICH和USP等法规的不断更新，方法需时刻遵守规范，但这对科研人员来说又是一大考验。但是，现在有了Empower方法开发工具，这一切都将迎刃而解！Empower：您的科研加速器Empower软件方法开发工具，作为沃特世公司的创新之作，为科研人员提供了内置于Empower软件的插件。它不仅能将创建和验证方法的时间从数月缩短至数周，还能显著提升方法的质量，确保合规性。核心优势：                    自动化高效：从色谱柱和流动相的筛选，到数据处理和分析，再到实验设计(DoE)，Empower方法开发工具都能自动执行，大大减少手动操作，降低错误率。灵活且合规：支持溯源和合规，确保方法在整个生命周期内稳定耐用，并及时掌握最新的ICH和USP法规和指南。智能化筛选：Empower Method Developer应用程序结合HPLC和UPLC系统，提供色谱柱和流动相的指导，帮助科研人员快速开发出可用方法。简化验证流程：Empower方法验证管理器(MVM)自动完成并简化色谱方法验证过程，省去繁琐步骤，节省多达80%的时间和成本。让科研更简单、更高效Empower方法开发工具，是每一位科研人员的得力助手。它以其卓越的性能和便捷的操作，让科研人员从繁琐的手动操作中解放出来，专注于更重要的科研创新。无论是小分子筛查，还是全面的方法验证和方法性能监测，Empower都能助您一臂之力。Empower提供覆盖从开发到验证的全套自动化方案。        使用Empower Method Developer应用程序简化筛选过程                利用Empower样品组生成器减少样品组创建中可能产生的错误                根据Empower系统适应性结果自动计算方法性能        使用Empower方法验证管理器简化方法验证工作流程联系您身边的沃特世员工了解更多信息，开启您的科研加速之旅！                                                                                  

2024怀雅特大分子科学高峰论坛2024 Wyatt Large Molecular Science summit时间:2024年10月22~25日地址:上海张江海科雅乐轩酒店  主办单位：沃特世-怀雅特中国合作单位：明捷医药会务承办：上海赏悦文化传播有限公司01          论坛议程        10月22日    上海张江海科雅乐轩酒店辅料与复杂制剂研讨会10月23日    上海张江海科雅乐轩酒店高分子材料研讨会疫苗科学研讨会10月24日    上海张江海科雅乐轩酒店光散射大讲堂光散射技术知识大全光散射色谱联用技术（SEC-MALS）dn/dc与其他串联检测器（RI/UV/粘度）10月25日   国家蛋白质科学研究（上海）设施光散射大讲堂SEC-MALS高级应用课SEC-MALS实践体验课光散射实验数据处理与分析02          报名方式与时间                扫描二维码即可填写报名表报名截止时间：2024年09月30日17:00（注：报名截止日期后将不再受理培训报名）03          参会明细        01              会场时间与地址              10月22日-24日会场:上海张江海科雅乐轩酒店 （上海市浦东新区海科路 550号）10月25日会场:国家蛋白质科学研究(上海)设施（上海市浦东新区海科路 333 号）住宿地点:上海张江海科雅乐轩酒店（上海市浦东新区海科路 550号）02              费用明细              10月22日-23日研讨会：免费10月24日-25日培训班-不含住宿：2500.00元/人，含培训费、资料费、工作餐10月24日-25日培训班-双人标间：3500.00元/人，含培训费、资料费、工作餐、10月22日-25日三晚住宿10月24日-25日培训班-单人单间：4500.00元/人，含培训费、资料费、工作餐、10月22日-25日三晚住宿*标间请于报名表中注明同住参会人姓名及电话，否则将按同性别随机安排2人一间。03              付款方式              汇款户名：上海赏悦文化传播有限公司开户行：中国民生银行上海京门支行账号：157546978付款联系人：申洋 15201836349汇款时请备注：服务费开票项目名称：*现代服务*会务服务需要付款的嘉宾请在报名表中填入开票信息，并于9月30日前完成汇款04              联系我们              联系人：崔曼丽E mail：WTC_Info@waters.com电 话：18801481919关于怀雅特Wyatt          美国怀雅特公司(Wyatt)是具有40多年历史全球领先的专业研发生产激光光散射仪的制造商。2023年被美国沃特世公司（Waters）收购。其产品广泛用于表征生物大分子、合成高分子和纳米颗粒的绝对性质，并提供多种解决方案，助力蛋白药物、传统疫苗和新型疫苗及病毒载体的表征和开发。怀雅特技术公司在科学仪器方面有着悠久的卓越历史，在测定溶液中的大分子和纳米颗粒的性质，以及创新光散射仪器、配件、软件和服务等方面技术领先。

           近年来，随着基因治疗领域的飞速发展，腺相关病毒(AAV)因其独特的优势，如能够感染分裂和非分裂细胞、产生长期基因表达、低毒性和低免疫原性，已成为该领域最重要的基因载体之一。近日，中国食品药品检定研究院的研究团队与沃特世合作，在《中国生物制品学杂志》上发表了一项重要研究，利用反相液相色谱-质谱联用技术(RPLC-MS)对重组腺相关病毒6型(rAAV6)的衣壳蛋白进行了全面表征分析，为AAV基因治疗制品的质量控制及生产工艺的提升提供了有力支持。                      研究背景        AAV是一种细小病毒，其衣壳由三种蛋白（VP1、VP2和VP3）的60个亚基组成，这些蛋白以约1:1:10的摩尔比存在，并共享重叠序列。不同血清型的AAV衣壳蛋白具有不同的同源性和组织嗜性，这些特性直接影响病毒载体的感染活性和组织靶向性。因此，对rAAV载体衣壳蛋白的表征分析对于确保基因治疗产品的安全性、有效性和批间一致性至关重要。      研究方法        研究团队采用了RPLC-MS联用技术，通过优化流动相、柱温和梯度洗脱条件，结合ESI-Q-TOF质谱检测，对rAAV6的衣壳蛋白进行了精确分析。      研究结果        01        相对分子量结果                  通过RPLC-MS分析，研究团队成功测定了rAAV6衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的完整相对分子质量，分别为81255.9、66062.9和59488.6 Da，与理论值的偏差分别为8.1 ppm、3.8 ppm和36 ppm。如图1和图2所示，采用DFA作为流动相改性剂相较于甲酸改性剂，在色谱分离过程中实现了对亚基之间更为优越的分离效果，使得我们能够观察到更加丰富的亚基形式。表1展示了rAAV6衣壳蛋白分子量表征结果。图1. 相对分子量测定总离子流(total ion chromatogram，TIC)图谱。图2. rAAV6衣壳蛋白相对分子质量检测质谱图（上：VP1蛋白相对分子质量结果示例；C：VP2蛋白相对分子质量结果示例）。表1. rAAV6衣壳蛋白分子量表征结果。    02          质量肽图结果                      进一步的酶切后质量肽图分析显示，样品序列覆盖率达到约89%，检测到的翻译后修饰(PTM)主要包括脱酰胺、脱酰胺化琥珀酰亚胺、N-末端乙酰化、泛素化和磷酸化，未观察到糖基化修饰等其他翻译后修饰(PTM)类型。如图3所示，串联质谱分析还确证了rAAV6衣壳蛋白的N-末端序列、C-末端序列及其N-末端的PTM。肽图检测修饰汇总见表2。图3. 各碎片离子匹配图示例。表2. rAAV6肽图检测修饰汇总。      研究意义        本研究使用RPLC‐MS对预处理后的rAAV衣壳蛋白直接进行分析，建立了以DFA作为流动相改性剂对衣壳蛋白进行相对分子质量检测的方法，获得了较好的分离效果。在溶液内对衣壳蛋白进行胰蛋白酶(Trypsin)消化后，通过LC‐MS／MS进行肽图详细表征，鉴定了VP1、VP2和VP3中N‐末端和C‐末端序列，以及各种翻译后修饰。本研究建立了AAV6衣壳蛋白的深度表征液质分析方法，质谱技术可应用于不同批次产品、不同生产工艺一致性的评价分析，对AAV基因治疗制品的质量属性研究及生产工艺监控和提高具有积极的借鉴意义。未来，随着技术的不断进步，RPLC-MS联用技术有望在更多生物制药领域发挥重要作用，推动基因治疗等前沿技术的快速发展。                                                                          

质谱成像技术在利用质谱分析得到化合物基本信息的同时也提供了其空间的分布和含量变化。解吸电喷雾电离(DESI)技术是一种原位的电离技术，它不需要或只需要简单的样本前处理，样品保持生鲜态和特征无损，与质谱结合可快捷帮助研究人员获取材料和组织切片中的关键物质信息及分布信息。      单细胞水平的研究可以揭示生命活动规律、疾病发病机制、药物靶向治疗等重大科学问题，是当前生命科学中最热点的研究领域之一。沃特世在2024 ASMS会议上，发布了基于DESI技术的质谱分子成像方案，空间分辨率>=5 μm， 用简单的方法实现了单细胞质谱成像。本次研讨会采用线下和线上结合的方式，将重点讨论原位分子成像质谱技术的应用进展，欢迎报名参加！△立即扫码报名        日程                        14:30-14:35开幕致辞中山大学分析测试中心领导14:35-15:00DESI单细胞质谱成像解决方案与Waters新产品介绍沈志扬 | 市场总监，沃特世公司15:00-15:25组织成像样本前处理技术探讨朱新海 | 高级实验师，中山大学15:25-15:50质谱成像技术研究环境污染物对健康的影响罗茜 | 研究员，中国科学院深圳先进技术研究院15:50-16:15解吸电喷雾技术及其最新应用进展曾玮 | 高级应用经理，沃特世公司        嘉宾介绍                      罗茜        研究员，中国科学院深圳先进技术研究院        中国科学院深圳先进技术研究院科学仪器所（集群）（筹）所长，研究员，博士生导师，中科院深圳先进院P3实验室主任。2008年在香港浸会大学获得博士学位。主要从事空间代谢组学的质谱新方法和新技术研究。发表SCI文章近100余篇；授权中国及PCT专利20余项；主持国家自然科学基金委重大仪器研制项目（自由申请）和重大研究计划（培育），国家发改委平台建设、科技部重点研发专项、中科院仪器研制项目、广东省和深圳市基础重点、技术攻关和科研平台建设等20余项以及负责筹建中科院深圳先进院P3实验室设施。      朱新海        中山大学分析测试中心高级实验师        中山大学分析测试中心高级实验师，广东省分析测试协会质谱专业委员会委员。长期从事质谱相关仪器的表征分析、新方法开发和仪器功能拓展等工作。分析方向包括脂质、代谢、蛋白组学分析，完整蛋白质、聚合物等大分子分析，金属纳米团簇分析，环境污染物及其降解产物分析，植物、中药材成分分析，药物杂质分析，原位分析及质谱成像等。曾主持并完成了两项国家基金项目及多项技术开发项目，作为主要参加人参与完成了多项国家级、省部级科研项目及横向合作项目的研究工作，发表SCI收录论文五十余篇，授权国家发明专利十余项。  

目前国内外水体中农药的相关检测方法主要基于色谱或色谱与质谱联用技术，LC-MS方法具有高灵敏度、高通量以及假阳性率较低等优点，是农药检测的重要手段。水体中农药类污染物赋存水平低，直接进样法虽然便捷快速，但难以满足部分农药类物质的灵敏度需求，需富集后测定。常用的提取、富集技术有液液萃取、固相萃取、固相微萃取等，但前处理耗时往往长于仪器分析检测时间，制约检测效率。在线SPE技术与离线SPE相比，上样时间由1-2h缩短到几分钟，水样体积由几百毫升降低至几毫升，样品采集、运输及保存的便捷性大大提升。同时由于自动化程度高，人员操作步骤少，实验操作误差小。中国CDC环境与健康相关产品所张岚研究员团队基于该前处理技术建立了适用于水源水及饮用水中107种典型农药及其代谢产物的检测方法，从样品富集至检测完成仅耗时20余分钟，检测用时短、灵敏度高、重复性好，可用于水源水及饮用水中典型农药类污染物检测及风险监测。方法优势                        使用在线固相萃取⁃超高效液相色谱串联质谱法快速筛查和检测水源水及饮用水中107种典型农药及代谢产物（有机磷类、有机氮类、有机杂环类、氨基甲酸酯类、酰胺类、苯甲酰脲类、新烟碱类等）；将该方法与水体中农药类相关标准检验方法进行了对比，本方法样品用量少、前处理简单快速，样品富集及分析时长仅23 min，且所需有机试剂种类少、用量小，准确灵敏，更适合于水体中痕量农药及代谢产物进行测定，检测效率优于其他方法。相较于离线SPE柱的一次性使用，在线SPE柱可反复使用，此方法中SPE柱累计使用次数约为450次，通过对不同批次测定的农药类化合物保留时间、峰形及峰面积进行比较，无显著性差异。沃特世Quanpeida数据库可快速调用更多种类农药在线固相萃取 ⁃ 超高效液相色谱串联质谱方法。样品在线前处理                        在线SPE系统为两根SPE柱平行设计，如下图所示，本研究使用两根XBridge C18 SPE柱，分别与二元泵(pump 1)和四元泵(pump ２）连接。一根SPE柱在四元泵系统进样富集后通过阀切换至二元泵系统，通过流动相将目标分析物洗脱入分析柱分离后进行质谱检测，同时另一根SPE柱同步进行阀切换，由二元泵系统通过切换至四元泵系统进行再生，以备下一样品进样、富集使用。由此往复，实现SPE柱交替使用，节约了再生、平衡时间。在线SPE方法：流动相A为纯水；流动相B为乙腈；在线SPE柱为XBridge C18 SPE(30 mm×2.1 mm, 10 μm)；进样量: 5 mL。梯度洗脱程序见下表１，其中3.5-4.5 min为阀切换时间。LC及MS条件                        1LC条件：⾊谱柱：ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm x 2.1 mm, 1.8 μm)流动相A：0.1%甲酸水溶液流动相B：乙腈溶液流速：0.4 mL/min梯度如下：2MS条件：电离模式：ESI+⽑细管电压：1.5 kV脱溶剂⽓温度：500 °C脱溶剂⽓流速：1,000 L/h锥孔⽓流速：50 L/h离⼦源温度：150 °C化合物MRM方法见文献原文。实验结果                        检出限及定量限：107种农药及代谢产物方法检出限为0.03-1.5 ng/L，定量限为0.1-5 ng/L；线性范围：107种农药及代谢产物在不同范围内线性关系良好(r²＞0.995)；回收率及精度：分别向饮用水及水源水中添加低、中、高3个水平(１,20,50 ng/L)的标准溶液进行加标回收试验，每个水平平行进行6组，计算回收率及相对标准偏差，结果饮用水中107种目标分析物在3个水平下的加标回收率(n＝6)分别为61.4%-91.4%、62.8%-119.0%和61.2%-115.7%，RSD分别为0.9%-17.1%、0.6%-14.1%和0.4%-12.7%。水源水中107种目标分析物在３个水平下加标回收率(n＝6)分别为60.6%-94.2%、61.1%-119.8%和61.1%～115%，RSD分别为0.7%-18.6%、0.7%-15.7%和０.3%-16.2%。结论                        该研究建立在线固相萃取-超高效液相色谱三重四极杆质谱法快速筛查和确证饮用水中107种典型农药及代谢产物的方法，可对水体中有机磷类、氨基甲酸酯类、酰胺类、苯甲酰脲类、新烟碱类等农药及代谢产物同时测定，具有高通量、高灵敏度、高准确度的优点，实际应用价值较高。          参考文献          陈永艳，吕佳，张岚，叶必雄，金宁. 在线固相萃取⁃超高效液相色谱⁃三重四极杆质谱法测定水源水和饮用水中107种典型农药及代谢产物. 色谱，2022.40（12）：1064-1075;（DOI:10.3724/SP.J.1123.2022.07011）                                                                针对水质农药标准的更新，沃特世公司及时更新了Quanpedia数据库，完成该方法的方法包。如您对以上方案感兴趣，欢迎在文末给小编留言或联系您身边的沃特世销售。                                                                                      

     聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)是一种生物可降解的高分子材料，是聚乳酸(PLA)和聚乙醇酸(PGA)的共聚物，广泛应用在生物医用材料、药物递送系统等场景中。本研究利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定PLGA的分子量分布和多分散性。采用配置强溶剂兼容包和RI检测器组成的Arc GPC系统，利用聚苯乙烯标准品的校准曲线对PLGA样品进行分析。并进一步研究水对PLGA降解的影响，在0.5%聚乙烯醇(PVA)水溶液中14天，PLGA样品分子量降低。          PLGA相对分子量和分散性分析        PLGA样品购自Sigma-Aldrich，不同比例的丙交酯:乙醇酸酯(L:G)聚合物(50:50, 65:35, 75:25, 85:15)溶解于四氢呋喃中，制备5 mg/mL的浓度PLGA样品。在GPC分析之前，使用玻璃注射器通过0.45 μm PTFE注射器过滤器过滤溶液。具体实验条件点击文末阅读原文获取。图1. 采用Arc系统分析聚苯乙烯标准品和PLGA样品色谱图。图2. 采用Arc系统分析PLGA样品结果。PLGA降解研究        在降解研究中使用了50:50和75:25丙交酯:乙醇比例的PLGA，分别称重约25mg聚合物在含0.5% PVA的1 mL去离子水中，于37℃孵育。在第1天、第2天、第6天、第8天、第12天和第14天从培养箱中取出小瓶。丢弃水介质后，用去离子水冲洗样品，并在真空下干燥以去除残留的水。最后，将样品溶解在THF中配置5 mg/mL浓度，通过PTFE注射器过滤器过滤。与第0天的样品相比，对于PLGA 50:50，第14天样品的多分散性指数(PDI)最大，为2.4，而第8天和第0天的样品分别为1.8和1.6。在研究中，PLGA 75:25样品具有相似的多分散性变化。图3. 在0.5% PVA水溶液中37℃孵育的PLGA聚合物的重量平均分子量(Mw)。图4. 37°C 0.5% PVA水溶液中PLGA 50:50 (A)和PLGA 75:25 (B)降解的分子量分布图。                Empower软件GPC选项支持快速数据分析，能有效表征聚合物分子量和分子量分布。Arc系统和强溶剂兼容包以及示差检测器的组合，还为进一步降解研究提供稳定、可用于比对研究的数据。                                                                                                                                                                                                  参            考            阅            读                        重磅！沃特世推出全新Arc HPLC高效液相色谱Arc HPLC系统          

近期，中国药科大学梁艳等在《Frontiers in Pharmacology》发表了《Feasibility exploration of GSH in the treatment of acute hepatic encephalopathy from the aspects of pharmacokinetics, pharmacodynamics, and mechanism》，文章研究了谷胱甘肽治疗急性肝性脑病的可行性。急性肝性脑病(acute liver encephalopathy, AHE)是肝性脑病的一种亚型，以急性肝损伤引起的严重神经功能障碍为特征，病死率超过80%。谷胱甘肽(GSH)是一种在哺乳动物组织中普遍存在的细胞内硫醇三肽，可减轻肝和脑损伤。在此前提下，假设谷胱甘肽可能是治疗急性肝性脑病(AHE)的有希望的候选药物。为了验证这一猜想，作者使用硫乙酰胺诱导的AHE大鼠模型，通过全面的药代动力学、药效学和机制研究，系统地研究了谷胱甘肽作为AHE治疗剂的可行性。                药理学数据表明，口服谷胱甘肽可以通过调节肝内ALT、AST、炎症因子和氨基酸稳态，显著改善AHE大鼠的行为评分，减轻肝损伤。此外，口服谷胱甘肽通过减轻脑内谷氨酰胺的积累、下调谷氨酰胺合成酶和减少牛磺酸暴露，显示出神经保护作用。药代动力学研究提示AHE模型导致肝和脑GSH和半胱氨酸暴露量显著降低。然而，口服谷胱甘肽可显著提高AHE大鼠肝内和皮质内GSH和CYS。鉴于CYS和GSH在维持氧化还原稳态中的关键作用，作者研究了氧化应激与AHE发病/治疗之间的相互作用。数据显示，GSH通过下调NADPH氧化酶4 (NOX4)和NF-κB P65的表达，显著缓解了AHE模型引起的氧化应激水平。重要的是，研究结果进一步表明，GSH通过iNOS/ATF4/Ddit3途径显著调节AHE模型引起的过度内质网(ER)应激。综上所述，文章发现外源性GSH可以稳定脑内GSH和CYS水平，从而作用于脑氧化应激和内质网应激，具有很大的临床意义，对揭示谷胱甘肽对AHE的治疗作用，促进其进一步开发和临床应用具有重要意义。图1. 摘要图片。      DESI-Xevo TQ Absolute靶向质谱成像(MSI)实验证明了：    口服谷胱甘肽显著通过靶向质谱成像证实增加了AHE大鼠肝脏和皮质中GSH和CYS的暴露。DESI-MSI分析表明肝脏和大脑皮层的GSH水平由于AHE模型而下降，但通过口服GSH恢复。图2. 小鼠肝脏GSH的MSI。    图3. 用DESI XS测定小鼠脑内谷胱甘肽(GSH)、谷氨酰胺(GLN)和牛磺酸(TAU)的MSI。        👉🏻点击查看文献原文：Frontiers | Feasibility exploration of GSH in the treatment of acute hepatic encephalopathy from the aspects of pharmacokinetics, pharmacodynamics, and mechanism (frontiersin.org)DESI-Xevo TQ Absolute 靶向质谱成像                          领先的整体靶向成像解决方案空间分辨率：轻松实现20 µM，调整参数可达5 µM灵敏度：与高分辨质谱成像相比至少5倍的灵敏度提升速度：与高分辨质谱成像相比至少5倍的检测速度提升定量：使用MSI Quantify MicroApp为实施质谱成像定量实验提供了工作流程更多关于DESI质谱成像:质谱成像 | DESI和MALDI | Waters                                                                          

                                                                                                                                   上一期Empower软件使用小技巧（五）：如何通过主成分计算杂质的含量介绍了如何通过主成分的标准曲线来计算已知和未知杂质含量的方法，那么如何通过比对主成分对杂质进行定量的同时对杂质信息进行汇总呢？这一期我们将进一步给大家介绍如何对杂质信息进行汇总的问题。                                    我们以图1为例，一起看一下如何设置处理方法参数，实现通过主成分计算杂质的含量并且对已知和未知杂质含量进行汇总的目的。图1. 样品杂质谱图。大家还记得吗，图1中的杂质RRT～0.236和RRT～1.093色谱峰是软件以主成分的相对保留时间自动命名的组分，且处理方法里的“组分”列表中没有指定其名称，我们暂且称之为“未指定杂质”。而图1中的杂质1、杂质3和杂质4均出现在处理方法里的“组分”列表中，我们暂且称之为“指定杂质”。将鼠标光标放置在一个未指定杂质色谱峰上（如RRT～0.236色谱峰），鼠标右键快捷菜单中选择“添加/编辑组分名”，在弹出的“编辑组分名”窗口中确认组分名称和保留时间，点击“确定”。对另一个未指定杂质重复以上操作，如图2所示。图2. 添加未指定杂质组分。处理方法“组分列表”中将添加有这两个未指定杂质组分，如图3所示。在“组分类型”字段中，分别选择“指定杂质”和“未指定杂质”，在“曲线参比”字段中，选择定量参比的色谱峰“主组分”，以便 Empower软件比对主组分的校正曲线来定量杂质。“相对响应”字段会将计算得到的杂质含量乘以一个因子（缺省值为1）。图3. 分别设置杂质的组分类型。在“杂质”选项卡中，将“杂质响应”设置为“含量”，并选择主要组分。然后创建两个刚刚定义的杂质组 - 一组为未指定的杂质，另一组为指定的杂质。在“组名”字段中输入相应的组名称，然后从下拉列表中选择组分类型，如图4所示。处理方法参数就编辑好了。图4. 创建杂质组。用上述我们编辑好的处理方法处理样品，就可以看到样品中指定杂质的总杂质响应和未指定杂质的总杂质响应，以及样品中的杂质含量是否超过处理方法中设置的阈值。如图5所示。图5.杂质含量设置。        以上就是通过主成分的标准曲线来对杂质进行定量和汇总的全部内容。怎么样，是不是很简单，您学会了吗？         

   上一期的开学露一手 | 液相色谱和质谱技术云课堂讲座，和大家分享了色谱分析技能、质谱基础知识，在本期的讲座中，我们将继续邀请沃特世技术专家，给大家带来UPLC/Premier新技术专场，让大家课题无忧，效率Biubiu!超高效液相色谱(UPLC)作为分离科学中的一个全新类别，凭借高分离度、高速度、高灵敏度等优势，在生物医学、新型材料、食品环境、药物研发与质量控制等应用领域得到了广泛的市场验证。MaxPeak高性能表面（HPS)技术的发布，更是将UPLC分离科学推到了一个全新水平。本次讲座，特别邀请沃特世技术和应用专家，结合实际案例，与大家分享UPLC的良好使用规范、故障排除思路与维护技巧，色谱柱选择策略与最新应用案例等知识干货，欢迎大家扫描二维码，报名参与！        △立即扫码报名          直播时间                    2024年9月19日（周四），14:00-16:00          日程安排                    如何用好超高效液相色谱仪 (UPLC)，提高实验室效率                          彭楷尧沃特世大中华区技术中心高级专家2012年加入沃特世，任职于LCMS售后技术服务支持部门，2023年起担任大中华区技术中心高级专家。        如何选择合适的色谱柱，应对科研分析挑战          孙兴            沃特世大中华区消耗品部应用工程师            沃特世大中华区消耗品部应用工程师，负责色谱耗材的技术支持和相关应用方法开发，有丰富的工作经验。        赶快扫码预约席位，走进沃特世超高效液相色谱(UPLC)云课堂。新学期新气象，是时候拉满能量了！另外，开学新装备 | 沃特世耗材限时优惠！火热进行中，欢迎大家扫描文中二维码，与我们联系！

                       沃特世中秋促销 提前剧透                中秋国庆惊喜来袭！沃特世特别推出两大促销活动，让您一键唤醒仪器新生，错过就要再等一年！活动一：购买整机深度维修服务，即可免费升级软件；活动二：购买硬件拓展升级，将免去上门服务费用和工时费。                                                                            01          购买整机深度维修，免费升级软件！                                              您是否会时常碰到以下的问题：大量的历史数据影响着新项目的工作开展受限于老版本的软件，无法使用设备新的功能旧的操作系统，无法提高PC性能，无法摆脱通讯故障与宕机，对于工作效率有影响购买整机翻新服务，为您的软件免费升级！*限原软件是Empower 3单机版升级到最新版本；原软件是Masslynx升级到最新版本。▲更多支持产品目录(*如果您的设备不在列表中，请拨打：800 (400) 820 2676与我们联系)                02    购买硬件拓展升级，免上门和工时！                        沃特世为您提供以下服务：01               硬件拓展升级                                          02               免费升级固件版本                                          03               免费对整机进行全面检查                                                                      整机深度维修服务                            深度维修服务介绍                        沃特世售后服务部维修中心，一支经验丰富、技术精湛的团队。配备有完善的检验检测设备，始终致力于提升售后服务品质及客户体验。选择沃特世官方深度维修服务，对仪器进行深度清洁、维修、维护保养及固件升级等操作，可使您的设备焕然一新，达到新机验收标准，使用寿命延长达5年以上！同时赠送一年的整机全面质保服务，承诺无任何额外费用产生。最终交付设备，无论从外观表现还是性能参数都将超越期望！深度维修服务，为您提供置换、报废外的另一个优质选项。          特色内容                    系统级深度维修业务，除更换全套性能维护包(PM kit)耗材外，还享有以下增值服务：❶泵：更换流动相入口管路(消除污染可能)；更换所有高压不锈钢管路(消除盐析微漏故障)；更换高压阀V1、V2密封套件；泵体检查翻新保养，更换核心驱动轴承、丝杆(消除老化磨损隐患)；脱气机清洁润滑(消除脱气性能不佳情况)；脱气包、比例阀视技术指标诊断翻新或换新；电路板防静电除尘，更换老化保险丝；外壳、门视情况翻新或更换；废液管道换新等。❷进样器：进样转盘、驱动单元总成深度清洁润滑保养(消除老化，冷凝水锈蚀霉变导致卡顿故障)；进样器小车驱动总成深度清洁润滑保养(消除老化卡顿故障)；洗针管路、清除管路、进样针、针座、样品注射器以及清洗注射器全部换新(彻底消除残留污染隐患)；制冷温控单元检修保养；电路板防静电除尘，更换老化保险丝；外壳、门视情况翻新或换新。❸柱温箱：深度清洁保养；加热器检修；电路板防静电除尘，更换老化保险丝；易损配件如把手、门栓换新 。系统级深度维修，柱温箱部分赠送，不另外计费。❹光学检测器：整机深度清洁；更换老化光学原件(包括灯、反光镜、透镜、光栅等)，光学平台光路专业校准；电路板防静电除尘，更换老化保险丝。此外，设备维修中，如发现有其他部件或电路板损坏，将一并免费更换。除分模块的性能检查外，整机出厂前会组装成系统，并执行系统级SQT验证测试，确保全面达到甚至超越性能参数指标要求。另外，会随机提供完整测试报告，确保整机性能、品质卓越！                              ▲深度维修前后对比案例展示    *本次活动解释权归沃特世科技（上海）有限公司所有                                                                              

兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品（如鸡蛋、奶品、肉品等）中原型药物或其代谢产物，以及与兽药有关的杂质的残留。这种残留通常以微克每毫升（μg/ml）或微克每克（μg/g）来计量。一、兽药残留的产生原因• 养殖环节用药不当：非法使用违禁药物、不遵守规定休药期、滥用药物（如长期使用药物添加剂、随意使用新或高效抗生素等）都是产生兽药残留的主要原因。• 违背有关规定：如《兽药管理条例》明确规定兽药标签必须写明主要成分及其含量，但有些兽药企业为了逃避报批，在产品中添加化学物质而不在标签中说明，导致用户盲目用药。• 屠宰前用药：为了掩饰有病畜禽的临床症状以逃避宰前检验，或在休药期结束前屠宰动物，都能造成兽药残留量超标。                                       图片来自网络二、兽药残留的危害• 对人体健康的直接危害：长期食用兽药残留超标的食品，当体内蓄积的药物浓度达到一定量时，会对人体产生多种急慢性中毒。例如，盐酸克仑特罗（瘦肉精）超标可导致中毒，四环素类药物能抑制骨骼和牙齿的发育，红霉素等大环内酯类可致急性肝毒性等。• 耐药性问题：在畜禽生产过程中频繁使用低剂量的抗菌或抗生素药物，导致动物体内的病原菌出现耐药性，继而产生耐药基因。人体内病原菌约有60%来源于畜禽，人们食用含有耐药性菌株的动物性食品后，会造成耐药性反应，甚至出现“超级细菌”，严重威胁人体健康。• 生态环境影响：动物体内残留的兽药伴随尿液、粪便等排泄物移转化到水源和土壤等环境中，特定条件下可抑制某些微生物的生长，影响生态可持续发展。三、兽药残留的检测方法包括高效液相色谱法、质谱法、酶联免疫吸附试验法、光谱学方法、原子吸收光谱法、电化学法等想要查看兽药残留检测相关国家标准和更多检测方法，可直接访问行业应用栏目http://www.instrument.com.cn/application/ 本次优质解决方案推荐聚焦兽药残留检测，方案分别来自品牌赛默飞、安捷伦和沃特世。优质解决方案一：兽药残留分析应用文集  （点击标题可直接跳转至详细方案）牛奶中抗生素类兽残回收率实验结果牛奶中驱肠虫药类重复性实验数据方案来源：赛默飞摘要：本文集针对于兽药残留中的抗生素、磺胺类、驱肠虫类、镇静剂类药物等项目建立了相关液相色谱解决方案，为有效监控动物源性食品中兽药残留提供了强有力的检测手段。关键词：兽药残留  抗生素类  磺胺类  驱肠虫类  镇静剂类  液相色谱   完整方案链接：https://www.instrument.com.cn/application/Solution-927939.html 优质解决方案二：牛奶/奶粉多兽药残留解决方案  （点击标题可直接跳转至详细方案）                超过 80% 的兽药在 1 ng/g、5 ng/g 和 20 ng/g 添加水平的牛奶和奶粉样品的回收率在 80%-120% 之间方案来源：安捷伦摘要：利用液相色谱串联三重四极杆液质联用系统分析牛奶/奶粉中的多种兽药残留，涵盖了从样品前处理、采集方法、数据分析方法到最后报告生成的全流程。仅需一次样品前处理、两针进样，在一天内即可实现 32 类 217 种兽药残留的分析，大大节省了费用和分析时间，实现损失和风险的最小化。关键词：液质联用系统  牛奶/奶粉  兽药残留技术特点：解决方案覆盖面广、高效、简便、满足多残留限量 (MRL) 要求完整方案链接：https://www.instrument.com.cn/application/Solution-927939.html 优质解决方案三：HLB-UPLC-MS/MS测定动物源性食品中的多兽药残留  （点击标题可直接跳转至详细方案）方案来源：沃特世摘要：本实验建立了动物源性食品中多种兽药残留同时检测的方法。猪肉样品经酸化乙腈溶液提取，利用固相萃取小柱通过式净化处理，UPLC-MS/MS检测。经前处理与仪器条件优化后，在0.5~10 µg/kg的添加浓度范围内，磺胺、氯霉素、β-受体激动剂等多个种类的兽药残留化合物回收率在20% - 120%之间，精密度RSD关键词：兽药残留  猪肉  UPLC-MS/MS  技术特点：样品处理方法可以同时净化不同种类的兽药残留； Waters数据库节约方法研发成本，避免实验室间方法差异；稳定的回收率和精密度完整方案链接：https://www.instrument.com.cn/application/Solution-908038.html 更多食品兽药残留检测方案及相关仪器应用请浏览行业应用栏目：http://www.instrument.com.cn/application/ ══════════▼▼▼══════════【行业应用】是仪器信息网专业的行业技术解析和应用拓展平台，聚焦食品农产品、传统制药、生命科学、环境保护、医疗卫生、化工生产、新能源等不同行业，以相关国家标准为依据，依托国内外主流厂商的仪器设备和优质解决方案，为用户进行全方位的检测方法和具体应用方案解读，旨在解决每一位用户的科学实验需求。

 研究背景蛋白质分子在真实生命条件下的结构和功能特性往往受多种环境因子调控，包括配体分子、缓冲条件以及各种类型翻译后修饰等。作为一种常见的翻译后修饰，蛋白不稳定聚糖修饰，例如糖基化中的唾液酸化修饰，在各种生物过程中发挥着至关重要的作用。然而，由于天然可变性和环境敏感性，在完整蛋白水平研究唾液酸化修饰的构效关系一直缺乏合适的结构分析手段。论文简介近日，南开大学李功玉课题组（研究方向：大分子结构质谱分析）与福州大学李金宇课题组（研究方向：计算化学生物学与药物化学）合作，发展《糖型分辨去折叠离子淌度质谱》方法，利用课题组自主开发的《结构质谱指引下的分子动力学模拟》技术，成功揭示了唾液酸化修饰与糖蛋白构象稳定性之间的复杂关系（Chem. Sci. 2024, DOI: 10.1039/D4SC03672G）。该研究通过对唾液酸化模式、化学计量学信息及其对构象稳定性影响的综合分析，系统阐明唾液酸化调节蛋白质动态三维结构的分子机制，为蛋白低丰度翻译后修饰结构的快速高效解析提供一种新思路。该工作是李功玉课题组在《构象分辨质谱分析》领域的应用方法学拓展与深化，通过发展全离子去折叠、非变性离子淌度质谱和全原子分子动力学模拟技术，使构象分辨质谱分析从小肽（Angew. Chem. Int. Ed. 2023, e202314578; Chem. Sci. 2023, 5936-5944; Anal. Chem. 2023, 2221-2228）跨越至大蛋白（Chem. Sci. 2024, DOI: 10.1039/D4SC03672G; Anal. Chem. 2023, 10895-10902; Anal. Chem. 2022, 2142-2153），成功实现微小差异的蛋白动态构象的快速高效分辨分析，有效提高了结构质谱解析气相蛋白动态构象的结构分辨率（Nat. Commun. 2019, 10, 5038），属于化学测量学领域质谱分析方向的前沿研究课题。研究亮点开发了一种糖型分辨蛋白构象去折叠策略，通过课题组前期报道的全离子去折叠 (AIU) 与非变性离子淌度质谱 ( Native IM-MS ) 联用技术，实现了对不同糖型蛋白质构象的稳定性快速分析和动态去折叠过程的可视化追踪（Chem. Sci. 2024, DOI: 10.1039/D4SC03672G）。通过自主构建的定量分析构象参数，定量揭示唾液酸化对蛋白构象稳定性的调控作用，首次发现唾液酸化可以稳定蛋白质构象，并限制其动态构象转变（Chem. Sci. 2024, DOI: 10.1039/D4SC03672G）。将课题组前期（Chem. Sci. 2023, 5936-5944）提出的《结构质谱指引下的分子动力学模拟》新思路，首次拓展至大蛋白（> 80 kDa）结构解析。利用这种独创结构质谱解析平台，课题组近期成功解析蛋白气相去折叠的新型分子机制（Chin. Chem. Lett. 2024, in press），发现富含片层的结构域优先去折叠，并观察到 β-片层到 α-螺旋的动态转变，同时证明 α-螺旋比 β-片层具有更高的稳定性。该方法具有较强的广泛适用性，未来可应用于几乎所有蛋白体系。研究内容首先，为了表征不同胎球蛋白的唾液酸化模式，作者进行了基于 EThcD 的自下而上的糖蛋白质组学实验，图 1b 总结了牛胎球蛋白（bFT）和人胎球蛋白（hFT）的位点特异性糖基化模式。值得注意的是，具有两个唾液酸的糖型在 bFT 中占主导地位，而具有一个唾液酸的糖型在 hFT 中最为丰富（图 1c）。图1. bFT 和 hFT 的糖基化模式为了探究完整蛋白质结构与特定糖型之间的联系，作者开发了一种糖型分辨去折叠策略，该方法结合了非变性离子淌度质谱（Native IM-MS）与全离子去折叠（AIU）技术。通过优化转移池电压， hFT 的氧鎓离子和主要蛋白形式（电荷状态 12+ 、 13+ 和 14+）都得到了很好的分离，通过糖型分辨去折叠实验确定的糖型也与糖蛋白组分析一致（图 2b）。为了更加直观地比较蛋白质构象，作者为每种糖蛋白生成了 AIU 指纹图谱。实验结果表明，随着唾液酸数量的增加，第二个构象与第三个构象之间的 CCS 值差异逐渐缩小。此外，三唾液酸化的 hFT 具有四个构象，而其他唾液酸形式则具有五个构象，由此说明唾液酸的数量可能与胎球蛋白的构象灵活性有关（图 2c）。图2. 糖型分辨全离子去折叠可视化图谱为了进一步阐明唾液酸化诱导的蛋白质结构变化，作者量化了一系列的构象参数，包括 CCS 、 AIU50 等。第一个构象转变（T1）的 AIU50 值随着唾液酸个数增加而升高（图 3b 和 3f），这意味着唾液酸化会稳定糖蛋白结构，作者推测这可能是通过促进唾液酸和蛋白质结构域之间的额外静电相互作用和氢键作用实现的。值得注意的是，在 hFT 的第二个转变（T2）中观察到了相反的趋势，作者推测可能是唾液酸化在一定程度上促进了蛋白质的构象灵活性（图 3f）。之后，作者利用展开曲线来量化去折叠比例，并绘制了关于唾液酸化构象稳定性和动态转换的图谱。通过监测 CCS 变化百分比与碰撞电压的关系，绘制了展开曲线（图 3c 和 3g）。展开曲线显示，随着唾液酸数量的增加，去折叠起始能量逐渐增加，这表明存在明显的依赖唾液酸数量的展开趋势。同时，糖型分辨去折叠策略放大了构象差异， bFT 和 hFT 的 RMSD 分别为 5.9%~20.8% 和 7.7%~20.9% （图 3d 和 3h）。这些发现凸显了基于 AIU 方法在表征由不稳定的聚糖修饰诱导的细微构象变化方面的优势。图3. 糖型分辨去折叠定量分析胎球蛋白构象稳定性最后，为了研究唾液酸化与蛋白质结构之间的相互作用，作者使用唾液酸水解酶对 bFT 进行消化，同时通过分子动力学模拟进一步阐明了气相中 Asn99 和 Asn156 唾液酸化对蛋白动态构象变化的影响。唾液酸化与去唾液酸化牛胎球蛋白的 MD 结果都表现出四个构象，且具有可接受的 CCS 误差（图 4d）。唾液酸化亚型（646.8 K）的熔解温度（Tm）高于去唾液酸化亚型（642.1 K），表明唾液酸化有助于维持蛋白质构象（图 4e）。对去折叠中间体中 α-helix 和 β-sheet 结构占比的分析表明，唾液酸化有利于维持 bFT 中二级结构的适当折叠（图 4f）。加热过程中的代表性展开特征（图 4g ）表明唾液酸化聚糖可以包裹并紧实蛋白质结构。综上，作者认为末端唾液酸化稳定了胎球蛋白构象并限制了其动态结构波动。图4. 唾液酸化对胎球蛋白构象的稳定作用该研究为深入理解蛋白质不稳定聚糖修饰的结构和功能提供了新的见解，为疾病诊断和治疗提供了新的理论基础。同时，该研究也为开发新的蛋白质结构解析方法提供了新的思路。相关研究成果以“Sialylation-induced stabilization of dynamic glycoprotein conformations unveiled by time-aligned parallel unfolding and glycan releasing mass spectrometry”(《构象分辨质谱助力微小差异蛋白构象高效解析》)为题在线发表于化学领域重要期刊、英国皇家化学会旗舰期刊 Chemical Science 上。        南开大学化学学院 2022 级硕士研究生王雅梅、科研助理贾翼菲以及南通大学刘以畅博士为该文共同一作。李功玉研究员和李金宇教授为本文共同通讯作者。美国威斯康星大学麦迪逊分校李灵军教授和刘源博士对本项目提供了重要的技术支持。本文主要质谱数据均采集于天津《物质绿色创造与制造海河实验室》结构质谱分析平台。本研究工作获国家重点研发计划、国家高层次人才计划、国家自然科学基金和中央高校基本科研业务费等项目资助。另附：南开大学李功玉课题组（详细信息请参考课题组主页：李功玉课题组 ( x-mol.com )）常年招聘科研助理和师资博士后，欢迎对大分子结构质谱感兴趣的同仁联系（ligongyu@nankai.edu.cn），重点引进具有有机合成化学、计算化学、细胞生物学和蛋白质组学等背景的相关研究方向人才。论文信息Sialylation-induced stabilization of dynamic glycoprotein conformations unveiled by time-aligned parallel unfolding and glycan releasing mass spectrometryYifei Jia, Yichang Liu, Yamei Wang, Jinyu Li* and Gongyu Li*Chem. Sci., 2024https://doi.org/10.1039/D4SC03672G作者简介            王雅梅 硕士研究生南开大学本文第一作者，2022 年本科毕业于南京师范大学，同年保送至南开大学化学学院攻读硕士学位（导师：李功玉研究员），研究课题主要聚焦疾病相关蛋白的结构质谱解析新方法开发。                                                                      刘以畅 讲师          南通大学          本文共同第一作者，2022 年于福州大学获物理化学博士学位（导师：李金宇教授），现任南通大学药学院讲师，研究方向为计算化学生物学与药物化学。                                                                                                        李功玉 研究员南开大学本文通讯作者，南开大学化学学院，特聘研究员、博士生导师。国家高层次青年人才计划入选者、国家重点研发计划青年项目首席科学家。2017 年博士毕业于中国科学技术大学化学系，随后在密西根大学和威斯康星大学麦迪逊分校完成博士后研究，于 2021 年 2 月加入南开大学化学学院，研究方向为大分子结构质谱分析。                                                                                                李金宇 教授福州大学本文共同通讯作者，教授、博士生导师，福州大学化学学院院长助理。2011 年于荷兰阿姆斯特丹大学和法国里昂高等师范学院获化学与材料学双硕士，2015 年于德国亚琛工业大学医学院获生物学博士学位，同年于德国于利希研究中心先进模拟研究院从事博士后研究，2016 年加入福州大学化学学院、生物药光动力治疗技术国家地方联合工程研究中心。研究方向为蛋白质计算化学生物学理论方法开发与应用。本文说明了离子淌度技术在蛋白构象研究中的重要作用。沃特世一直致力于不断开发创新质谱相关技术，如特色离子淌度技术、特色成像技术等，同时以“助力客户成功”为使命，期待更多的用户合作及科学成果！                                    

在蛋白质治疗药物的研发流程中，分析测试扮演着至关重要的角色。这主要源于几个方面的挑战：一是需要处理大量的样品；二是样品的准备工作既繁琐又耗时；三是利用LC-MS进行的分析时间较长。另外，针对生物反应器中的样品，我们还必须进行精心的前处理，以确保能够精准且灵敏地检测关键质量属性（CQA），尤其是那些难以察觉的低水平翻译后修饰（PTM）。本场网络研讨会将详细介绍一套高效的自动化工作流程，该流程涵盖了从样品前处理的简化（如Protein A纯化及mAb亚基的酶解处理）到利用先进的数据处理技术实现快速LC-MS分析的全过程。△扫码立刻报名讲座时间          北京时间 9月18日（星期三），17:00讲座概要          我们将分享使用Genovis FabRICATOR（IdeS）酶进行LC-MS亚基分析的应用实例，以比较生物类似药和创新型单克隆抗体（mAbs）的关键质量属性（CQAs）：实例1：细胞培养过程中样品的自动化mAb CQA评估：完整分子量和亚基分子量分析    分享者：Andreas Nageli, Genovis公司                        实例2：自动化mAb CQA评估在生物类似药与原研药比较中的应用：通过亚基分析了解克隆筛选和下游工艺样品的糖谱和未配对半胱氨酸的修饰情况          分享者：Samantha Ippoliti，沃特世公司                讲师简介              Andreas Nageli, PhD      Principal Scientist, Genovis      Andreas于2018年加入Genovis。作为首席科学家，他参与了SmartEnzyme新产品和应用的开发，并支持客户将Genovis SmartEnzymes引入他们的检测中。Andreas还负责Genovis的业务开发。他拥有瑞士苏黎世联邦理工学院微生物学博士学位。    Samantha IppolitiPrincipal      Scientist, Discovery & Development- Biopharma, Waters Corporation      Samantha（Sam）于2018年加入沃特世公司，从事基于LC-MS的生物制药表征的各种应用，包括肽图谱分析和方法开发，以及通过反相（RP）和离子交换（IEX）-MS进行完整/亚基分析。Sam具有使用BioAccord、Xevo系列、SYNAPT XS和Cyclic IMS LC-MS仪器进行分析的经验。在加入沃特世之前，她是马萨诸塞州剑桥市诺华公司LC-MS表征小组的一员，该小组为生物制药可开发性评估小组提供支持。（Sam于2012年从东北大学获得了化学理学学士学位。）抢先了解沃特世如何根据需要提供更好的自动化工作流程，帮助生物工艺团队获得高质量的LC-MS分析。点击链接，即刻报名！           

               由中国药学会生物药品与质量研究专业委员会主办的第十二届中国药学会生物技术药物质量分析研讨会，将于2024年9月19日至20日在北京举办。作为深耕生物医药领域的创新先驱，沃特世诚挚地邀请您参加于2024年9月19日下午举行的“沃特世生物药物分析前沿技术交流会”。本次会议旨在深入探讨双抗及ADC药物结构表征的最新研究热点、色谱柱技术在抗体与肽段药物分析中的创新应用、多肽药物质量控制的高级考量，以及沃特世生物工艺分析解决方案等前沿话题。同时，我们还将分享差示扫描量热仪、光散射检测技术在生物大分子表征中的实践应用，共同推动生物分析与质量研究领域的进步。△扫码立即报名注：因场地限制，报名人数有限，报满即止。时间        2024年9月19日，星期四地点        北京市丰台区南三环西路4号，北京万方苑国际酒店，六层多功能厅日程安排        13:00-13:30会议签到_                  13:30-13:40开场致辞_                13:40-14:25双抗及ADC药物结构表征研究技术热点陈国强 | 军科正源CMC执行总监14:25-15:10沃特世生物工艺分析解决方案唐浪浪 | 沃特世大中华区生物制药市场工程师15:10-15:30茶歇&交流_                  15:30-16:15多肽药物质量控制和高级结构考量王 磊 | 中肽生化质量研发经理16:15-17:00Premier色谱柱技术在抗体和肽段药物分析中的应用王欣玲 | 沃特世大中华区消耗品部产品专员17:00-17:45光散射检测技术在生物大分子表征中的应用王 恒 | 怀雅特北区销售经理17:45-18:00结束语_                  18:00-20:00晚宴_                  特邀嘉宾                    陈国强博士            军科正源CMC执行总监            陈国强博士，军科正源CMC执行总监，浙江大学医学学士，北京协和医学院生物物理与结构生物学博士。曾先后任北京协和医学院副研究员、韩国Hanmi Pharmaceuticals北京研究中心分析科学负责人、质量负责人等职务。2004年至今，一直从事蛋白质分析工作，参与领导了30多个抗体药物、融合蛋白药物、PEG修饰蛋白的早期发现、CMC研究和注册申报工作。2015-2017年，在国内率先创建了可开发性评价实验室，将“质量可控性”进行早期应用；2022-2024年，首次尝试深度质量研究策略，成功豁免了包括安评在内的全部非临床研究。发表研究论文20余篇，其中SCI收录12篇（第一作者/通讯作者8篇），4项国际专利、多项国内专利。          王磊            中肽生化有限公司质量研发经理            王磊，中肽生化有限公司质量研发经理。2015年开始从事多肽质量研究相关工作，至今已有9年的多肽分析相关经验。工作期间完成过多个仿制药以及多个新药IND、II期、III期、NDA等阶段的项目申报。质量研究的品种除了由普通氨基酸组成的常规多肽外，也包括侧链修饰、小分子偶联、大分子偶联、核素偶联前体等复杂品种。对不同类型不同阶段的产品申报、不同品种的质量研究均有深入的研究和理解。          附：第十二届中国药学会生物技术药物质量分析研讨会日程                                      

本文基于环形离子淌度和解吸电喷雾电离质谱成像系统(Cyclic IMS-DESI), 测定植物根组织中同分异构体的特异性空间分布，通过环形离子淌度4圈分离得到花椒毒素和佛手柑内酯各自空间定位。方法简单无需复杂样品前处理，使得同分异构体原位质谱成像成为可能。离子淌度功能的加入为原位质谱成像提供了新的分离维度，进一步提高质谱成像结果的丰富性和准确性。       优势                  DESI以其无损、无需衍生、无需基质、操作简单等特点成为目前质谱成像领域非常重要的研究工具；Cyclic环形离子淌度可提供高达750的淌度分辨率，且可根据实验需求调整淌度分辨率；质谱成像和离子淌度技术的完美融合，实现了同分异构体原位质谱成像；专属TriWave功能模块，充分发挥四极杆、碎裂池、离子淌度分离等各功能单元作用，为化合物结构深度解析奠定基础。图1. 目标同分异构体      实验结果                  01          离子淌度分离目标同分异构体        图2. 花椒毒素和佛手苷内酯混合标准品溶液在Cyclic中不同淌度分离圈数对应淌度分离谱图；A) 淌度分离单圈混合标准品淌度分离图；B) 淌度分离2圈混合标准品淌度分离图；C) 淌度分离4圈混合标准品淌度分离图。    02          根组织样品中花椒毒素和佛手苷内酯空间分布        采用标准品优化的离子淌度分离参数对实际植物根组织样品进行DESI-IM-MS分析，对比实际样品淌度分离单圈和4圈效果。结果显示：单圈淌度分离下可以获得花椒毒素和佛手苷内酯对应母离子质荷比的成像图，但通过淌度分离谱图可知此时成像图为二者混合叠加结果（图3.A）；4圈淌度分离后获得花椒毒素和佛手苷内酯相同质荷比下两张成像图，对应淌度分离图上漂移时间(Drift Time, DT)分别为43.69 ms和45.34 ms（图3.B）。借助Cyclic环形离子淌度多圈分离实现了原位电离分析下DESI质谱成像的同分异构体空间分布表征。图3. DESI分析植物根组织样品在Cyclic中不同淌度分离圈数对应淌度分离谱图；A) 淌度分离单圈样品淌度分离图及成像图；B) 淌度分离4圈样品淌度分离图及成像图。    03          离子淌度辅助定性和结构解析        沃特世离子淌度质谱仪专属TriWave功能模块，充分发挥四极杆、碎裂池、离子淌度分离等各功能单元作用，为化合物结构深度解析奠定基础。本次实验中首先通过离子淌度对目标同分异构体进行分离，并将样品中目标物淌度行为和标准品进行比对分别获得花椒毒素和佛手柑内酯空间分布。此外实验中还将经过淌度分离后的目标物进行碎裂，获得各自二级碎片图谱（图4.B和D），对碎片进行分析，将获得的同分异构体二级碎片与开源数据库MassBank中标准品二级谱图（图4.A和C）比对具有高度一致性，说明可以利用此功能在没有标准品情况下定性异构体。结果发现佛手柑内酯的主要碎片m/z 174，m/z 202，花椒毒素的主要碎片m/z 161，m/z 174，m/z 202。由于佛手柑内酯没有特定碎片使之与花椒毒素进行区分，因此如果没有离子淌度功能的补充，无法利用碎片差异获得此对同分异构体各自空间分布。提示通过Cyclic IMS-DESI可以实现：1）质谱成像原位区分同分异构体；2）淌度分离后的碎裂功能辅助定性和结构解析。图4. DESI-Cyclic环形离子淌度4圈淌度分离条件下实际样品中花椒毒素和佛手苷内酯淌度分离谱图及对应二级碎片谱图；A) MassBank库中佛手柑内酯二级谱图；B) 样品中DT43.69 ms峰二级谱图；C) MassBank库中花椒毒素二级谱图；D) 样品中DT45.34 ms峰二级谱图。    04          去除背景干扰        DESI质谱成像以其原位电离优势为大众熟知，与此同时也带来原位分析下不可避免的基质干扰问题，此时离子淌度技术的出现恰恰可以作为弥补，带来原位分析下的高质量质谱分析结果。本次实验通过样品单圈淌度分离已经可以非常好的体现离子淌度带给原位分析的优势。单圈淌度分离条件下，花椒毒素和佛手柑内酯混合标准品和样品中目标物均没有得到有效分离，但明显观察到样品背景中目标物存在干扰（图5.A）。此时通过淌度可以将背景干扰与目标峰分离，获得样品中特定组分空间分布信息，凸显了实际样品分析中离子淌度分离技术对原位质谱成像的关键性补充作用，使得实验结果更真实、准确。图5. DESI-Cyclic环形离子淌度单圈淌度分离条件下实际样品和混合标准品中花椒毒素和佛手苷内酯分离谱图；A) 实际样品中目标离子淌度分离图；B) 混合标准品中目标离子淌度分离图。          结论                  DESI XS与Cyclic环形离子淌度质谱联用可以显著提高峰容量。质谱成像原位分析中，离子淌度的加入可以有效去除背景干扰。原位成像水平对同分异构体进行空间分布上的有效区分。专属TriWave功能模块，实现对特定离子淌度分离后碎裂，辅助结构解析。 相关产品：1. SELECT SERIES Cyclic IMS |离子淌度质谱 | Waters2. SYNAPT XS | 离子淌度飞行时间质谱仪 | Waters3. 质谱成像 | DESI和MALDI | Waters                                                                                      

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今年3月份，国务院印发《推动大规模设备更新和消费品以旧换新行动方案》，旨在推动设备以旧换新，提能增效，加快构建新发展格局、推动高质量发展。其中明确指出“严格落实学科教学装备配置标准，保质保量配置并及时更新教学仪器设备。”                        沃特世特设教学包助力设备更新、以旧换新！                      还在苦思冥想怎么打动导师的“芳心”，顺利进组学习吗？        沃特世教学包让你“带艺投师”，面对实验室仪器不再发怵！              表面高冷，实则社恐，不知道怎么带新来的师弟师妹熟悉项目？        【发起群聊】-【转发沃特世教学包链接】，简单两步，仪器操作教学分分钟搞定！              亲传给“大师兄”的仪器使用规范，“传帮带”过程中一删再删，越来越歪？        Waters教学包帮您建立规范的实验室操作流程，保证数据合规性、延长仪器使用寿命。      沃特世教学包，让开学季不再烦恼！              精心设计的色谱、质谱教学包，使用性能优异、使用简便的色谱及质谱仪器，同时配备教师、学生专用手册及仪器/原理介绍视频，一体化方案，满足高校的教学需求。积累色谱质谱分析实践经验，帮助学生做好入行准备。选择沃特世教学包，您同时可以获得：                  关于【仪器原理】和【仪器操作】的两方面培训。能够让学生“知其然”且“知其所以然”，既助力眼下的研究工作，又为学生的未来职业发展夯实基础。【教师手册】和【学生手册】。省去您设计教学方案的时间，让老师和学生都能更轻松地完成系统性的教与学。同时配备完备的液相和质谱教学资料包。适用于教学的操作简便、维护轻松的仪器。斯旺西大学医学院实验室负责人Rhodri Owen先生这样评价：      沃特世ACQUITY QDa质谱检测器的优点在于它非常易于使用，维护成本非常低，每年自动校准一次即可，易耗件是直接插拔的，如果脏了或损坏了，可以很容易地换掉。对于开始学习MS的人来说，这是理想的选择。      沃特世在节能环保方面做出了巨大努力，坚持在不牺牲性能的前提下采用能耗更低、材料更环保的设计。以ACQUITY QDa II质谱检测器为例，其荣获My Green Lab颁发的ACT环境影响因子标签。与其他品牌的同类仪器相比，ACQUITY QDa II质谱检测器的能耗可降低70%。      诚信至上，始终如一助力教学、设备更新，沃特世在行动！      能开展这方面的课程，不仅能提升大学本身的水准，更能让本校学生在就业市场上脱颖而出。沃特世积极响应国家号召，特针对高校科研领域客户推出“科学家计划”，以更优惠的价格获得教学设备，并免费获得相关的教学材料！扫描下方二维码填写您的需求吧！      

     想了解质谱科研前沿动态？今天，小编就分享几位大咖在2024 ASMS的精彩讲座！                            Graham Cooks教授普渡大学杰出教授，对串联质谱、原位电离、质谱小型化等技术的发展做出了卓越贡献，DESI技术主要发明人之一。                    演讲主题：DESI：成像、反应筛选、生物测定摘要：背景。涵盖早期工作、组织诊断、成像的应用以及机制的建立。微滴中的加速反应。包括发现、范围、机理。机理部分包括水界面上的反应物种、部分溶解和界面上的电场。举例说明了各种反应，特别是生命起源化学中的反应，如氨基酸在水中缩合生成肽。介绍了微滴反应中的手性。基于DESI的自动化系统中的高通量反应筛选、小规模合成和生物测定。特别聚焦了化学合成中的后期功能化、基于DESI的高质量酶动力学研究以及利用该系统在药物开发方面取得的进展。完整视频链接：DESI: Imaging, Reaction Screening, Bioassays                      Perdita Barran教授化学质谱系主任，曼彻斯特生物技术研究所                             演讲主题：皮脂和血清代谢组学分析监测帕金森病进展标志物摘要：Barran教授团队的研究使用质谱法（MS）分析皮脂排泄的内源性化合物和从皮肤拭子中获得的内源性化合物来寻找帕金森病（PD）的生物标志物，以便进行诊断。在实验室中，该方法可以以>95%的准确率确定一个人是否患有PD。在本次演讲中，Barran教授分享了她的团队使用Xevo MRT研究方法学和最近的发现，并就皮脂非侵入性采样发表独到见解。完整视频链接：Metabolomics Profiling of Sebum and Serum to Monitor Progression Markers of Parkinson's DiseaseBarran教授团队的研究证明了质谱技术在实验室环境中能够以无创的方式精确检测特定疾病，这种技术为疾病的早期筛查与预防提供了更多的可能性。虽然精确度至关重要，但在实际应用中，质谱技术仍需要应对高通量分析需求的挑战。Linington教授就这一问题展开了探讨。                  Roger Linington教授加拿大天然产物和高通量筛选研究主席，西蒙弗雷泽大学                演讲主题：超高分辨率质谱在非靶向代谢组学分析中的应用摘要：非靶向代谢组学已成为复杂混合物分析的核心技术。然而，在天然产物提取物等高度复杂的系统中，快速准确地确定化学成分仍然具有挑战性。例如，高通量筛选实验通常每周可以处理50,000个样本，比大多数代谢组学工作流程快几个数量级，使传统数据采集方法左支右绌。为了解决这个问题，Linington教授的实验室最近开发了MultiplexMS，一种用于高通量代谢组学数据采集的方案，并在高速高分辨下Xevo MRT上进行了验证。与传统方法相比， MultiplexMS这个新平台将数据采集速率提高了20倍。在本次演讲中，Linington教授将介绍MultiplexMS平台，并使用现有ESI-TOF技术的高分辨率数据比较分析该技术的性能。完整视频链接：Application of Ultra-High-Resolution Mass Spectrometry to Non-Targeted Metabolomics Analysis          ▷ 后记                    听完了这么多大咖的工作成果展示，有没有感觉醍醐灌顶呢？是不是很期待把大咖的研究方法转移到自己的项目中呢？Waters MS产品可助您轻松实现最大胆的科学畅想。从分辨率与采集速率兼备的Xevo MRT质谱仪，到支持DESI和MALDI无缝切换的MSI系统解决方案，一应俱全，助您打造一流实验室，孵化开创性科研成果。                                                                                                

       药物开发和表征分析复杂多变，常令人望而却步，您需要创新解决方案来帮您攻克面前的挑战。为此，我们精心策划了一场直击这些挑战的网络研讨会。准备好让您的生物制药项目焕然一新了吗？将您的研究工作推向生物制药创新前沿。立即报名，锁定席位！让我们共享这场革新之旅的精彩讲座，一起收获丰富知识！△立即扫码，加入这场非凡的革新之旅吧！时间      2024年9月17日（星期二），16:30（北京时间）研讨会主题      本场网络研讨会将先介绍光散射技术及其应用，然后展示三个具有启发性的案例研究：抗体介绍SEC-MALS和DLS如何表征分子大小、多分散性和摩尔质量分布。聚乙二醇化酶治疗药物了解PEG-蛋白质比例和溶液粘度的测量方法。PolyA-LNP了解光散射技术在先进治疗药物中的应用。演讲嘉宾              Andrei Hutanu博士ten23 health | 科学家          Michal Raczy博士ten23 health | 药物设计资深科学家        Daniel Some博士沃特世 | 怀雅特技术公司资深首席科学家点击此处，加入这场非凡的创新之旅吧！                  

                                                                                                                                   在日常样品定量分析过程中，我们可能会因为缺少某些组分的标品或其他原因，需要用到另外一种组分的响应来对其进行定量分析，面对这种情形我们该如何进行数据处理呢？这一期我们就通过主组成分的标准曲线来对杂质进行定量分析的案例回答这一问题。                                                  通过主成分的标准曲线来计算杂质的含量，可分为以下两种情形：处理方法的“组分”选项卡中包含该杂质（已知杂质）；处理方法的“组分”选项卡中不包含该杂质（未知杂质）；接下来我们以图1为例，一起来看一下不同的情形下我们应该如何设置处理方法参数，才能实现通过主成分计算杂质含量的目的。图1.样品谱图。一、已知杂质                            若杂质包含在处理方法“组分”列表中，按照图2进行方法设置。将杂质的“曲线参比”列设置为“主成分”，即杂质的含量计算将使用“主成分”峰的校正曲线来计算。同时可以根据杂质和组成份的相对响应，在“相关响应”列输入杂质的相对响应因子。杂质的响应将乘以“相关响应”值，然后使用调整后的响应通过参比校正曲线计算含量。图2.已知杂质处理方法设置。二、未知杂质                          还是以图1为例，不同的是把第二个和第六个杂质色谱峰更改为未知杂质，即未包含在处理方法“组分”列表中。按照“一、已知杂质”方法设置后（图3），样品处理结果如图4所示。图3.处理方法设置。图4.样品处理结果。从处理结果可以看出，处理方法“组分”列表中包含的杂质可以正常用主成分的校正曲线计算含量，且计算使用的曲线ID一样，都是主成分的校正曲线。但谱图中存在的杂质峰且未包含在处理方法“组分”列表中的未知杂质，比如保留时间0.609 min和2.823 min的色谱峰，就无法计算其含量。对于这样的杂质，我们可以按照图5进行方法设置。图5.未知杂质处理方法设置。在处理方法“组分”列表中找到“缺省峰”列，勾选主成分“缺省峰”列的复选框，然后在“缺省开始峰”和“缺省终止峰”分别输入起止的时间范围。在该时间范围内洗脱的任何峰都将按照主成分的校正曲线进行定量计算。“用于按RRT对未命名峰进行命名的保留时间参比”选项设置为主成分，这样对于检测到的未知峰，软件将自动按其相对主成分的保留时间RRT进行命名。使用图5所示的处理方法进行数据处理，处理结果如图6所示：图6.样品杂质处理结果。从处理结果可以看出，已知杂质和未知杂质都计算出了含量结果，“曲线ID”一致表明都是用的主成分峰的校正曲线。同时对于处理方法“组分”列表中未包含的杂质，软件也自动对其按照主成分的相对保留时间进行了命名。以上就是通过主成分的标准曲线来计算已知和未知杂质含量的方法。怎么样，是不是很简单，您学会了吗？         

                 黄发金箍，腰围虎皮，手举金箍棒一根，足踏云鞋皆相称。各位天命人这两天的游戏体验如何呀？西天取经路漫漫，多亏有大圣的守护，唐僧一行才能渡过九九八十一难，修成正果。但你知道吗，我们的身边也有这样一位“悟空”，用一双金睛火眼，让PFAS无处遁形，默默守护我们的健康。PFAS全称“全氟烷基和多氟烷基化合物”。过去几十年来，人们在纺织、表面活性剂、食品包装、不粘涂层、灭火泡沫等产业中大量使用PFAS致使它的足迹遍布全球每一个角落。随着PFAS种类和数量的不断增加，使用传统靶向方法监测PFAS的工作愈发困难。                  为此，沃特世开发了一种将ACQUITY Premier与Xevo MRT质谱仪联用的方法对样品进行分析，让PFAS无处遁形。      结论                一步到位：使用waters_connectTM中的UNIFITM应用程序，实现非靶向筛查、发现和定量分析的一体化软件解决方案。功能多样：UNIFI筛查和发现工作流程可提供丰富的选项，包括从质量数亏损过滤、PFAS同系物的质量数保留时间过滤到在线数据库和谱库搜索。精确可靠：台式Xevo MRT质谱仪分析显示，在m/z 556.2765（亮氨酸脑啡肽）处具有 操作简便：采用直接进样法进行PFAS鉴定和定量分析，有助于突破使用SPE进行样品前处理的局限性，以及使用传统靶向方法鉴定时对市售标准品的需求。若需提高灵敏度，还可以选择增加进样体积。数据合规：生成的数据集可用于靶向定量方法，并且可以针对使用不同数据库来源的鉴定和发现工作流程进行回顾性挖掘。      方法              通过联用ACQUITY Premier与Xevo MRT质谱仪采集，waters_connect进行处理。LC系统：                        色谱：经PFAS解决方案安装套件（P/N：176004548）改进的Waters ACQUITY Premier超高效液相色谱色谱柱：ACQUITY Premier BEH C18, 1.7 µm, 2.1 × 100 mm, 90 Å（P/N：186009453）样品瓶：聚丙烯自动进样器小瓶，带聚乙烯瓶盖（P/N：186005230）色谱梯度：    表 1. 流动相A：95:5水:甲醇（含2 mM醋酸铵）；流动相B：100%甲醇（含2 mM醋酸铵）MS系统：                              使用Xevo MRT 质谱仪图示1.台式多反射飞行时间质谱仪示意图。PFAS分析中，仪器在负离子模式下运行，m/z范围为50-1200 Da，使用MSE采集数据。工作流程：                        图示2. 饮用水装于15 mL试管中，并分别用两个不同校准浓度的PFAS标准品重复加标，然后，联用ACQUITY Premier液相色谱系统与Xevo MRT，进行校准标准品和样品的分析。使用waters_connect软件平台和UNIFI应用程序进行数据采集和处理。仪器参数：                                实验结果                一步到位：                          图1：数据处理（图1 A）和数据过滤（图1 B）。数据处理包括峰提取、同位素和加合物聚类以及保留时间校准。数据过滤功能对应一组参数，用于显示符合用户定义标准的组分列表。例如，用于查看满足以下条件的组分的过滤器：在3-5 min之间洗脱、m/z大于500 Da且处于针对PFAS定义的质量数亏损范围内。直观可靠：                              运用Waters PFAS谱库鉴定PFAS：使用准确质量数(    图2：2,000 ng/L混标中的全氟辛烷磺酸(PFOS)标识为 [M+H]+，质量数测量精度精确定量：                              通过直接进样法鉴定并定量了加标饮用水中的PFOS，质量数测量精度为107 ppb。    图3：A：20 ng/L混标中的全氟辛烷磺酸(PFOS)提取离子流图(XIC)，B：加标饮用水中PFOS的XIC。在加标饮用水中鉴定出m/z 498.9303的PFOS，质量数测量精度为 ± 100 ppb，信噪比为 ± 17。信噪比采用峰到峰法计算。C：低碰撞能量下离子响应的校准曲线。线性回归拟合采用1/X加权，相关系数为R2 = 0.99327。20 ng/L至5,000 ng/L范围内的PFOS响应呈线性。        后记                Xevo MRT 质谱仪可以实现：以更高分辨率和灵敏度采集数据，不受采集速率影响，确保您能够分离复杂基质中的分析物在生物相关浓度下以高水平的质量精度实现深入探索借助市场前沿的色谱柱填料、分离和创新的相关信息学技术，结合灵活的台式平台中的各种高端技术，缩短获得结果的时间凭借出色的系统重现性和耐用性，提供高质量的实验结果并解决棘手难题无论您是需要监测生产过程中引入的PFAS污染，还是检测产品、环境中的PFAS含量，Xevo MRT质谱仪都能满足您的需求。无论您是需要监测生产过程中引入的PFAS污染，还是检测产品、环境中的PFAS含量，Xevo MRT质谱仪都能满足您的需求。                                                                                                

       凝胶渗透⾊谱分析需要采⽤⾼效液相⾊谱(HPLC)系统来提供精确的流速和可重现的结果。Waters Arc HPLC系统在Empower 3软件环境下运⾏，可提供精确的流速，从⽽在GPC分析中获得更准确、可重现的峰。                实验⽅法参数⻅表1。本研究使⽤聚⼄⼆醇和聚环氧⼄烷标准品(PEG/PEO)绘制校准曲线（图1）。表1.⽅法参数表图1. PEO/PEG绘制的校准曲线图2. PEO/PEG校准标准品六次进样的结果通过PEO/PEG混合分⼦量标准品6次进样的重叠图证明Arc HPLC泵具有优异的流速精密度。使⽤两根线性GPC⾊谱柱和30 min运⾏时间获得的峰保留时间和峰分⼦量(Mp)相对标准偏差⼩于0.3%（表3和表4）。表3和表4. ⻩⾊盖PEO/PEG校准标准品六次进样所得峰保留时间和峰分⼦量(Mp)的Empower 3数据报告。Empower 3有很多内置功能，绘制分⼦量分布和累计%，在结果报告中自定义显示。还可以设置需呈现的峰结果字段，例如自定义计算结果、分子量占比、理论塔板数（需有系统适应性插件）等。图3. 227KDa PEO/PEG的分⼦量分布和累计%搭载Empower 3软件的Arc HPLC是⼀款功能⾮常强⼤的GPC数据处理⼯具，泵可提供⾼质量凝胶渗透⾊谱分析所需的优异流量精密度，所有基本GPC计算都可以使⽤配备GPC选项的Empower 3软件完成，并且提供许多复杂的GPC计算，适⽤于从基础到复杂的结果和报告需求。                                                                                参        考        阅        读                重磅！沃特世推出全新Arc HPLC高效液相色谱Arc HPLC系统                                                                                                      

       在当今科学研究和工业分析中，我们经常面临复杂体系的分离挑战，如何有效、准确、快速地将目标化合物分离得到单一色谱峰、并且成功分析，是分析科学家们不断追求的目标。20年前，沃特世推出首款ACQUITY UPLC系统，开启了液相色谱的“超高效”时代。UPLC以其高分辨率、高灵敏度和快速分析的特点，为复杂体系的分离分析提供了强大的工具。                    二十年来，沃特世ACQUITY UPLC技术不断创新，陆续推出了H-Class PLUS、I-Class PLUS、M-Class、UPC2、APC等独具特色的超高效分离分析系统。ACQUITY家族正以其出色的分离能力和速度，以及优异的灵敏度，直面挑战，在生物医学、药物研发、食品环境、化工材料等复杂样本的分析中，展示出独特的应用潜力。      本期【UPLC二十周年大咖说】，我们特别邀请到两位沃特世ACQUITY资深用户、色谱分析领域专家，为大家带来UPLC在复杂组分分析中的应用。△立即扫码报名 时间          2024年8月27日（周二），14:00 – 16:00 日程安排          14:00-14:45UPC2超高效合相色谱在手性药物分析中的应用      山广志        中国医学科学院医药生物技术研究所分析测试中心主任        博士，研究员，硕士生导师。中国医学科学院医药生物技术研究所分析测试中心主任；国家标准物质技术审评专家；中国生化制药工业协会专家委员会委员；中国民族医药协会医药现代化与临床专业委员会理事；中国医药创新促进会创新药物研发专委会委员；中国药品监督管理研究会仿制药一致性评价专委会委员。主要从事药物开发、药物分析、药品质量以及检测技术研究工作。开展靶向药物片段筛选与设计、结构确证、杂质谱研究、分子相互作用研究等研究。构建起专业的药物质量研究平台，致力于药物质量研究新技术新方法的探索与开发。在国内外学术期刊发表研究论文60余篇，授权发明专利8项。14:45-14:50互动问答14:50-15:35 基于UPLC-MS/MS技术测定小鼠坐骨神经NAD和相关代谢物方法的建立            杜振霞        北京化工大学教授        北京化工大学教授，先后从事红外光谱、气相色谱-质谱，液相色谱-质谱，超临界色谱-质谱等大型仪器的管理和功能开发等工作。基于色谱-质谱技术开发了乳品中营养成分分析、药品包装材料和食品包装材料相容性研究，复杂基质中痕量物质的检测、环境中痕量VOCs和消费品中VOCs的监测研究，各种复杂基质样品中痕量分析方法。擅长谱图解析、配方剖析和材料表征。2012年在美国普渡大学做访问学者。作为负责人承担国家自然科学基金、国家科技支撑项目子课题、质检总局公益等多项项目及多项企业合作项目。在 Analytical Chemistry，Journal of Chromatography A,，Journal of Hazardous Materials，Food Chemistry.等期刊上发表论文100多篇，SCI论文60多篇。完成专著二部，参与编写专著三部，参编两部数字教材。获中国检验检疫学会科技二等奖，市场监管总局科研成果三等奖等。北京化工大学教学名师。15:35-15:40  问答和抽奖    与专家互动交流，更有幸运抽奖等您来，欢迎扫码预约报名！△幸运奖品等您来拿                                                                                                     

黄发金箍，腰围虎皮，手举金箍棒一根，足踏云鞋皆相称。各位天命人这两天的游戏体验如何呀？西天取经路漫漫，多亏有大圣的守护，唐僧一行才能渡过九九八十一难，修成正果。但你知道吗，我们的身边也有这样一位“悟空”，用一双金睛火眼，让PFAS无处遁形，默默守护我们的健康。PFAS全称“全氟烷基和多氟烷基化合物”。过去几十年来，人们在纺织、表面活性剂、食品包装、不粘涂层、灭火泡沫等产业中大量使用PFAS致使它的足迹遍布全球每一个角落。随着PFAS种类和数量的不断增加，使用传统靶向方法监测PFAS的工作愈发困难。为此，沃特世开发了一种将ACQUITY Premier与Xevo MRT质谱仪联用的方法对样品进行分析，让PFAS无处遁形。结论● 一步到位：使用waters_connectTM中的UNIFITM应用程序，实现非靶向筛查、发现和定量分析的一体化软件解决方案。● 功能多样：UNIFI筛查和发现工作流程可提供丰富的选项，包括从质量数亏损过滤、PFAS同系物的质量数保留时间过滤到在线数据库和谱库搜索。● 精确可靠：台式Xevo MRT质谱仪分析显示，在m/z 556.2765（亮氨酸脑啡肽）处具有 ● 操作简便：采用直接进样法进行PFAS鉴定和定量分析，有助于突破使用SPE进行样品前处理的局限性，以及使用传统靶向方法鉴定时对市售标准品的需求。若需提高灵敏度，还可以选择增加进样体积。● 数据合规：生成的数据集可用于靶向定量方法，并且可以针对使用不同数据库来源的鉴定和发现工作流程进行回顾性挖掘。方法通过联用ACQUITY Premier与Xevo MRT质谱仪采集，waters_connect进行处理。LC系统：◎ 色谱：经PFAS解决方案安装套件（P/N：176004548）改进的Waters ACQUITY Premier超高效液相色谱◎ 色谱柱：ACQUITY Premier BEH C18, 1.7 µm, 2.1 × 100 mm, 90 Å（P/N：186009453）◎ 样品瓶：聚丙烯自动进样器小瓶，带聚乙烯瓶盖（P/N：186005230）◎ 色谱梯度：表 1. 流动相A：95:5水:甲醇（含2 mM醋酸铵）；流动相B：100%甲醇（含2 mM醋酸铵）MS系统：使用Xevo MRT 质谱仪：图示1.台式多反射飞行时间质谱仪示意图。PFAS分析中，仪器在负离子模式下运行，m/z范围为50-1200 Da，使用MSE采集数据。工作流程：图示2. 饮用水装于15 mL试管中，并分别用两个不同校准浓度的PFAS标准品重复加标，然后，联用ACQUITY Premier液相色谱系统与Xevo MRT，进行校准标准品和样品的分析。使用waters_connect软件平台和UNIFI应用程序进行数据采集和处理。仪器参数：实验结果一步到位：图1：数据处理（图1 A）和数据过滤（图1 B）。数据处理包括峰提取、同位素和加合物聚类以及保留时间校准。数据过滤功能对应一组参数，用于显示符合用户定义标准的组分列表。例如，用于查看满足以下条件的组分的过滤器：在3-5 min之间洗脱、m/z大于500 Da且处于针对PFAS定义的质量数亏损范围内。直观可靠：运用Waters PFAS谱库鉴定PFAS：使用准确质量数(图2：2,000 ng/L混标中的全氟辛烷磺酸(PFOS)标识为 [M+H]+，质量数测量精度精确定量：通过直接进样法鉴定并定量了加标饮用水中的PFOS，质量数测量精度为107 ppb。图3：A：20 ng/L混标中的全氟辛烷磺酸(PFOS)提取离子流图(XIC)，B：加标饮用水中PFOS的XIC。在加标饮用水中鉴定出m/z 498.9303的PFOS，质量数测量精度为 ± 100 ppb，信噪比为 ± 17。信噪比采用峰到峰法计算。C：低碰撞能量下离子响应的校准曲线。线性回归拟合采用1/X加权，相关系数为R2 = 0.99327。20 ng/L至5,000 ng/L范围内的PFOS响应呈线性。后记Xevo MRT 质谱仪可以实现：① 以更高分辨率和灵敏度采集数据，不受采集速率影响，确保您能够分离复杂基质中的分析物② 在生物相关浓度下以高水平的质量精度实现深入探索③ 借助市场前沿的色谱柱填料、分离和创新的相关信息学技术，结合灵活的台式平台中的各种高端技术，缩短获得结果的时间④ 凭借出色的系统重现性和耐用性，提供高质量的实验结果并解决棘手难题⑤ 无论您是需要监测生产过程中引入的PFAS污染，还是检测产品、环境中的PFAS含量，Xevo MRT质谱仪都能满足您的需求。

                 由于许多聚合物标准品在热解时会表现出可重现的特征性碎片峰，因此谱库搜索是鉴定聚合物材料中化学成分的重要工具。但是，热裂解物的谱库并非免费，并且电子轰击(EI)的高能量会导致灵敏度和选择性不足，且对于多元共聚等聚合物的区分能力有限。                                  采用大气压气相色谱(APGC)和高分辨率质谱的热裂解-APGC-QToF是一种有效的分析工具，APGC可完成“更软”的电离，从而实现分子离子检测；Q-ToF MS可以在MSE模式下采集数据，同时采集低碰撞能量和高碰撞能量谱图。由此，可以获得母离子和碎片离子的精确质量数信息并据此进行结构表征，最终辅助化合物鉴定【1】。热裂解产物谱库创建功能是表征聚合物材料的重要工具，有助于分析人员更轻松地鉴定化学成分。本技术概要考察了py-GC-EI-MS和py-APGC-QToF MS的热裂解产物谱库搜索功能。考察结果介绍了一种简单的组合方法，即使用内嵌的聚合物谱库来提高高分子化合物鉴定的可信度。             优势                热裂解-APGC-QToF MS是一种有效的分析工具，且可以在LC-QTof同一高分辨率质谱平台实现拓展。使用APGC的软电离技术可以检测分子离子，从中得出元素组成用于帮助鉴定化合物。Py-APGC-QToF MS可用于根据聚合物标准品的平均质谱图创建谱库，并将其应用于实际样品，流程化新增和自建库。            样品描述                称取一系列聚合物标准品约0.1 mg，然后加载到两个石英棉塞之间的玻璃毛细管中。将玻璃管放入热裂解仪自动进样器中，并在GC-EI-MS和APGC-QToF MS上重复分析三次。         热裂解条件                热裂解仪：CDS 5000，CDS分析型进样口温度：310 °C升温速率：20 °C/ms最终温度：750 °C                    GC条件                汽化室模式：分流分流比：75:1分流器流量：75 mL/min进样口温度：310 °C色谱柱：Rtx-5MS, 30 m × 0.25 mm × 0.25色谱柱流速：1 mL/min隔垫吹扫流速：3 mL/min柱温箱梯度：45 °C保持5 min，以20 °C/min的速率升至300 °C，最终保持10 minGC总运行时间：27.75 min                质谱条件                //                系统1：Xevo TQ-GC            电离模式：EI+电子能量：70 eV发射：300 µA离子源温度：250 °C质量范围：m/z 10–650扫描时间：0.1 sGC接口温度：300 °C//            系统2：Xevo G2-XS QTof*            电离模式：APGC+电离电晕电流：3 µA采样锥孔电压：30 V离子源温度：150 °C质量范围：m/z 10-1500扫描时间：0.2 s锥孔气流速：50 L/h辅助气体流速：550 L/hGC接口温度：280 °CMSE碰撞能量：低能量6 V，高能量15–45 V*（使用Xevo G3 QTof时，预期性能相当或更优）。            结果与讨论                根据纯聚合物标准品的平均质谱图为每个仪器配置建立一个谱库，并在现有的NIST谱库平台中使用该谱库（图1）。图1.根据两种仪器平台（py-GC-EI-MS和py-APGC-QToF-MS）分析的聚合物标准品创建的NIST数据库条目示例。  为考察数据库的搜索能力，随后在与聚合物标准品相同的条件下分析了塑料和生物塑料样品，然后在内部谱库中搜索匹配的谱图。在仪器上以全扫描模式采集数据，根据正向匹配和反向匹配得分，py-GC-EI-MS和py-APGC-QToF MS谱库显示的匹配结果相当。通常情况下，匹配结果大于800被视为良好匹配，这就增加了使用谱库进行正确峰归属的概率【2】。  例如，两台仪器生成的回收PET（聚对苯二甲酸乙二醇酯）的谱图搜索主要匹配结果均为PET标准品。  图2.py-GC-EI-MS谱库中PET的谱库正向匹配和反向匹配得分。  图3.py-APGC-QToF MS谱库中PET的谱库正向匹配和反向匹配得分。在另一个生物塑料吸管的谱图搜索中，正向匹配和反向匹配结果表明PLA是该样品的主要成分。图4.py-GC-EI-MS谱库中PLA的谱库正向匹配和反向匹配得分。  图5.py-APGC-QToF MS谱库中PLA的谱库正向匹配和反向匹配得分。      结论            py-GC-EI-MS和py-APGC-QToF MS均可用于根据聚合物标准品的平均质谱图创建谱库。塑料和生物塑料样品的质谱图可以轻松集成到现有的商业数据库中（例如NIST），并用于对比搜索真实样品，实现快速推断鉴定塑料成分。在需要进一步表征塑料产品的应用中，py-APGC-QToF MS还具有其他优势，例如软电离可减少碎片并促进分子离子检测，从而提高未知化合物鉴定的可信度【1】。在共聚物分析中也可带来更多特征性（见参考阅读）。        参考资料          1. Sanig R., Cojocariu C., Jones R. 热裂解-气相色谱-高分辨率质谱结合软电离技术，提高聚合物表征的可信度. 沃特世应用纪要, 720007599ZH, 2022年4月.        2. NIST/EPA/NIH Mass Spectral Library Compound Scoring: Match Factor, Reverse Match Factor, and Probability, Jordi Labs.                 参考阅读          半导体行业解决方案之共聚物分析                                                                                         

                       解吸电喷雾电离技术(DESI)现已成为市场上广泛应用的成像技术，可实现更小的像素尺寸和更高的图像分辨率。对单细胞的测定，是现今前沿科学研究的热门方向，使用DESI XS能否进行单细胞的测试呢？今年美国质谱年会(ASMS)上，沃特世展示了如何借助DESI™ XS进行5 μm空间分辨率的成像，从而实现对单细胞层面上的成像。              结论      兼容性与简易性：使用商用DESI XS离子源，无需重大改动即可实现5 μm左右的空间分辨率。高通量：低流量DESI非常稳定，适用于大样本分析(大于20个组织切片)。稳定性强：使用商品化的部件，保证稳定性和数据质量的情况下，进行超过35小时的长时间连续采集。高效率与高质量：在最低300 psi的背压、250 nL/min的流量下，可显著提高图像分辨率。利用HDI(1.8)软件以更高效地进行成像。        方法      使用市售的 DESI 离子源(DESI XS，Waters)分析猪肝、人肾上腺和大鼠脑组织。DESI XS离子源配有高性能喷雾器、加热传输管路(HTL)和μBinary溶剂管理器流体系统(ACQUITY UPLC M-Class BSM)。为进行高分辨率低流量DESI分析，对该系统进行了一些可逆的微小改动：为改善溶剂输送，在溶剂管路中加入了1.7 μm(300 μm x 150 mm)ACQUITY C18色谱柱。        DESI设置如下                  溶剂：95:5 MeOH:水      溶剂流速：200-250 nL/min      雾化气体压力：1.35 bar      毛细管电压：0.79-0.85 kV      喷雾头到样品表面的距离：      喷雾头到离子进口的距离：3-5 mm      喷雾器角度：70°      HTL：450℃(负模式) 250℃(正模式)                  Xevo™ G3 QTof质谱仪采集                  负离子和正离子模式，离子源温度为150℃，锥孔电压为80 V，所有其他设置均为默认值。  HDI软件方法设置：使用250 nL/min的低流量设置，先以100 μm像素大小获取初始图像，然后以50 - 5 μm像素大小重新获取选定区域的图像。        研究结果              分辨率高                  将溶剂输送流速从典型的每分钟2 μL降低到250 nL，可将喷射束直径从约20-25 μm减小到  图1.纳升流动DESI与传统流动DESI的对比示意图。利用低流量DESI的非破坏性，开发的数据驱动显微方法如下图所示。    图2.HDI 1.8数据驱动显微镜工作流程，A）在模式选项卡中定义并获取低分辨率图像的初始区域。B) 在HDI中处理和检视图像。C) 在分析选项卡中选定感兴趣的区域。D) 将选定区域导入模式选项卡，并以更高分辨率采集。E) 在原始低分辨率图像上处理并显示高分辨率子区域。        兼容性与稳定性强                  低流量DESI能在多天采集的多个组织中保持稳定。在标准分析后，可以选定感兴趣的区域进行高分辨率分析。  图3.左图：以50 μm分辨率采集的人类肾上腺癌组织图像。右上图：以5 μm分辨率重新采集的4号组织子区域。右下：Umap/DBscan对所需的5 μm区域进行分割的结果。低流量DESI在高分辨率(10 μm像素大小)下长时间(大于35小时)采集也很稳定。  图4.左图：以10 μm像素尺寸绘制的整个大鼠大脑矢状切面，其扩展部分显示了小脑内部的细节。右图：数据组中与组织最相关20个的单异构离子。        效率与质量兼备                  将5 μm像素大小的图像与显微图像中看到的特征进行比较，估计达到的分辨率小于10 μm。图5.A：图4中数据组一小块区域的扩展；B：A的Umap/DBscan分割结果，紫色部分与C中显微图像中的细胞相对应；D：重新采集5 μm处的区域，C中可见的细胞的分辨率有所提高。        后记              解吸电喷雾电离(DESI)质谱技术越来越成熟，应用方向愈加广泛。现阶段来说，已可以朝着挑战单细胞成像的方向发展，如您有希望进行单细胞测试的合作意向，或希望了解更多DESI的应用方向，下载DESI应用文集，可扫描下方二维码告诉我们。    △立即扫码，告诉我们您的需求